Vahşi balık Nekropsi tabanlı sağlık değerlendirmesi
Summary
Yabani balıklar sağlık sucul ekosistem sağlığı bir göstergesi olarak kullanılabilir. Nekropsi-esaslı balık sağlık değerlendirmeler belgeleri görünür lezyonlar veya anormallikleri, doku mikroskobik değerlendirme, gen ekspresyonu ve diğer daha ayrıntılı toplamak için fırsat yanı sıra durum endeksi hesaplamak için kullanılan veri sağlamak analizleri.
Abstract
Artan besin ve kimyasal kirleticiler, antropojenik etkilerden habitat değişiklikler ve iklim değişikliği, balık nüfus üzerinde önemli etkileri olabilir. Yan etkileri kontrolü, organizma gelen biyolojik moleküler seviyesine kullanan balıklar ve diğer organizmalar üzerindeki toplu etkilerini değerlendirmek için kullanılabilir. Balık sağlığı sucul ekosistem sağlığı bir göstergesi olarak tüm dünyada kullanılmaktadır. Nekropsi-esaslı balık sağlık değerlendirmesi üzerinde görünür anormallikler ve lezyonlar, parazitler, koşul ve organosomatic Endeksi verileri sağlar. Bu site, sezon ve seks, yanı sıra geçici, zaman içindeki belge değişimi için karşılaştırılabilir. Önem dereceleri için çeşitli gözlemler bir balık sağlık dizin daha fazla nicel değerlendirmesi için hesaplamak için atanabilir. Bir Nekropsi tabanlı değerlendirme görsel gözlemler ve doku ve hücre altı biyolojik sublethal efektler için duyarlı değildir durum faktörleri dayandığını dezavantajıdır. Ayrıca, nedenleri veya risk gözlenen anormallikler ile ilişkili faktörleri belirlemek nadiren mümkündür. Örneğin, yükseltilmiş lezyon veya palet, dudak veya vücut yüzeyi tarih “tümör” bir neoplazma olabilir. Ancak, bu da bir parazit, kronik inflamasyon veya Yanıt tahriş edici olarak normal hücre hiperplazisi yanıt olabilir. Diğer taraftan, neoplazmlar, bazı parazitler, diğer bulaşıcı ve birçok doku değişiklikleri görünür değildir ve çok hafife. Ancak, Nekropsi dayalı değerlendirme, kan (plazma), dokular için histopatoloji (mikroskobik patoloji) sırasında genomik ve diğer moleküler analizleri ve otoliths yaşlanma için toplanabilir. Jeo uzamsal analizleri, habitat değerlendirmeler, birlikte bu aşağı akım analizleri, su kalitesi ve kirletici analizler tüm kapsamlı ekosistem değerlendirme içinde önemli olabilir.
Introduction
İnsan faaliyetleri su ortamlarında çok sayıda olumsuz etkileri vardır. Balık insan nüfusu içinde yeniden oluşturur ve genellikle içme suyu kaynağı olarak kullanan çeşitli su organları yaşamaktadır ve bu nedenle su ortamında sağlığı önemli göstergeler vardır. Yaşayan ve belirli bir yaşam alanı içinde yeniden vahşi balık patojenler, parazitler, kötü su kalitesi ve kimyasal kirleticiler de dahil olmak üzere çeşitli stresler için hayatları boyunca maruz kalır. Binlerce kimyasal Atıksu Sanayi ve insan, Suburban’ı / kentsel yağmursuyu ve tarım ikinci tur bizim su yolları girin. Bu karmaşık karışımlar kimyasal katkı maddesi, sinerjik olabilir veya üzerindeki antagonistik etkileri organizmalar1,2,3maruz. Buna ek olarak, diğer çevresel stres gibi yüksek besin, yüksek sıcaklık, düşük çözünmüş oksijen veya dalgalanan pH kimyasal kirleticiler4,5etkileri şiddetlendirmek. Çevresel stres de doğrudan enfeksiyöz ajanlar6artırıldığında, fırsatçı patojenler7 virülans artan veya baskılayarak bağışıklık yanıtı ve hastalık bulaşıcı hastalık sonuçları etkileyebilir direnç ana bilgisayar8,9,10. Bu nedenlerden dolayı orada balık ve tanımlamak için diğer Sucul organizmalar kullanan11,12,13,14, izleme biyolojik ya da olumsuz etkileri ilgi artıyor Nüfus ve ekosistemler risk altında.
