Rivista
/
Biologia
/
Hurtig In Vivo Fiksering og isolering af translationelle komplekser fra eukaryote celler
JoVE Journal
Biologia
Author Produced
This content is Free Access.
JoVE Journal Biologia
Rapid In Vivo Fixation and Isolation of Translational Complexes from Eukaryotic Cells

Hurtig In Vivo Fiksering og isolering af translationelle komplekser fra eukaryote celler

DOI:
10.3791/62639-v

•

14:29 min

•

December 25, 2021

•

, , , , ,
1Division of Genome Sciences and Cancer, The John Curtin School of Medical Research,The Australian National University, 2Centre for Advanced Microscopy,The Australian National University, 3Victor Chang Cardiac Research Institute

Capitoli

  • 00:10Introduction
  • 01:06Yeast Cell Culture and FIxation
  • 03:58Yeast Cell Disruption and Cytosol Collection
  • 05:45Mammalian Cell Culture and Fixation
  • 09:40Mammalian Cell Disruption and Cytosol Collection
  • 11:02Risultati
  • 13:41Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Traduzione automatica

Vi præsenterer en teknik til hurtigt at stabilisere translationelle (proteinbiosyntese) komplekser med formaldehyd crosslinking i levende gær og pattedyr celler. Tilgangen muliggør dissekering af forbigående mellemprodukter og dynamiske RNA:proteininteraktioner. De krydslinkede komplekser kan bruges i flere downstream-applikationer, såsom i dybe sekventeringsbaserede profileringsmetoder, mikroskopi og massespektrometri.

Tags

In Vivo FixationTranslational ComplexesEukaryotic CellsRapid ChillingFormaldehyde FixationGlycine QuenchingCell LysisRibosomal FractionsAffinity PurificationRNA AnalysisMass SpectrometryYeast CultureExponential Growth PhaseFormaldehyde ConcentrationFixation TimeCell PelletingGlycine Buffer

Article

Embed

AGGIUNGI ALLA PLAYLIST

Usage Statistics

Video correlati

Isolation of Labile Multi-protein Complexes by in vivo Controlled Cellular Cross-Linking and Immuno-magnetic Affinity Chromatography

Etablering af Mikrobielle Eukaryote berigelseskulturer fra en kemisk Stratificeret Antarktis Lake og vurdering af kulstofbinding potentiale

Isolering af ribo Bundet Gryende polypeptider<em> In vitro</em> Til at identificere Translationelle Pause steder langs mRNA

Effektiv og hurtig Isolering af Debuterende embryoner fra<em> Arabidopsis thaliana</em> Frø

Identifikation af post-translationelle modifikationer til planteprotein Complexes

En In vivo Crosslinking tilgang til Isoler proteinkomplekser Fra Drosophila Embryoner

Isolering og funktionel analyse af mitokondrier fra dyrkede celler og mus Tissue

Isolering og primær kultur af muse aortaendotelceller

Hele genomet Oprensning af ekstrakromosomalt cirkulært DNA fra eukaryote celler

Filtrering Isolering af nukleinsyrer: en enkel og hurtig DNA Extraction Method

Read Article