Rivista
/
Neuroscienze
/
Celtypespecifieke eiwitzuivering en identificatie van complexe weefsels met behulp van een mutante methionine-tRNA-synthetasemuislijn
JoVE Journal
Neuroscienze
È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo.  Accedi o inizia la tua prova gratuita.
JoVE Journal Neuroscienze
Cell-Type Specific Protein Purification and Identification from Complex Tissues Using a Mutant Methionine tRNA Synthetase Mouse Line
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Celtypespecifieke eiwitzuivering en identificatie van complexe weefsels met behulp van een mutante methionine-tRNA-synthetasemuislijn

DOI:
10.3791/63713-v

•

07:39 min

•

April 13, 2022

•

, , , , , ,
1Max-Planck-Institute for Brain Research,Synaptic Plasticity Department, 2Department of Biochemistry and Molecular Biology,Veterinary School, Complutense University of Madrid

Capitoli

  • 00:05Introduction
  • 00:40Tissue Harvesting, Lysis, and Protein Extraction
  • 03:03Protein Purification
  • 05:28Results: Cell-Type-Specific Protein Labeling with Azidonorleucine
  • 06:35Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Traduzione automatica

Dit protocol beschrijft hoe celtypespecifieke eiwitetikettering kan worden uitgevoerd met azidonorleucine (ANL) met behulp van een muislijn die een mutant L274G-Methionine-tRNA-synthetase (MetRS*) tot expressie brengt en de noodzakelijke stappen voor gelabelde celtypespecifieke eiwitisolatie. We schetsen twee mogelijke ANL-toedieningsroutes bij levende muizen door (1) drinkwater en (2) intraperitoneale injecties.

Tags

Cell-type SpecificProtein PurificationProtein IdentificationMutant Methionine TRNA SynthetaseCell Type Specific ProteinsIn VitroIn VivoImmunofluorescentAlkylationIodoacetamideBuffer ExchangeClick ChemistryAzidonorleucine IncorporationNeutravidin Binding

Article

Embed

AGGIUNGI ALLA PLAYLIST

Usage Statistics

Video correlati

De voorbereiding van Synaptoneurosomes van Mouse Cortex met behulp van een Discontinue Percoll-Sucrose dichtheidsgradiënt

Isoleren van LacZ-expressie Cellen van Mouse Inner Ear weefsels met behulp van flowcytometrie

Isolatie en kwantificering van botulineneurotoxine uit complexe matrices gebruiken BoTest Matrix Testen

Met behulp van fluorescentie-geactiveerde Cell Sorting voor Onderzoek Cell-type-specifieke genexpressie in Rat Brain Tissue

Zuivering van Mouse Brain Schepen

Externe excitatie van neuronen Met behulp van elektrische en magnetische velden in een-en twee-dimensionale culturen

Live beelden van GLUT4 eiwit mensenhandel muis primaire hypothalame neuronen met behulp van deconvolutie microscopie

Snelle en specifieke Immunomagnetic isolatie van de primaire oligodendrocyten muis

Kwantificeren van de heterogene verdeling van een Synaptic proteïne in de hersenen van de muis met immunofluorescentie

Zuivering van Prominin-1+ Stamcellen van postnatale muis Cerebellum

Read Article