Yan etkileri izleme kuruluşu, organizma hücre altı veya moleküler, nüfus etkisi ve çeşitli stresler maruz göstergesidir sublethal etkileri tanımlamak için çeşitli düzeylerde biyolojik kullanır. Göstergeler organizma düzeyinde görünür anomalileri ve koşulları içerir. Uzunluk ve ağırlık temel koşul endeksleri su kuyusu-varlık veya fitness balık örneğin alınma olasılığını değerlendirmek için hesaplanır. Fulton’ın durumu faktörler (K) en yaygın olduğunu = (ağırlık/uzunluk3) 15. Bir başka göstergesi görünür anomalileri varlığıdır. Çeşitli yöntemler kullanılmıştır bireysel çalışmalar ve izleme programları, belge, değerlendirmek ve görünür anomalileri değerlendirmek. Yalnızca dış anormallikler, Yani, oran olan hastalık, fin hasar, tümörler ve iskelet anomalileri, bireylerin temel değerlendirme toplum sağlık16değerlendirir biyotik bütünlüğü (IBI) dizin ölçülerini biridir. Benzer bir değerlendirme DELTs (deformiteleri, erozyonlar, lezyonlar, tümör) olarak adlandırdığı da balık topluluklar17sistem durumunu değerlendirmek için kullanılmıştır. Ancak, bu yöntemler sadece dış görsel anormallikler ve değil iç lezyonlar veya erken sublethal göstergeleri değerlendirmek.
Nekropsi temelli değerlendirmeler iç ve dış gözlem içerir ve ek koşul endeksleri ölçüm için izin verir. Hepatosomatic dizin (karaciğer ağırlığı/toplam vücut ağırlığı) ayrıca fitness bir göstergesi olarak kullanılan veya kendisi için sağlıklı balık daha yüksek dizin değeri gösterir15 enerji hakkını saklı tutar. Ancak, çalışmalar bir dizi hipertrofisi veya karaciğer boyutunda bir artış çeşitli kirleticiler karaciğer18,19,20tarafından metabolize maruz nedeniyle oluştuğunu göstermiştir. Bu durumda daha yüksek dizin belirli kimyasal sınıfları maruz göstergesi olurdu. Gonadosomatic dizin (erbezi ağırlık/toplam vücut ağırlığı) doğru üreme sağlığı21yönetmen başka bir koşul dizinidir. Nekropsi-esaslı değerlendirme sırasında yapılan gözlemleri bireysel lezyon tipleri yaygınlığı veya normal bireylerin yüzde karşılaştırmak için kullanılabilir. Ancak, onlar da bir daha nicel sağlık değerlendirmesi22,23‘ te kullanılabilir.
Burada açıklanan standart Nekropsi tabanlı değerlendirmesi cevaplanması gereken soru (lar), uzmanlık ve diğer kaynaklara bağlı olarak birden çok yolu fena halde görünür değerlendirme çoğaltmak için kullanılabilir. Bizim rutin yaklaşımdır biyometrik verilerini (uzunluk, ağırlık, karaciğer ağırlığı, erbezi ağırlık) toplamak, plazma/serum analizleri, belge iç ve dış görünür anomalileri, mikroskopik analizler için organ parçalarını korumak ve otoliths için toplamak için kan için Yaş analizleri. Nekropsi-temelli değerlendirme artı yaş Analizi ve çeşitli organlarının histopatoloji sağlar hesaplama ve karşılaştırma çeşitli durum endeksi, görünür anomalileri gibi mikroskobik doku değişiklikleri, yaygınlığı için cinsiyet, yaş, site ve örnekleme döneminden. Ek doku koleksiyonları elektron mikroskobu, Bakteriyolojinin, Viroloji, Parazitoloji ve kimyasal konsantrasyonu da dahil olmak üzere birçok diğer analizler için yapılabilir. Bu yöntemler de daha fazla derinlemesine analizleri balık öldürür24 nedeninin tanılamak için kullanılan bir parçası olabilir veya esir Scotlan balıklar25. İki ek değerlendirmeler, gen ekspresyonu ve fonksiyonel bağışıklık analizleri için doku topluluğu için yöntemleri gösterilmiştir.
