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Soutenue par une matrice désorption / ionisation laser temps de vol (MALDI-TOF) spectrométrie de masse Analyse des protéines intactes de plus de 100 kDa
JoVE Journal
Chimica
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JoVE Journal Chimica
Matrix-assisted Laser Desorption/Ionization Time of Flight (MALDI-TOF) Mass Spectrometric Analysis of Intact Proteins Larger than 100 kDa
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Soutenue par une matrice désorption / ionisation laser temps de vol (MALDI-TOF) spectrométrie de masse Analyse des protéines intactes de plus de 100 kDa

DOI:
10.3791/50635-v

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07:49 min

•

September 09, 2013

•

,
1Institute of Structural Biology “J.P. Ebel”, UMR5075, Commissariat à L’Energie Atomique et aux Energies Alternatives (CEA), Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS),Université J. Fourier

Capitoli

  • 00:05Titolo
  • 01:09Recrystallization of Matrices in order to Improve Their Purity (Optional)
  • 02:06Cleaning of MALDI Stainless Steel Target
  • 02:49&#945-CHCA Thin Layer Solution: Preparation and Deposition on the MALDI Target
  • 03:18Preparation of Matrix Solutions: &#945-CHCA, DHB, and CHCA_DHB Mixture
  • 04:04Sample Deposition on the MALDI Target and MALDI Spectra Acquisition
  • 05:17Results: MALDI-TOF Analysis of Proteins Larger than 100 kDa
  • 07:08Conclusion

Summary

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Mesure précise de la masse représente une étape importante lors de l'enquête de protéines. Laser assistée par matrice de désorption / ionisation (MALDI) la spectrométrie de masse (MS) peut être utilisée pour cette détermination et son principal avantage est la tolérance aux sels, des détergents et des contaminants. Ici, nous illustrons une approche accessible pour l'analyse des protéines de plus de 100 kDa par MALDI-MS.

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MALDI-TOFMass SpectrometryIntact ProteinsProtein AnalysisProtein CharacterizationLarge ProteinsProtein Mass DeterminationSample PreparationMatrixCalibrationLaser EnergyAcquisition Time

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