Rivista
/
Biochimica
/
En optimalisert enkeltmolekyls pull-down-analyse for kvantifisering av proteinfosforylering
JoVE Journal
Biochimica
È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo.  Accedi o inizia la tua prova gratuita.
JoVE Journal Biochimica
An Optimized Single-Molecule Pull-Down Assay for Quantification of Protein Phosphorylation

En optimalisert enkeltmolekyls pull-down-analyse for kvantifisering av proteinfosforylering

DOI:
10.3791/63665-v

•

07:45 min

•

June 06, 2022

•

, , , , , , ,
1Department of Pathology,University of New Mexico School of Medicine, 2Department of Physics and Astronomy,University of New Mexico, 3Comprehensive Cancer Center,University of New Mexico Health Sciences Center

Capitoli

  • 00:04Introduction
  • 00:53Coverslip Preparation
  • 03:18Functionalization of Array with Biotinylated Antibody
  • 04:09SiMPull of Proteins of Interest from Whole-Cell Lysates
  • 04:40Image Acquisition
  • 05:45Results: Capture of EGFR-GFP from Protein Lysates Using SiMPull
  • 07:19Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Traduzione automatica

Den nåværende protokollen beskriver prøvepreparering og dataanalyse for å kvantifisere proteinfosforylering ved hjelp av en forbedret enkeltmolekyls pull-down (SiMPull) analyse.

Tags

AI-powered Protein Phosphorylation QuantificationSingle-molecule Pull-down AssaySiMPull ProtocolAntibody LabelingAutofluorescence ReductionSingle-molecule AnalysisPhosphorylation Status Of Individual ProteinsAlternative To Western Blotting And Mass Spectrometry

Article

Embed

AGGIUNGI ALLA PLAYLIST

Usage Statistics

Video correlati

En optimalisert protokoll for Elektro Mobility Skift Assay bruker infrarød Fluorescent Dye-merkede oligonukleotider

Oligopeptidkonkurranseanalyse for fosforyleringsstedbestemmelse

Analysen for fosforylering og Microtubule Binding med lokalisering av Tau Protein i tykktarmskreft celler

Single-molekylet manipulering av G-quadruplexes av magnetiske pinsett

Bruker tre farger Single-molekylet bånd å studere sammenhengen av Protein interaksjoner

Kovalente immobilisering av proteiner for ett molekyl Force spektroskopi

Proteom hele kvantifisering av merking homogenitet på ett molekyl nivå

OaAEP1-mediert enzymatisk syntese og immobilisering av polymerisert protein for enkeltmolekylet kraftspektroskopi

En elektrochemiluminescensbasert analyse for MeCP2 proteinvarianter

En In Vitro single-molecule imaging assay for analyse av cap-avhengig oversettelse kinetikk

Read Article