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Perturbation de gène hautement efficace des cellules progénitrices hématopoïétiques murins et humains par CRISPR/Cas9
1Stem Cells & Regenerative Medicine Center,Baylor College of Medicine, 2Center for Cell and Gene Therapy,Baylor College of Medicine, 3Centro di Ricerca Emato-Oncologica (CREO),University of Perugia, 4Department of Molecular & Human Genetics,Baylor College of Medicine, 5Texas Children’s Hospital & Houston Methodist Hospital
Capitoli
- 00:05Titolo
- 01:05sgRNA Fwd Primer Design, DNA Template Synthesis, and ln Vitro Transcription of sgRNA
- 03:38Cas9-sgRNA Complexing and Electroporation
- 05:45Results: Use of Cas9-sgRNA Electroporation Protocol to Study Efficient Knockout of Target Gene
- 07:48Conclusion
Un protocole pour rapide CRISPR/Cas9-mediated disruption de génique chez la souris et des cellules hématopoïétiques humaines primaires est décrit dans cet article. Ribonucléoprotéines Cas9-sgRNA sont introduits par électroporation avec sgRNAs des vicitimes in vitro de transcription et commerciale Cas9. Édition de hautes efficacités sont réalisées avec peu de temps et de coût financier.