Protocol
Representative Results
Discussion
Balık sağlığı Nekropsi tabanlı değerlendirilmesi araştırmacı hem dış hem de iç yapıları normal görünüm bir anlayış olduğu herhangi bir balık türleri kullanılabilir. Standart bir yaklaşım kullanarak siteleri ve türlerin yanı sıra bir nüfusa mevsimlik ve temporal değişimler arasında karşılaştırmalar için izin verir. Bulgular noktası ve çökelmesi kirletici kaynakları ile ilişkili efektleri tanımlamak ve yönetim eylemler bilgilendirmek için kullanılabilir. Yönetimi eylemleri başlatılan bir kez iyileştirmeler izlemek için de kullanılabilir. Metodoloji çeşitli şekillerde görsel dış anormallikleri belgelerine ek olarak değiştirilebilir. Sadece görsel gözlem, dayalı değerlendirmeler,-ebilmek var olmak öldürücü olmayan, nispeten ucuz ve verileri hızlı bir şekilde çok sayıda bireyler için oluşturulabilir. Sonuç olarak, onlar değişikliği izlemek için keşif veya ilk değerlendirmeler için yararlı olabilir zaman içinde veya diğer göstergeler ile birlikte. Uzunluk ve ağırlık balık görsel gözlemler sırasında ölçülür Eğer koşul faktörü de hesaplanabilir. Her ne kadar değerlendirmeler yalnızca görsel gözlem dayalı bilgileri neden veya ilişkili risk faktörleri, uzun vadeli eğilimleri bazı cilt anormallikler45 vermeyin ve biyometrik parametreler46 bazı alanlarda iyileştirme belirtilmiştir var su kalite geliştirmeleri ile ilişkili.
Nekropsi-tabanlı değerlendirmesi iç organlar da incelenir ve diğer koşul ve faktörler gibi hepatosomatic Dizin gonadosomatic dizin hesaplanan daha fazla bilgi sağlar. Goede ve Barton22 dahil kan parametreleri, biyometrik faktörler, anormallikler ve dizin değerlerini belirli bozuklukları yüzdesi bir alan Nekropsi yöntemi geliştirdi. Bir arıtma yönteminin önem derecesi hesaplama olabilir bir sağlık değerlendirmesi Dizin istatistiksel olarak23karşılaştırıldığında için izin bazı değişkenler dahil. Bu sağlık değerlendirmesi Dizin plazma ve histopatolojik analizleri dahil olmak üzere ABD Jeolojik diğer biyolojik göstergeler ile bölgesel sitesi karşılaştırmalar23,47,48 ve birlikte kullanılmıştır Anket en Biomonitoring çevresel durumu ve eğilimleri geçen madde pozlama büyük nehirler ülke çapında49,50,51olası etkilerini değerlendirme programı. Bir balık hastalık Dizin dışarıdan görünür hastalıkları üzerinde temel ve parazitler, görünür karaciğer neoplazmlar ve diğer histopathologically karaciğer lezyonlar geliştirilmiş ve Kuzey Denizi, Baltık Denizi ve İzlanda kapalı yoğun kullanılan algılandı. Bu dizin bir ekosistem sağlık göstergesi52olarak önemli bir araç bulundu.
Balık üzerinde Nekropsi tabanlı değerlendirme yürütülmesinde bazı önemli faktörler vardır. İlk olarak, değerlendirmeler üzerinde balık ölümünden hemen sonra yapılmalıdır. Organ renk ve tutarlılık değişiklikler oldukça hızla ölümünden sonra ortaya çıkabilir. Ayrıca, bazı parazitler ana yakında ölümünden sonra gidebilirsiniz. İkinci olarak, faiz türler için normal olan ne bilmek önemlidir. Örneğin, bazı balık normal yağ var ve çoğu türler için soluk bir karaciğer anormal olacağını da sonuç olarak, karaciğer, soluk. Doğal olarak mevsimsel değişiklikler tanımak önemlidir. Biraz balık renk değişiklikleri veya üreme tubercles yumurtlama mevsiminde geliştirmek.
