Rivista
/
/
Perfil celular de alto rendimiento de compuestos de degradación de proteínas específicas utilizando líneas celulares HiBiT CRISPR
JoVE Journal
Ricerca sul cancro
This content is Free Access.
JoVE Journal Ricerca sul cancro
High-Throughput Cellular Profiling of Targeted Protein Degradation Compounds Using HiBiT CRISPR Cell Lines
DOI:

05:33 min

November 09, 2020

, , ,

Capitoli

  • 00:04Introduction
  • 00:50Endpoint Degradation Studies with HiBiT CRISPR Target Proteins in Lytic Format with Optional Cell Viability Fluorescence Analysis
  • 03:07Results: Degradation Compound Analysis in a HiBiT CRISPR Cell Line
  • 04:51Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Este protocolo describe la detección luminiscente cuantitativa de la cinética de degradación de proteínas en células vivas que se han diseñado utilizando CRISPR / Cas9 para expresar la etiqueta de detección de proteínas endógenas libres de anticuerpos fusionada a una proteína diana. Se incluyen instrucciones detalladas para calcular y obtener parámetros cuantitativos de degradación, tasa, Dmax, DC 50 y Dmax50.

Video correlati

Read Article