/
/
Ekstraktion af modificerede mikrotubuli fra pattedyrceller til undersøgelse af mikrotubuli-proteinkomplekser ved kryo-elektronmikroskopi
This content is Free Access.
Ekstraktion af modificerede mikrotubuli fra pattedyrceller til undersøgelse af mikrotubuli-proteinkomplekser ved kryo-elektronmikroskopi
Capitoli
- 00:05Introduction
- 00:43Cell Culture and Harvesting
- 01:30Microtubule Extraction
- 04:13Cryo-Electron Microscopy (EM) Grid Preparation
- 06:16Results: Analyzing Microtubule-Protein Complexes
- 07:34Conclusion
Her beskriver vi en protokol til ekstraktion af endogent tubulin fra pattedyrceller, som kan mangle eller indeholde specifikke mikrotubulusmodificerende enzymer, for at opnå mikrotubuli beriget til en specifik modifikation. Vi beskriver derefter, hvordan de ekstraherede mikrotubuli kan dekoreres med oprensede mikrotubulusbindende proteiner for at forberede gitter til kryo-elektronmikroskopi.
