Burun membran Transepithelial potansiyel farkının (NPD) standart ölçüm
Summary
Burada, burun potansiyel farkı (NPD) ölçmek için standart bir protokol mevcut. Kistik Fibrozis Transmembran gürültülerinden regülatörü (CFTR) ve epitel sodyum kanal (ENaC) işlevi değerlendirilir voltaj değişikliği tarafından arasında nazal epitel iyon kanal etkinlik, değiştirmek çözümler superfusion sonra sağlayan bir Sonuç ölçü.
Abstract
Biz burun potansiyel farkı (NPD) standart bir ölçü tanımlar. Bu teknikte, kistik fibrozis transmembran gürültülerinden regülatörü (CFTR) ve epitel sodyum kanal (ENaC) işlevi tarafından voltaj değişikliği arasında nazal epitel iyon kanal değiştirmek çözümler superfusion sonra izlenir etkinlik. Bu bir kateter ile temas aşağı burun konka kullanan burun deliği, subkutan bölme ve hava yolu epitel arasında potansiyel farkı ölçümü olarak etkinleştirilir.
Test ölçüm istikrarlı temel gerilim ve art arda gelen net voltaj değişiklikleri sonra 100 µM amiloride, Na+ emiliminin zil’ın çözümde bir inhibitörü perfüzyon sağlar; amiloride için sürücü klorür salgı ve siklik adenozin monofosfattır (kampı) uyarmak için amiloride ile klorür-Alerjik bir çözümde 10 µM isoproterenol içeren bir klorür ücretsiz çözüm-bağımlı klorür gürültülerinden ilgili CFTR için.
Bu teknik hava yolu yüzey sıvı solunum epitel, ENaC ve CFTR hidrasyon kuran iki anahtar bileşenlerini elektrofizyolojik özellikleri gösteren bir avantaja sahiptir. Bu nedenle, bu faz 2 ve CFTR ve ENaC etkinlik kistik fibrozis (CF) akciğer hastalığının tedavisi için hedef ajanlar denemelerin kavram kanıtı için yararlı araştırma aracı. Bu da genetik testi ve ter testi belirsiz olduğunda CFTR disfonksiyon kurmak için bir anahtar takip işlemdir. Ter klorür, nispeten daha zaman alıcı ve pahalı testidir. Ayrıca etkili testini gerçekleştirmek için operatör eğitimi ve uzmanlık gerektirir. Inter – ve Intra-net – subject değişkenlik genç ya da işbirliği yapmayan bireylerde özellikle bu teknikte bildirilmiştir. Bu endişe ile yardımcı olmak için son zamanlarda doğrulanmış bir algoritma yorumu geliştirilmiştir.
Introduction
Bu yöntem genel amacı trans-epitel iyon taşıma vivo içinde1araştırmak için amaçlayan burun potansiyel farkı (NPD) ölçmek etmektir. Bu teknik ölçüm sodyum (Na+) ve klorür (Cl–) ulaşım sağlar. NPD bir araştırma aracı olarak geç 1980’lerden beri kullanılan ve 2017 ise kistik fibrozis Vakfı (CFF) fikir birliği tanılama yönergeleri ve kistik fibrozis Vakfı (CFF) fikir birliği deyim2 tarafından 1998 yılında tanılama bir prosedür olarak kabul edildi 3. Nitekim, CF nedeni, biyolojik CFTR disfonksiyon bir artan Cl– salgılanması Na+ emme apikal membran ve bir kusur kanıtladığı. Genetik belirsiz ara ter testi sonuçları3olan hastalarda kesin olmayan olduğunda bu fonksiyonel test bir ek tanı aracı avantajı sağlar. Her ne kadar bu bilgiler aynı zamanda bağırsak geçerli ölçüm biyopsiler (ICM) tarafından elde, ICM olduğunu, ancak, genel olarak kullanılabilir birkaç merkezleri sadece ve standardizasyon ihtiyacı daha fazla. NPD yaklaşık 60 Genel merkezlerinde daha mevcuttur ve ayrıca, hastalığın ana alanıdır solunum epitel hedefler.
