Rivista
/
/
Extrahera modifierade mikrotubuli från däggdjursceller för att studera mikrotubuli-proteinkomplex med kryoelektronmikroskopi
JoVE Journal
Biochimica
This content is Free Access.
JoVE Journal Biochimica
Extracting Modified Microtubules from Mammalian Cells to Study Microtubule-Protein Complexes by Cryo-Electron Microscopy

Extrahera modifierade mikrotubuli från däggdjursceller för att studera mikrotubuli-proteinkomplex med kryoelektronmikroskopi

DOI:

08:02 min

March 03, 2023

, , ,

Capitoli

  • 00:05Introduction
  • 00:43Cell Culture and Harvesting
  • 01:30Microtubule Extraction
  • 04:13Cryo-Electron Microscopy (EM) Grid Preparation
  • 06:16Results: Analyzing Microtubule-Protein Complexes
  • 07:34Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Här beskriver vi ett protokoll för att extrahera endogent tubulin från däggdjursceller, som kan sakna eller innehålla specifika mikrotubulimodifierande enzymer, för att erhålla mikrotubuli anrikade för en specifik modifiering. Vi beskriver sedan hur de extraherade mikrotubuli kan dekoreras med renade mikrotubulibindande proteiner för att förbereda galler för kryoelektronmikroskopi.

Video correlati

Read Article