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Un'analisi di spettroscopia di fluorescenza fluttuazione delle interazioni proteina-proteina a contatti cellula-cellula
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Capitoli
- 00:04Titolo
- 00:49Sample Preparation: Cell-Cell Mixing Assay
- 02:37Scanning Fluorescence Cross-Correlation Spectroscopy (sFCCS): Acquisition
- 04:07Scanning Fluorescence Cross-Correlation Spectroscopy (sFCCS): Data Analysis
- 06:03Results: Investigation of Protein-Protein Interactions at Cell-Cell Contacts by sFCCS
- 08:09Conclusion
Questo protocollo descrive un approccio di basato su spettroscopia di fluorescenza fluttuazione per indagare le interazioni tra proteine che mediano interazioni cellula-cellula, cioè proteine localizzate nelle giunzioni delle cellule, direttamente nelle cellule viventi. Forniamo le linee guida dettagliate sulla calibrazione dello strumento, acquisizione dati e analisi, comprese le correzioni al fonti possibili manufatto.
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Keywords:
Fluorescence Fluctuation SpectroscopyProtein-protein InteractionsCell-cell ContactsCell AdhesionCell RecognitionLiving CellsMono-membrane VesiclesModel OrganismsCell TransfectionGreen Fluorescent ProteinYellow Fluorescent ProteinRed Fluorescent ProteinEDTACell DetachmentCell ResuspensionLaser Scanning Confocal MicroscopeSpectral CrosstalkMEGFPMEYFPMCherryMCardinal