CFTR faaliyeti üzerindeki sağlar bilgi göz önüne alındığında, modülatör tedaviler4,5,6,7tarafındande fonksiyonel CFTR proteini restorasyonu değerlendirmek amaçlayan kanıtı-of-concept çalışmalarda kullanılır, 8. Nitekim çalışmalar CFTR mRNA/genetik düzenleme, CFTR güçlendiricisini ve düzeltici terapiler, verileri vurgulamak Cl– önemli değişiklikler ve Na+ taşıma tedavi6,9 ile ve NPD olabilir onaylar bir Klinik çalışmalarda yanıt veren bitiş noktası. Biz hassas klinik bitiş noktaları ince bir değişiklik bulmak içinde hastanın klinik durum kısa vadede mümkün bulunmadığından, bu preklinik biyomarker son derece bilgilendirici olabilir. CFTR modülatör terapiler alanında hızla genişletiyor ve hızlı bir şekilde büyük faz 3 denemeler10‘ a gitmeden önce aktif bileşikler deşifre edebiliyoruz testleri vivo içinde acilen ihtiyacımız var.
Teknik fizyolojik mantığı burun hava yolu epitel ve subkutan yuvası arasındaki potansiyel farkı ölçümü temel alır. İyon kanal faaliyetleri istikrarlı maksimal temel potansiyel farkı (PD), Na+ emme ENaC engelleme ile ilgili sonra değişiklikleri ölçme ve Cl– salgılanması farklı apikal Cl– taşıyıcılar ile sürüş tarafından incelenmiştir CFTR dahil olmak üzere. CFTR disfonksiyon tarafından en az bir değişiklik Cl– salgılanması bir kamp bağımlı yol aracılığıyla uyarılması üzerine potansiyel farkı gösterilir ve artan bir ENaC tarafından daha olumsuz bir temel potansiyel farkı algıladı gibi Na+ emme aracılı ve amiloride için geliştirilmiş bir tepki. Normal PD karşı CF için mekanik olarak Şekil 1‘ de özetlenmiştir.
Şekil 1: iyon kanal faaliyet Özet şekil. Solunum epitel gösteren etkinliğini dengeli ENaC ve CFTR normal bireylerde aktivite ve sonuçlanan CFTR aktivite kaybı (B)(a)iyon aracılı ENaC sodyum taşıma arttı ve CFTR bağımlı klorür azaltılmış taşıma. ENaC: epitel sodyum kanalı, Na+: sodyum, CFTR: Kistik Fibrozis Transmembran regülatörü, CL–: klorür, mV: millivolts, PD: potansiyel farkı, min: dakika/s Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Ancak, bu test bir ölçüde değişkenlik hem tekrarlanan ölçüler içinde aynı hasta ve aynı genotip olan hastalarda, gösterir. Bu değişikliklerin yorumlanması modülatör tedavi sonrasında kolaylaştırmak için son derece önemlidir. Ayrıca, biz hala doğrulanmış eşikleri CF ve sağlıklı konular arasında ayrımcılık eksikliği. Bu kısmen klinik özellikleri kullanılabilirliği ve istihdam teknikleri arasındaki farklar nedeniyle olabilir. Bu nedenle, test standardizasyon amaçlayan önemli bir uluslararası çaba devam ediyor. Bize CFF-TDN (kistik fibrozis Vakfı-Therapeutics kalkınma ağı) ve ECFS-CTN (Avrupa kistik fibrozis toplum klinik denemeler ağ) kullanımı için NPD standart işletim prosedürü (SOP) multicenter ve araştırma çalışmalarda oluşturdu. Bu son ortak çalışma CTN ve TDN içinde kombine bir uluslararası CTN ve TDN uzmanlık bir araya getiren SOP, sonuçlandı (2014)11. Bu kağıt NPD CF tanı için veya araştırmacı tarafından başlatılan kanıtı-of-concept denemeler için istihdam için protokol ve test teknikleri sunar. Teknik uygulama her merkezi onun kurumsal insan Araştırma Etik Kurulu onayı için uygulamaya sorumludur.