Balık sağlık değerlendirmesi için bir yöntem olarak Nekropsi tabanlı değerlendirme sınırlamaları belirli lezyonlar “Neden” 1) sürekli olarak tanımlayıp 2) çıplak gözle görünür olmayabilir etkileri tanımlamak için yetersizlik dahil. Bu sakıncaları histopatoloji, moleküler ve kültürel kimlik patojenler ve parazitler ve Gen ifadesinin eklenmesi ile aşılabilir. Örneğin, bir “tümör” veya yükseltilmiş lezyon (şişme) gerçek neoplazi olabilir veya bir parazit, iltihap, ödem olabilir veya hiperplazi (normal hücrelerin sayısındaki artış), kimyasal pozlama, enfeksiyöz ajanlar veya diğer tahriş edici tarafından neden oldu. Temsilcisi sonuçlarında görüldüğü gibi kesin tümör veya neoplazi tanı mikroskobik patoloji (Yani, iyi huylu veya kötü huylu) önem ve lezyon türünü tanımlamak için gerekir. Beyaz enayi dış “tümör” görsel gözlem tarafından değerlendirilmesi özellikle referans sitesi de yaygınlık fazla hesaplamış. Çoğu kabarik lezyonlar değil neoplazmlar ama oldukça hyperplastic lezyonlar içindeydi. Şu anda bu hyperplastic lezyonlar önceden neoplastik olup bilinmemektedir. Diğer taraftan, karaciğerde yükseltilmiş nodüller gözlenmesi önemli ölçüde karaciğer neoplazmlar yaygınlığı hafife almışım. Bu nedenle, doku mikroskobik patoloji için topluluğu yeterince geçerliliği için potansiyel gidermek gerekli oldu.
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu eser US Geological Survey’nın ekosistemler (Chesapeake Körfezi ortamları ve balıkçılık) ve çevre sağlığı (kirletici biyoloji) programları ve West Virginia Bölümü Tabii Kaynaklar tarafından finanse edildi. Ticari adlar yalnızca tanımlama amacıyla kullanılır ve ABD hükümeti tarafından onaylandığı anlamına gelmez.
Materials
| Folding tables | Any | ||
| Folding chairs | Any | ||
| Dissecting boards | Any | ||
| Measuring board (in mm increments) | Any | ||
| Battery powered scale (in gm) for fish weight | Any | ||
| Battery powered scale (in mg) for organ weights | Any | ||
| Dissecting forceps | Any | ||
| Bone cutters | Any | ||
| Scalpel and blades | Any | ||
| Disposable gloves | Any | ||
| Buckets | Any | ||
| Leak-proof Nalgene bottles (250 ml) | ThermoFischer Scientific | 02-924-5C | |
| Vacutainer tubes with sodium heparin | ThermoFischer Scientific | 02-689-6 | For blood collection |
| Disposable 3 ml syringes with 23 gauge needle | ThermoFischer Scientific | 14-826-11 | |
| 1 – 2ml cryovials | Any | Used for plasma and RNAlater samples | |
| Invitrogen RNAlater Stabilization solution | ThermoFischer Scientific | AM7021 | |
| Z-Fix Formaldehyde Zinc fixative | Anatech LTD | SKU-174 | |
| Tricaine-S (MS-222) | Syndel USA | fish anesthetic | |
| Coin Envelopes | Any | for otoliths | |
| Pencils and pens | Any | ||
| 70% alcohol | Any | ||
| Data sheets | Any |
Riferimenti
- Celander, M. C. Cocktail effects on biomarker responses in fish. Aquatic Toxicology. (105 Supplement), 72-77 (2011).
- Liney, K. E., et al. Health effects in fish of long-term exposure to effluents from wastewater treatment works. Environmental Health Perspectives. 114, 81-89 (2006).
- Silva, E., Rajapakse, N., Kortenkamp, A. Something from "nothing" – eight weak estrogenic chemicals combined at concentrations below NOECs produce significant mixture effects. Environmental Science & Technology. 36, 1751-1756 (2002).
- Noyes, P. D., et al. The toxicology of climate change: environmental contaminants ina warming world. Environment International. 35, 971-986 (2009).
- Witeska, M., Jezierska, B. The effect of environmental factors on metal toxicity to fish. Fresenius Environmental Bulletin. 12, 824-829 (2003).
- Wedekind, C., Gessner, M. O., Vazquez, F., Maerki, M., Steiner, D. Elevated resource availability sufficient to turn opportunistic into virulent fish pathogens. Ecology. 91, 1251-1256 (2010).
- Penttinen, R., Kinnula, H., Lipponen, A., Bamford, J. K. H., Sundberg, L. R. High nutrient concentration can induce virulence factor expression and cause higher virulence in an environmentally transmitted pathogen. Microbial Ecology. 72, 955-964 (2016).
- Bols, N. C., Brubacher, J. L., Ganassin, R. C., Lee, L. E. J. Ecotoxicology and innate immunity in fish. Developmental & Comparative Immunology. 25, 853-873 (2001).
