骨組織の再生にプレドニゾロンの効果を研究する大人のゼブラフィッシュ傷害モデル

ゼブラフィッシュでは、脊椎動物の発生と疾患研究に強力な動物モデルを表します。これは、彼らは、非常によく繁殖小動物とそのゲノムは完全にシーケンス化された操作¹に従うことという事実のためです。その他の利点には、生体内イメージング アダルト ゼブラフィッシュ²とゼブラフィッシュ幼虫³で高スループット薬物画面を実行する機能など、さまざまな段階での継続的なライブ イメージングを実行するためのオプションが含まれます。さらに、ゼブラフィッシュはさまざまな臓器や骨などの組織に高い再生能力を持っているし、骨疾患を勉強して^4,5を修復する有用なシステムとして提供します。

ステロイド性骨粗鬆症 (GIO) は、グルココルチコイド、たとえば喘息や慢性関節リウマチの自己免疫疾患治療の過程で長期的治療に起因する疾患です。ジオを表しグルココルチコイド治療を受けた患者の約 30% で成長する、主要な健康上の問題⁶。したがって、非常に詳細に骨免疫抑制の影響を調査することが重要です。近年さまざまなジオの病態を扱うゼブラフィッシュ モデルが開発されています。グルココルチコイドを介した骨の損失は、ゼブラフィッシュの幼虫、たとえば、薬剤スクリーン⁷で骨量を増やす中和化合物の同定につながったに誘導されてきました。さらに、ステロイド性骨抑制効果に真似されているゼブラフィッシュ スケールの in vitroとin vivoの^8,9。これらの試金は非常に説得力のあるアプローチ、特にに関して新規免疫抑制と骨の同化作用の薬の同定。しかし、彼らは部分的にしか内骨格を考慮し、再生のコンテキストで実行されていません。したがって、彼らは大人、再生骨の急速なモード中のグルココルチコイドを介した効果の調査を許さない。

ここでは、大人のゼブラフィッシュ骨再生を受けているグルココルチコイドを介した効果を研究する研究者を有効にするプロトコルを提案します。傷害モデル ゼブラフィッシュ尾びれ、スカルの穿頭およびひれ光線骨折 (図 1 a-1 C) の作成の部分の切断が含まれ、インキュベーション (図 1Eを介してグルココルチコイド露出と組み合わせて).最近フィンと頭蓋骨の骨¹⁰を再生成する大人のゼブラフィッシュの 1 つ一般的に規定する副腎皮質ステロイド薬のプレドニゾロンへの露出の結果を記述するこの議定書の部分を使いました。ゼブラフィッシュ、プレドニゾロン内服は減少した骨芽細胞増殖、不完全な骨芽細胞分化や単球/マクロファージ系統¹⁰におけるアポトーシスの急速な誘導につながります。このプロトコルでも述べる骨折が骨のシングルフィンの線のセグメント¹¹に導入できる方法として破壊修復中にグルココルチコイドを介した骨発生効果を勉強して、このアプローチが役に立つかもしれません。紹介した方法は、急速に骨の再生の糖質コルチコイド作用機序を基になる更に対処するのに役立ち、ゼブラフィッシュ組織再生のコンテキストで全身薬物管理の他の設定に用いることもできます。