Şekil 2: tüm şematik önerilen NPD Kur. Önerilen kurulum, sıralı perfüzyon pompalar ve 4-dur-horoz serisi kurulumu dahil olmak üzere görüntülenir unutmayın. Belirli bağlantıları ve bileşenlerine örnek olarak SOP içinde gösterilir. (Solomon, G.M. göğüs, 201013iznine sahip değiştirilme diyagramı) Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 2. mademki NPD subkutan uzayda, elektrotlar ve yüksek empedanslı bağlı her ikisi de yerleştirilen epitel yüzeyi ve referans Köprüsü üzerinde konumlandırılmış keşfetmek Köprüsü arasında ölçülür, genel deneysel akışı özetlenen Voltmetre.
Bu 2 farklı sistemleri tarafından sağlanmaktadır: 2 kabul edilebilir referans elektrot kurulumları vardır: (i) Ag/AgCl elektrotlar dengeli ve kremalı bir elektrokardiyogram (EKG) Köprüsü tarafından hafif aşınma subkutan uzayına bağlı veya (ii) doymuş kalomel Half-Cells ve bir agar 22 – 24 gauge iğne subkutan tanıttı dolu. Nazal mukoza kişiye bir çift lümen kateteri tarafından etkinleştirilir. Bir lümen agar veya ECG krem ile dolu ve ölçüm elektrot bağlı, diğer nazal mukoza üzerine perfüzyon farklı çözümleri sağlar.
Keşfetmek hortumunun ucu aşağı burun konka (Şekil 3) altında solunum mukoza üzerine yerleştirilir.
Şekil 3: boru solunum mukoza üzerine keşfetmek yerleştirme. (A)dış görünümü gösteren yerleşim. (B) Rhinoscopic görünümü yerleşim gösteren. (C) kateter yerleştirme için anatomik yerini gösteren diyagram. PD: potansiyel farkı
PD yanıt olarak bazı ilaçlar çalışma superfusion çözümleri ile kateterin lümen ikinci uygulanır. Hazırlama ve veri analizi için ilk hazırlık üzerinden iletişim kuralındaki aşağıda ayrıntılı olarak NPD ölçümleri yürütülmesi ile ilgili birkaç temel adım vardır.
Sonra çözümleri ve elektrotlar hazırlanması, elektrotlar ve kateterler yeterli kalite test test için temel kuralları sağlar. Bazal ölçümleri yapılan ölçüm için en iyi yer seçimi sağlayan aşağı konka, en olumsuz ölçüm genellikle bununla. Sonra sıralı perfusions Na+ (ENaC) ve Cl– (CFTR bağlıdır) iyon akı nazal epitel arasında voltaj değişikliği yoluyla belirler.
Protocol
Representative Results
Discussion
Vivo, NPD art arda bir boyuna olarak gerçekleştirilebilir benzersiz bir ölçüm sağlar ve tekrarlanan ölçümleri ile bir group-wise ve bireysel olarak14tarihindebenzer boyuna sonuçlar gözlenmektedir gösterir, 15. NPD CF sigara-CF ayırt için mükemmel ayrımcılık geçerliliği yoktur güçlü kanıtlar var. 25 çalışmalar sürekli olarak Cl– istatistiksel olarak anlamlı bir fark ve Na+ gürültülerinden CF hastalarda ve sağlıklı kontrol10arasında gösterdi. Birkaç daha önce Gelişmiş endeksi bu kapasite göstermek iken, biz son standardizasyon yöntemi7,8verilen yeni güncelleştirmelerin gerekli olduğunu tahmin.
Değişiklikler ve sorun giderme
Bu test doğru ölçümler sağlamak için birkaç önemli adımlar gerektirir. Bu sistem için önerilen standartları çalıştığından emin olmak için elektrotlar ve kateterler kapalı devre uzaklığı içerir. Hasta hala kalır ve bu eserler ve kateter dislodgement en aza indirir gibi konuşmasını kaçınmak gerekir. Bu test kooperatif olmayan hastalarda zor yapar ve bu teknik sadece bir çalışmada çocuklarda 6 yaş7yıllık aşağıda bildirilmiştir.
Nazal epitel öncesi muayene yok kabuklar veya mukus ölçümleri etkileyebilir epitel üzerinde olduğundan emin olmak gereklidir.
