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Protocollo per ricombinante RBD-based Vaccines SARS: Preparazione di proteine, vaccinazione degli animali e la rivelazione di neutralizzazione
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JoVE Journal Immunologia e infezioni
Protocol for Recombinant RBD-based SARS Vaccines: Protein Preparation, Animal Vaccination and Neutralization Detection
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Protocollo per ricombinante RBD-based Vaccines SARS: Preparazione di proteine, vaccinazione degli animali e la rivelazione di neutralizzazione

DOI:
10.3791/2444-v

•

12:09 min

•

May 02, 2011

•

, , ,
1Lindsley F. Kimball Research Institute,New York Blood Center

Capitoli

  • 00:05Titolo
  • 01:01Introduction
  • 01:52Recombinant SARS-CoV RBD Protein Preparation
  • 04:40Mouse Immunization and Sample Collection
  • 05:56Preparation of SARS Pseudovirus in 293T Cells
  • 06:53SARS Pseudovirus Titration and Neutralization Assay
  • 11:10Evaluation of Recombinant RBD-induced Neutralizing Activity
  • 11:36Conclusion

Summary

Traduzione automatica

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Questo protocollo descrive una procedura generale per lo studio ricombinante del recettore dominio di legame (RBD) a base di vaccini a subunità contro la SARS. Esso include metodi per la trasfezione ed espressione di proteine ​​nelle cellule 293T RBD, l'immunizzazione di topi con RBD e la rilevazione di attività di neutralizzazione del mouse utilizzando un siero stabilito pseudovirus SARS saggio di neutralizzazione.

Tags

Recombinant RBD-based SARS VaccinesProtein PreparationAnimal VaccinationNeutralization DetectionSubunit VaccinesMammalian Cell SystemAntigenicityImmunogenicitySARS-CoVRBD ProteinReceptor BindingNeutralizing AntibodiesCulture SupernatantMammalian 293T CellsTransfection MethodCalcium Phosphate Transfection

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