쥐의 심부 저체온 순환 정지 확립
Summary
이 프로토콜은 전신 염증 반응 증후군, 허혈 / 재관류 손상, 산화 스트레스, 신경 염증 등을 조사하는 데 적용될 수있는 쥐에서 심부 저체온 순환 정지의 확립을 제시합니다.
Abstract
심부 저체온 순환 정지 (DHCA)는 복잡한 선천성 심장 질환 및 대동맥 궁 질환의 수술 중에 일상적으로 적용됩니다. 본 연구는 래트에서 DHCA를 확립하는 방법을 제공하는 것을 목표로 한다. 활력 징후에 대한 DHCA 과정의 영향을 평가하기 위해 순환 정지가 없는 정상 온도 심폐 우회(CPB) 쥐 모델을 대조군으로 사용했습니다. 예상대로 DHCA는 체온과 평균 동맥 혈압을 크게 감소시켰습니다. 혈액 가스 분석 결과 DHCA는 젖산 수치를 증가 시켰지만 혈액 pH와 헤모글로빈, 헤마토크릿, Na+, Cl–, K + 및 포도당 농도에는 영향을 미치지 않았습니다. 또한, 상온 CPB 래트와 비교하여 투과 전자 현미경의 결과는 DHCA 래트에서 해마 자가포식소체의 경미한 증가를 보여주었습니다.
Introduction
심부 저체온 순환 정지 (DHCA)는 1953 년부터 심장 수술에 사용되었습니다1. DHCA는 신체의 혈류를 전 세계적으로 차단하기 전에 환자의 심부 온도를 심히 저체온 수준(15-22°C)으로 낮추는 것을포함합니다2. 순환 정지는 상대적으로 무혈 수술장을 제공 할 수 있습니다. 깊은 저체온증은 특히 뇌와 심근에서 신진 대사를 감소 시키며, 이는 허혈에 대한 효과적인 보호 방법입니다3. DHCA는 일반적으로 복잡한 선천성 심장 질환, 대동맥 궁 질환, 심지어 대정맥혈전 4,5가 있는 신장 또는 부신 종양에 대한 수술 중에 적용됩니다. 따라서 DHCA 동물 모델을 확립하는 것은 임상 환경에서 절차의 개선과 합병증 예방에 중요한 참고 자료를 제공합니다.
개6, 토끼7 및 기타 동물로 모델을 설정할 수 있지만 조작성과 저렴한 비용 때문에 쥐를 사용하는 것이 바람직합니다. DHCA 래트 모델은 2006년 Jungwirth et al.8에 의해 처음으로 기술되었다. 순환 정지 기간이 신경 학적 결과에 영향을 미치는 것으로 나타났습니다. 그 이후로 DHCA 쥐 모델이 광범위하게 조사되었습니다. DHCA가 전신 염증 반응 증후군 (SIRS)을 유발할 수 있음이 밝혀졌습니다 9. 후속 연구에서 약리학자들은 SIRS에 의해 유도된 DHCA 관련 신경염증이 레스베라트롤10 및 트립톨라이드11에 의해 감쇠될 수 있음을 발견했습니다. 우리 팀은 또한 DHCA 관련 신경 염증이 감기 유도 성 RNA 결합 단백질12를 억제함으로써 약화 될 수 있음을 발견했습니다. 심혈관계에서 슈퍼옥사이드 디스뮤타제는 DHCA13 동안 허혈/재관류(I/R) 손상에 심장 보호 효과가 있습니다. 이러한 결과는 DHCA 관련 병태생리학적 과정에 대한 이해를 넓히고 DHCA의 결과를 개선하기 위한 새로운 방향을 제시했습니다. 그러나 DHCA 후 내독소혈증, 산화 스트레스 및 자가포식에 관한 결과는 결정적이지 않습니다. DHCA는 심폐 우회술(CPB)14과 동일한 운영 기술을 사용하지만 관리 전략이 다르며 DHCA를 생성하는 단계는 다양한 팀마다 다릅니다 8,9,10,11. 본 연구는 래트에서 DHCA 절차를 확립하는 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
Protocol
Representative Results
Discussion
캐뉼러는 쥐에서 DHCA를 확립하는 가장 기본적인 절차입니다. 캐뉼레이션 전에 동맥을 2 % 리도카인 0.5mL로 담그면 캐뉼러가 더 쉬워집니다. 캐뉼레이션 후, 외부 경정맥을 통해 500 IU / kg 헤파린으로 헤파린 화가 미세 혈전 형성을 피하기 위해 필요합니다17. 우리는이 용량의 헤파린이 활성화 된 응고 시간 (ACT) >480 초의 목표를 달성 할 수 있음을 반복적으로 발견했습니다. 재…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
저자는 실험 중에 비디오 데이터를 수집하는 데 도움을 준 Liang Zhang에게 감사를 표합니다. 이 연구는 중국 국립 자연 과학 재단 (보조금 번호 : 82070479)과 중앙 대학 기초 연구 기금 (보조금 번호 : 3332022128)의 지원을 받았습니다.
Materials
| Heat Exchanger | Xi’an Xijing Medical Appliance Co., Ltd | Animal-M | |
| Membrane Oxygenator | Dongguan Kewei Medical Instrument Co., Ltd. | Micro-M | |
| Monitor | Chengdu Techman Co., Ltd | BL-420s | |
| Roller Pump | Changzhou Prefluid Technology Co.,Ltd | BL100 | |
| SD Rat | HFK Bioscience Co.,Ltd. | / | |
| Sevoflurane | Maruishi Pharmaceutical Co. Ltd | H20150020 | |
| Shaver | Hangzhou Huayuan Pet Products Co.,Ltd. | / | |
| Vaporizer | SPACECABS | / | |
| Ventilator | Shanghai Alcott Biotech Co., Ltd | ALC-V8S | |
| Water Tank | Maquet Critical Care AB | Jostra HCU20-600 |
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