En önemlisi, bu kateter yerleştirme konumunu tartışma konusu gerekir dikkat çekti. Burada sunulan SOP ölçüm (BT) alt konka altında kullanır. Altında belgili tanımlık o kateter yerleştirme standart ve kadınlarında denemeler yapılmıştır ve bu nedenle, bu önerilen yöntemdir. Ölçüm BT altında nazal mukoza ile sıkı temas halinde iken çözümleri ile temas halinde olma sürdürmek zor olabilir yan delikli kateter ile gerçekleştirilir. Teknik olarak daha kolaydır burun yerde PD ölçü diğer grupları. Önemlisi, Vermeulen (2011) 2 Yöntem karşılaştırılabilir16olduğunu gösterdi.
Çözümleri ısınma tartışılır Avrupa ve ABD merkezleri17,18arasında kalır. Bu gözlenen toplam klorür yanıt artırır yerine 22 ° C 37 ° C’de çözümleri kullanarak yaklaşık % 25 ve isoproterenol bağımlı klorür yanıt tarafından yaklaşık % 95’i18tarafından savunduğu. Ancak, ısınma değişkenliği, daha büyük standart sapması tarafından toplam klorür yanıt17değerlendirildi artar. Bu nedenle, çözümler ısınma değişkenlik ek bir faktör olduğu gibi çözümler bir çalışma olarak gerekli olmadıkça sıcak değil için tavsiye edilir.
Daha önce her iki elektrot teknikleri ile karşılaştırıldığında ve AgCl ve kalomel elektrot sistemleri benzer şekilde normal konular13‘ te bazal ve uyarılmış akıntılardaki işletilen bulundu.
Teknik sınırlamaları
Bu önemli konu içinde değişkenlik tabi testidir. Puanlama değişkenlik özellikle belirsiz tracings olan hastalarda yaygındır ve bu için tanılama uygulaması19‘ muhasebesi. Değişkenlik faktörler akut üst solunum yolu enfeksiyonu, geniş burun polip, önceki sinüs cerrahisi ve CF ile ilgili inflamasyon, özgüllük ve duyarlılık20,10azaltmak. Ayrıca, her ne kadar uzman okuyucular nicel Puanlama ve interpretability CF ve sigara-CF tracings, mükemmel anlaşma önemli bir değişkenliği ile zıt göstermek tracings yorumlanması okuyucular arasında farklı olabilir güven izleme19.
Önemli eşikleri karşı içsel değişkenlik
En önemlisi, ölçüm fizyolojik değişkenliğine farklı çalışmalar10, klorür toplam taşıma değişiklikler önemli ölçüde değişkenlik gösterdi CFTR gen terapisi denemeler gibi gösterildiği gibi önemli, ve amiloride21,22Aralık. Kesitsel değerlendirme öneriyor Cl– -7 -5 eşiğin isoproterenol yanıt artı sıfır mV olan CF ve sigara-CF konular10arasında kesme.
Biz yine de Aşama II çalışmalarda etkili bir CFTR Düzeltme değiştirme tedaviler hastalığı ile temsil eden bu parametrenin değişikliğin büyüklüğünü hakkında açık bilgi eksikliği. Bireysel tepki değerlendirmek için tekrarlanan testleri bir müdahale yanıtı izleme önemli değişiklikler iç değişkenlik ayırt etmek gerekebilir. En önemlisi, uyuşturucu değiştirme hastalığı olan gelecekteki uzun vadeli çalışmalar CFTR işlevi düzelme CF klinik sonuçlar veya vekil istenmeyen sonuçlara (FEV1düzelme) iyileşme ile ilişkisi göstermek gerekir hastalık. Nitekim, son bir aşama II Ivacaftor çalışma gösterdi klorür salgı23küçük bir iyileşme rağmen klinik yararı işaretlenmiş.
Bu tür çalışmalar trans-epitel Cl–gürültülerinden düzelme cut-off değeri klinik yararı için bir vekil parametre olabilir Eğer kurmak için yardımcı olacaktır. Bu terapiler değiştirme CFTR gelişimi rehberlik için önemli bir parametre.
Önemi ile ilgili mevcut Yöntemler: ter testi ve bağırsak geçerli ölçümler (ICM)
” Şüpheli ” kistik fibrozis olan hastalarda, Cl– konsantrasyonu 30 ve 60 mM, NPD kompozit Skorlar hastalar ” CF-muhtemel ” teşhis etmek için son derece hassas bir araç ve ” CF-olası ”10 arasında bir ara ter tarafından olarak değerlendirildi . CFTR son derece olarak ifade edilir çünkü bir ex vivo ölçüm net CL– Cereyanlar karşısında rektal epitel sağlayan geçerli bağırsak ölçüm (ICM), kalan CFTR işlevi belirlenmesi ile yüksek bir hassasiyet de sağlar. Bu epitel.