- Dunier, M., Siwicki, A. K. Effect of pesticides and other organic pollutants in the aquatic environment on immunity of fish: a review. Fish and Shellfish Immunology. 3, 423-438 (1993).
- Milla, S., Depiereux, S., Kestemont, P. The effects of estrogenic and androgenic endocrine disruptors on the immune system of fish: a review. Ecotoxicology. 20, 305-319 (2011).
- Connon, R. E., Geist, J., Werner, I. Effect-based tools for monitoring and predicting the ecotoxicological effects of chemicals in the aquatic environment. Sensors. 12, 12741-12771 (2012).
- Eckman, D. R., et al. Biological effects-based tools for monitoring impacted surface waters in the Great Lakes: A multiagency program in support of the Great Lakes restoration initiative. Environmental Practice. 15, 409-426 (2013).
- Khan, M. Z., Law, F. C. P. Adverse effects of pesticides and related chemicals on enzyme and hormone systems of fish, amphibians and reptiles: A review. Proceedings of the Pakistan Academy of Sciences. 42, 315-323 (2005).
- Wernersson, A. S., et al. The European technical report on aquatic effect-based monitoring tools under the water framework directive. Environmental Sciences Europe. 27, (2015).
- Bolger, T., Connolly, P. L. The selection of suitable indices for the measurement and analysis of fish condition. Journal of Fish Biology. 34, 171-182 (1989).
- Karr, J. R. Biological integrity: A long-neglected aspect of water resource management. Ecological Applications. 1, 66-84 (1991).
- Sanders, R. E., Miltner, R. J., Yoder, C. O., Rankin, E. T., Simon, I. n. T. P. The use of external deformities, erosions, lesions, and tumors (DELT anomalies) in fish assemblages for characterizing aquatic resources: a case study of seven Ohio stream. Assessing the sustainability and biological integrity of water resources using fish communities. , 225-246 (1999).
- Bervoets, L., et al. Bioaccumulation of micropollutants and biomarker responses in caged carp (Cyprinus carpio). Ecotoxicology and Environmental Safety. 72, 720-728 (2009).
- Schulte-Hermann, R. Adaptive liver growth induced by xenobiotic compounds: its nature and mechanism. Archives of Toxicology. Supplement. 2, 113-124 (1979).
- Slooff, W., van Kreijl, C. F., Baars, A. J. Relative liver weights and xenobiotic-metabolizing enzymes of fish from polluted surface waters in the Netherlands. Aquatic Toxicology. 4, 1-14 (1983).
- Brewer, S. K., Rabeni, C. F., Papoulias, D. M. Comparing histology and gonadosomatic index for determining spawning condition of small-bodied riverine fishes. Ecology of Freshwater Fish. 17, 54-58 (2003).
- Goede, R. W., Barton, B. A. Organismic indices and an autopsy-based assessment as health and condition of fish. American Fisheries Society Symposium. 8, 93-108 (1990).
- Adams, S. M., Brown, A. M., Goede, R. W. A quantitative health assessment index for rapid evaluation of fish condition in the field. Transactions of the American Fisheries Society. 122, 63-73 (1993).
- Kane, A. S., et al. Field sampling and necropsy examination of fish. Virginia journal of science. 50, 345-363 (1999).
- Yanong, R. P. E. Necropsy techniques for fish. Seminars in Avian and Exotic Pet Medicine. 12, 89-105 (2003).
- . American Fisheries Society (AFS) Use of Fishes in Research Committee, American Institute of Fishery Research Biologists and the Society of Ichthyologists and Herpetologists. Guidelines for the Use of Fishes in Research. , (2004).
- Bonar, S. A., Hubert, W. A., Willis, D. W. . Standard methods for sampling North American freshwater fishes. , (2009).
- Zale, A. V., Parrish, D. L., Sutton, T. M. . Fisheries Techniques, third edition. , 1009 (2013).
- Neiffer, D. L., Stamper, M. A. Fish sedation, anesthesia, analgesia, and euthanasia: considerations, methods, and types of drugs. Institute for Laboratory Animal Research. , 343-360 (2009).
- Clark, T. D., et al. The efficacy of field techniques for obtaining and storing blood samples from fishes. Journal of Fish Biology. 795, 1322-1333 (2011).
- Adewoyin, A. S., Nwogoh, B. Peripheral blood film – a review. Annals of Ibadan Postgraduate Medicine. 12, 71-79 (2014).
