Isolamento e transferência adotiva de sal alta trataram apresentadoras de células dendríticas

Excesso de sal dietético é um importante factor de risco para hipertensão. ^{1 , 2} the American Heart Association recomenda um máximo de 2.300 miligramas (mg) da ingestão de sódio (Na⁺) por dia, no entanto; menos de 10% da população dos EUA observa esta recomendação. ^{3 , 4} modestas reduções na ingestão de at⁺ baixar a pressão sanguínea e reduzem os anual de novos casos de doença coronariana e acidente vascular cerebral nos Estados Unidos em 20%. ⁵ um grande problema com o consumo de sal em excesso é que 50% da população de hipertensos apresenta sensibilidade ao sal, definida como um aumento de 10 mmHg na pressão de sangue após carregamento at⁺ ou uma queda semelhante na pressão arterial após at⁺ restrição e diurese. ⁶ sal-sensibilidade também ocorre em 25% dos indivíduos normotensos e é um preditor independente de eventos cardiovasculares e morte. ^{7 , 8} mecanismos de detecção sal na hipertensão, envolvendo o rim têm sido bem estudados; no entanto, estudos recentes sugerem que células do sistema imunológico podem sentir nd⁺. ^{9 , 10}

Recentes sugerem que as alterações em extra renal at⁺ manipulação podem causar acúmulo de at⁺ no interstício e promover inflamação. ^{11 , 12} nosso laboratório e outros têm mostrado que as células do sistema imune inato e adaptativo contribuem para a exacerbação da hipertensão. ^{9 , 13 , 14 , 15} vários estímulos de hipertensos, incluindo angiotensina II e norepinefrina causa sal macrófagos, monócitos e linfócitos T para infiltrar o rim e a vasculatura e promover retenção Na⁺ , vasoconstrição, pressão arterial elevação e envolvimento visceral. ^{9 , 16 , 17 , 18 , 19 , 20} em estudos anteriores, verificou-se que o DCs acumulam isolevuglandin (IsoLG)-proteína adutos em resposta aos vários estímulos de hipertensos, incluindo angiotensina II e DOCA-sal hipertensão. ¹⁴ IsoLGs são altamente reativos produtos de peroxidação lipídica que rapidamente e covalentemente aduto de lisinas sobre proteínas e sua acumulação é associada com a ativação de DC. ¹⁴ recentemente estabelecemos que elevado at⁺ é um potente estímulo para IsoLG-proteína aduto formação em murino DCs.⁹ entrada de at⁺ em DCs é mediada através de transportadores sensíveis amilorida. At⁺ é então trocado por cálcio (Ca^{2 +}) através da /nome da CA^{2 +} trocador de at⁺. CA^{2 +} ativa a proteína quinase C (PKC), que ativa a oxidase de NADPH, levando ao aumento superóxido (O₂^{· –}) e IsoLG-proteína aduto de formação. ⁹ transferência adotiva de sal-expostos a DCs hipertensão de números primos em resposta a uma dose de sub pressor da angiotensina II. ⁹

Identificação de CD11c + DCs dos tecidos tem sido anteriormente limitada a imunohistoquímica e RT-PCR e isolamento de DCs tem sido limitado a célula Classificar por citometria de fluxo. Embora a classificação de célula do citometria de fluxo é um método poderoso para o isolamento de células do sistema imunológico, é caro, demorado e leva a um baixo rendimento de células viáveis. Portanto, otimizamos um protocolo passo a passo para a digestão do tecido, estimulação in vitro e transferência adotiva de CD11c⁺ DCs para estudar a hipertensão.