This content is Free Access.
Högeffektiva gen störningar av murina och mänskliga hematopoetiska stamceller av CRISPR/Cas9
1Stem Cells & Regenerative Medicine Center,Baylor College of Medicine, 2Center for Cell and Gene Therapy,Baylor College of Medicine, 3Centro di Ricerca Emato-Oncologica (CREO),University of Perugia, 4Department of Molecular & Human Genetics,Baylor College of Medicine, 5Texas Children’s Hospital & Houston Methodist Hospital
Capitoli
- 00:05Titolo
- 01:05sgRNA Fwd Primer Design, DNA Template Synthesis, and ln Vitro Transcription of sgRNA
- 03:38Cas9-sgRNA Complexing and Electroporation
- 05:45Results: Use of Cas9-sgRNA Electroporation Protocol to Study Efficient Knockout of Target Gene
- 07:48Conclusion
Ett protokoll för snabb CRISPR/Cas9-medierad gen störningar i mus och människans primära hematopoetiska celler är beskrivs i denna artikel. Cas9-sgRNA ribonucleoproteins introduceras via elektroporation med sgRNAs genereras genom in vitro- transkription och kommersiella Cas9. Hög redigering effektivitetsvinster uppnås med begränsad tid och finansiella kostnaden.
