Агент Trypanosoma cruzi болезни Шагаса производит долговечные бессимптомные инфекции, которые резко развиться в клинически признанных патологии. Следующий протокол исследования описывает на базе семьи эпидемиологическое исследование краткосрочных разгадать т. cruzi инфекция передается половым путем от родителей к потомству.
Американским трипаносомозом передается людям triatomine ошибок через пищу загрязненных продуктов питания, переливание крови или случайно в больницах и исследовательских лабораторий. Кроме того инфекции Trypanosoma cruzi врожденно передается от матери chagasic ее потомство, но мужчины-партнера вклад внутриутробное заражение неизвестным. Гнезда и clumps из amastigotes и trypomastigotes в клетках theca завязи, в goniablasts и в просвете семенных канальцев пришли к выводам, что т. cruzi инфекций передающихся половым путем. Протокол исследования здесь представлены результаты семейного обучения населения, показывая паразита ядерной ДНК в мононуклеарных клетках диплоидных крови и в haploid гамет человека предметов. Таким образом три независимых биологических образцов, собранных отдельно один год подтвердил, что т. cruzi инфекции половым потомкам. Интересно, что конкретные т. cruzi антитела отсутствовал в большинстве семьи потомства, что родила Иммунологическая толерантность к антигену паразита. Иммунологическая толерантность был продемонстрирован в курица огнеупорных т. cruzi после первой недели эмбрионального роста, и вылупившихся из яиц бичевать привитых цыплят смогли произвести специфическое антитело. Кроме того инстилляции человеческой спермы эякуляции внутрибрюшинно или во влагалище наивно мышей, принесли amastigotes т. cruzi в придатка яичка, семенных канальцах, семяпроводов и маточных труб при отсутствии воспалительного реакции в иммунной привилегированных органов размножения. Разведение т. cruzi-инфицированных мужчин и женщин мышей с наивными товарищей привели к приобретению инфекции, которые впоследствии были препровождены потомства. Таким образом программу надежные образования, информации и коммуникации, которая предполагает населения и общественных организаций является необходимым для предотвращения болезни Шагаса.
Простейших паразитов Trypanosoma cruzi , принадлежащий к семейству Trypanosomatidae подвергается trypomastigote и amastigote этапов жизненного цикла в млекопитающих хостов и существует как epimastigotes в насекомое вектора (поцелуйными: Триатомовые клопы) кишки и в стерильных культуры. В последние десятилетия некоторые исследования показали наличие болезни Шагаса в странах на четырех континентах считается triatomine ошибка бесплатно1,2,3,4,5, 6 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 , 13; дисперсия американских трипаносом был первоначально приписывается латиноамериканских иммигрантов в северном полушарии, но возможность, что некоторые из них автохтонные случаев болезни Шагаса, больше не может быть отказано3,4 , 5 , 6 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 , 13 , 14. только узнаваемый эндогенного источник заражения т. cruzi были приписывают chagasic мать передачи паразита потомство в приблизительно 10% беременностей15; мужчины-партнера вклад в утробе инфекции через спермы эякуляции остается непризнанной.
Более века назад, следователи16,17 наблюдается внутриклеточных cruzi т. amastigotes в клетках theca завязи и в зародыше линия клетки яичек острых случаев болезни Шагаса. Гнезда и clumps т. cruzi trypomastigotes и amastigotes в теки клеток яичника, в goniablasts и в просвете семенных канальцев (рис. 1) смертельных случаев острой болезни Шагаса развивать иммунные привилегии в органах воспроизводства в условиях отсутствия воспалительные инфильтраты18,19. В последние десятилетия несколько экспериментальных исследований показали гнезда форм круглые amastigote т. cruzi в семенных канальцах, придатка и семяпроводов также как и матки, труб и яичников клеток теки остро зараженных мышей 1,20,21,22. Кроме того, в ходе исследования семьи к документу передачи простейших митохондриальной ДНК от родителей пациентов Шагаса их потомкам, т. cruzi ядерной ДНК (nDNA) была проверена в человеческих зародышей haploid клетки линии23и этапы жизненного цикла паразитов были замечены в эякуляции chagasic мышей24. Эти выводы согласуются с доклады о иммунной толерантности, достигается потомства т. cruzi –зараженных хостов в отсутствие специфического антитела1,25,26. Кроме того эпидемиологические отчеты, которые предложили распространения эндемических болезни Шагаса в других континентов3,4,5,6,7,8 ,9,10,11,12,13 теперь поддерживаются экспериментальные исследования, показывающие, что болезнь Шагаса может передаваться половым путем1 . Настоящее исследование представляет протокол эпидемиологическое исследование семьи и показывает, что т. cruzi инфекции распространяется на половое сношение.
Здесь, мы обсуждаем на базе семьи исследовательский протокол, который ответил на вопрос ли человеческие болезни Шагаса проистекает из половым внутривидовых т. cruzi инфекции. Ранние исследования не может представить доказательства передачи половым путем инфекций, т. cruzi , вероя?…
The authors have nothing to disclose.
Мы признаем, лабораторное оборудование и критические замечания Изабела Dourado, Карла Араужу, и умный Гомес и технической помощи Бруно Dalago и Рафаэль Андраде. Мы в долгу перед фондом для развития науки (FAPDF), Национальный исследовательский совет, министерства науки и технологии (CNPq/MCT) и агентство для подготовки людских ресурсов, Министерство образования (накидки / ME), Бразилия, для поддержки этих расследований.
BCIP and NBT redox system | Sigma-Aldrich | 681 451 001 | |
Blood DNA Purification columns | Amersham Biosciences | 27-9603-01 | |
d-ATP, [α-32P], 250 µCi. | Perkin Elmer | BLU012H | |
DNA, Solution Salt Fish Sperm | AMRESCO | 064-10G | |
dNTP Set, 100 mM Solutions | GE Healthcare | 28-4065-51 | |
Eco RI | Invitrogen | 15202-021 | |
Goat anti-human IgG- alkaline phosphatase conjugated | Southern Biotech | 2040-04 | |
Goat anti-human IgG- FITC conjugated | Biocompare | MB5198020 | |
Hybond – N+ nylon membrane | GE Healthcare | RPN303B | |
Hybridization oven | Thomas Scientific | 95-0031-02 | |
Micro imaging software cell Sens software | Olympus, Japan | ||
Molecular probes labeling System | Invitrogen | 700-0030 | |
Nsi I | Sigma-Aldrich | R5584 1KU | |
Plasmid Prep Mini Spin Kit | GE Healthcare | 28-9042-70 | |
Plate reader | Bio-Tek GmBH | 2015 | |
Rabbit anti-chicken IgG-alkaline phosphatase conjugated | Sigma-Aldrich | A9171 | |
Rabbit anti-chicken IgG-FITC conjugated | Sigma-Aldrich | F8888 | |
Rabbit anti-mouse IgG- alkaline phosphatase conjugated | Sigma Aldrich | A2418 | |
Rabbit anti-mouse IgG-FITC conjugated | Biorad | MCA5787 | |
Spin Columns for radio labeled DNA purification, Sephadex G-25, fine | Sigma-Aldrich | G25DNA-RO | |
Taq DNA Polymerase Recombinant | Invitrogen | 11615-010 | |
Thermal cycler system | Biorad, USA | 1709703 | |
Vector Systems | Promega | A1380 |