Summary

ショウジョウバエ成人行動研究のための調整可能な高精細画像化システム

Published: June 08, 2021
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Summary

このプロトコルは、単純な成人 ショウジョウバエ 行動観察室を作る方法、および比較的簡単で手頃な方法を通じて観察室で異なる種類のフルーツハエの形態または行動の高精細写真/ビデオを撮る方法を説明する。

Abstract

ショウジョウバエメラノガスター は、生物学的研究において非常に強力なモデルですが、写真やビデオ撮影には悪いモデルです。この論文では、ハエの挙動や形態を観察し、文書化するための、シンプルで効果的な方法について述べている。ハエは半透明の観測室c.aに置かれた。Ø15 x 5mm(中に食品なし)またはØ15 x 12 mm(中に8mmの高さの食品を含む)。紫外線(UV)/クリアフィルターで高い透過率をカバーした後、チャンバーを5-50倍ズームステレオ顕微鏡の下に置き、ミニ発光ダイオード(LED)ビデオライトを顕微鏡の両側に置いて、均一で柔らかく、明るく、ほぼ影のない光を得るためにチャンバを照らしました。その後、3~5倍光学ズームを搭載したコンパクトデジタルカメラを、1080Pの高精細または高解像度のビデオ(フレームレート≥30fps)で記録し、顕微鏡の接眼レンズにブラケットを介して接続し、接眼レンズを通して写真やビデオを撮影しました。ズームステレオ顕微鏡のズームノブを調整することで、ハエを追跡し、必要に応じてパノラマまたは詳細なクローズアップ画像を撮影することは非常に簡単でしたが、カメラは顕微鏡の下ですべてを記録しました。ハエはチャンバー内の任意の位置にとどまることができるので、観察され、すべての方向から記録することができます。撮影した写真やビデオは画質が良いです。この方法は、科学的研究と教育の両方に使用することができます。

Introduction

ショウジョウバエメラノガスター は、生物学的研究における優れたモデルです。しかし、カメラやビデオカメラには小さすぎて、複合顕微鏡では大きすぎるため、写真撮影やビデオ撮影には悪いモデルです。文献に記載されている優れた研究にもかかわらず、ほとんどの研究は、記述されているハエの挙動を説明する明確で鋭い写真ではなく、ぼやけた不明瞭な画像のみを提供してきました。さらに、フライの行動は広範囲に研究されていますが(例えば、求愛と戦い)、これらの論文のほとんどは、読者に彼らの研究を説明するためにイラストを使用しています。

本稿では、シンプルで経済的なアプローチについて述べている。この方法を用いると、 ショウジョウバエ の様々な挙動を観察できるだけでなく、ステレオズーム顕微鏡下で観察できる細部もすべて鮮明に記録できます。もちろん、この方法は、彼らが睡眠または半睡眠状態に入るときのように、ハエの形態を記録するために使用することができ、静止モデルは、ユーザーがフィールド写真の拡張深さを得るために、異なる焦点面を持つ写真や写真のスタックを撮ることができます。これらの方法は、複雑な技術や高価な機器、あるいは優れた手作業のスキルなしで実現することができます。

この記事のビデオ コンポーネントは、ハエのいくつかの典型的な動作のビデオを示しています。これらのビデオを表示する目的は 2 つあります: 1 つは、キャプチャできる内容を視聴者に知らせ、この方法を使用して得られる画質を提示することです。もう一つは 、ショウジョウバエ に興味を持っている新入生に、これまでのところハエの行動を実際に観察する機会を持たなかったが、実際にハエの行動を理解する機会を持っていない(例えば、礼儀、戦いなど)、これらの明確なビデオを通して、イラストやぼやけた画像を通して。

補足ビデオ:フルーツフライの動作:このファイルをダウンロードするには、ここをクリックしてください。

Protocol

1. 観測・文書化システムの構築 注: フライ挙動の観測/文書化システムを構築するために必要な材料を 図 1に示し、完成したシステムを 図 2に示します。システムを構築するためのプロトコルとその使用方法を以下に説明します。 fly behavior observation c</em…

Representative Results

鮮明で鮮明な画像を撮るためのUVフィルターを通して撮影実験室でのUVフィルターと普通のガラスの違いを観察するために簡単な実験を行います。フライ培養バイアルを取り、ストッパーを取り外し、ステレオ解剖顕微鏡の下に置き、UVフィルターとペトリ皿の蓋で(交互に)覆います。この2つのケースで撮影した写真を図5に示します。UVフィルターを通し?…

Discussion

光は写真とビデオ撮影の中心にあり、高品質の画像16を得るための決定的な要因です。ここでは、調整可能な明るさと色温度を持つ2つのLEDビデオライトを照明器として使用し、FBOCを作るために半透明の材料を選択しました。両側のLEDライトパネルは十分な明るさを提供し、半透明の材料は軟化し、散乱した光、最終的に不愉快な露出過多または露出不足の領域を生成するこ…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

李翔東教授と写真家のチェン・ジン氏に、有益な議論や提案を感謝します。この研究は、中国農業大学生命科学実験教育実証センターの探索プロジェクト(20200101)によって支えられた。

Materials

compact camera, Nikon P310 Nikon 3-5x optical zoom, cam record 1080 P HD video
ethylamine foam 60 mm x 60 mm x 15 mm
Food Blue No 1 CAS 3844-45-9
mini LED lights and transformer GODOX LED-P120 have 5000-5600 K color temperature
small container (e.g. bottle cap) about Ø 15 mm x 20 mm
UV / Clear filter high-quality UV/Clear filter with high transmittance, 30-40 mm
zoom stereo microscope 5-50x zoom

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Citazione di questo articolo
Li, T., Weng, Y., Yang, D. An Adjustable High-Definition Imaging System for Behavioral Studies of Drosophila Adults. J. Vis. Exp. (172), e62533, doi:10.3791/62533 (2021).

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