- Smith, S. B., et al. Illustrated field guide for assessing external and internal anomalies in fish. Information and Technology Report USGS/BRD/ITR. 2002-007, 46 (2002).
- Kane, A. S. . Descriptive guide to observing fish lesions. , (2005).
- Rafferty, S. D., Grazio, J. . Field manual for assessing internal and external anomalies in brown bullhead (Ameiurus nebulosus). , (2018).
- . European Association of Fish Pathologists. Necropsy manual. , (2018).
- Buckmeier, D. L., Irwin, E. R., Betsill, R. K., Prentice, J. A. Validity of otoliths and pectoral spines for estimating ages of channel catfish. North American Journal of Fisheries Management. 22, 934-942 (2002).
- Maceina, M. J., Sammons, S. M. An evaluation of different structures to age freshwater fish from a northeastern US river. Fisheries Management and Ecology. 13, 237-242 (2006).
- Secor, D. H., Dean, J. M., Laban, E. H., Stevenson, D. K., Campana, S. E. Otolith removal and preparation for microstructural examination. Otolith Microstructure Examination and Analysis. 117, 19-57 (1992).
- Gauthier, D. T., Cartwrwight, D. D., Densmore, C. L., Blazer, V. S., Ottinger, C. A. Measurement of in vitro leucocyte mitogenesis in fish: ELISA based detection of the thymidine analogue 5′-bromo-2′-deoxyuridine. Fish and Shellfish Immunology. 14, 279-288 (2003).
- Zelikoff, J. T., et al. Biomarkers of immunotoxicity in fish:from the lab to the ocean. Toxicology Letters. , 325-331 (2000).
- Hahn, C. M., Iwanowicz, L. R., Corman, R. S., Mazik, P. M., Blazer, V. S. Transcriptome discovery in non-model wild fish species for the development of quantitiative transcript abundance assays. Comparative Biochemistry and Physiology – Part D: Genomics and Proteomics. 20, 27-40 (2016).
- Harms, C. A., et al. Quantitative polymerase chain reaction for transforming growth factor-B applied to a field study of fish health in Chesapeake Bay tributaries. Environmental Health Perspectives. 108, 1-6 (2000).
- Braden, J. B., et al. Economic benefits of remediating the Sheboygan River, Wisconsin Area of Concern. Journal of Great Lakes Research. 34, 649-660 (2008).
- Blazer, V. S., et al. Tumours in white suckers from Lake Michigan tributaries: pathology and prevalence. Journal of Fish Diseases. 40, 377-393 (2017).
- Vethaak, A. D., Jol, J. G., Pieters, J. P. F. Long-term trends in the prevalence of cancer and other major diseases among flatfish in the southeastern North Sea as indicators of changing ecosystem health. Environmental Science & Technology. 43, 2151-2158 (2009).
- Teubner, D., Paulus, M., Veith, M., Klein, R. Biometric parameters of the bream (Abramis brama) as indicators for long-term changes in fish health and environmental quality – data from the German ESB. Environmental Science and Pollution Research. 22, 1620-1627 (2015).
- Schleiger, S. L. Fish health assessment index study of four reservoirs in north-central Georgia. North American Journal of Fisheries Management. 24, 1173-1180 (2004).
- Sutton, R. J., Caldwell, C. A., Blazer, V. S. Health assessment of a tailwater trout fishery associated with a reduced winter flow. North American Journal of Fisheries Management. 20, 267-275 (2000).
- Blazer, V. S., Schmitt, C. J., Dethloff, G. M. The necropsy-based fish health assessment. Biomonitoring of environmental status and trends (BEST) program: selected methods for monitoring chemical contaminants and their effects in aquatic ecosystems. , 18-21 (2000).
- Schmitt, C. J. Biomonitoring of environmental status and trends (BEST) program: Environmental contaminants and their effects on fish in the Mississippi River basin. Biological Science Report USGS/BRD/BSR. 2002-0004, 241 (2002).
- Hinck, J. E., et al. Chemical contaminants, health indicators, and reproductive biomarker responses in fish from rivers in the Southeastern United States. Science of the Total Environment. 390, 538-557 (2008).
- Lang, T., et al. Diseases of dab (Limanda limanda): Analysis and assessment of data on externally visible diseases, macroscopic liver neoplasms and liver histopathology in the North Sea, Baltic Sea and off Iceland. Marine Environmental Research. 124, 61-69 (2017).