Değişiklik CFTR işlev CFTR modülatörler tarafından bu farklı CFTR biyomarker değişiklikler arasındaki ilişki göz önüne alındığında bu mevcut belirsiz. Her ne kadar son iş dayalı Ivacaftor belirlenen NPD ve ter testi vardır ilişkili4, solunum yolu bir ölçüm solunum sonucu daha iyi bir tahmin daha, örneğin ise bu henüz oluşturulmadı, ter testi24 , 25 veya ICM değişimi. Ayrıca, değiştirici uyuşturucu Ayrıca onların organ belirli efficacies farklı olabilir. NPD açısından, bazal PD ve amiloride yanıt değişimler 0 Cl– ve isoproterenol yanıt değişiklikler Cl– taşıma hızlı iken Na+ taşıma, hızlı unutmamak gerekir. Bu hastalığın iyileşme için daha önemli olduğu kurulacak olduğunu.
Bu tekniğin yönelik uygulama
Bu tekniğin kullanımı dışında CF alan bekleniyor. Bu teknik benzersiz olarak Na+ ve Cl– iyon kanal, göstermek için uygundur bu yana bu astım26, kronik bronşit27, Sigara-CF bronşiektazi28 de dahil olmak üzere airways hastalıkları disfonksiyonu göstermek için uygulanabilir ve tekrarlayan pankreatit29. Buna ek olarak, bu teknik değişiklikler alt solunum yolları (Los Angeles) kronik bronşit30kronik obstrüktif akciğer hastalığı (KOAH) hastalarda daha düşük airways odaklı CFTR disfonksiyon göstermek için kullanılmıştır.
NPD hassas vivo içinde biyomarker CFTR işlevinin her iki tanı için kullanılabilir ve ayrıca, aktivite translasyonel araştırma CFTR ve ENaC doğru amaçlayan kanıtı-of-concept çalışmaları için kanal sağlar. Bu trans-epitel işlevi boyuna değerlendirmesini sağlar ve CF ile her hasta için en verimli düzeltici terzi için kişiselleştirilmiş ilaç için bir strateji olarak söz sahibidir.
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu araştırma CFTR fonksiyonu için Standardizasyon Komitesi (klinik denemeler ağ, Avrupa kistik fibrozis toplum) ve ulusal kaynakları merkezi çalışma grubu (Therapeutics kalkınma ağı, kistik fibrozis çalışma grubu tarafından desteklenmiştir Vakfı). Ek destek CF Vakfı tarafından sağlanan (GMS için Clancy FY09) ve NIH (SMR ve GMS için DK072482).
Materials
| KD Scientific infusion pump (or equivalent – such as programmable infusion pumps provided by the institution/hospital) | Fisher Scientific | ||
| Powerlab 4/30 | AD Instruments | ||
| BMA-200 AC/DC portable bioamplifier | AD Instruments | ||
| IS0-Z isolation headstage for BMA-200 | AD Instruments | ||
| Windows compatible PC – Minimum requirements of Windows XP or higher | Various | ||
| AD Instruments software: GLP Client V6 (Windows) or higher | AD Instruments | ||
| ECG electrode (ground for study subject) | Hospital standard | ||
| 2 mini calomel reference electrodes | Fisher Scientific | 13-620-79 | |
| Potassium Chloride KCl, Granular – USP, formula weight 76, qty: 500 gm | Spectrum | ||
| Sterile container (such as specimen collection container , or similar) to be used for KCl calomel bath, with holes cut in lid to hold electrodes in place. (If not provided by electrode manufacturer.) | Hospital standard | ||
| 2 electrodes: Ag/AgCl 8 mm TP electrode | BIOPAC Systems | UNSHLD-EL258 | |
| 2 Ag/AgCl electrodes, B0194, plug 4 mm | SLE Instruments | ||
| Signacreme® Conductive Electrode Cream | Fisher Scientific | Parker Labs ref # 17-05 | |
| Skin abrasion device | PROMED Feeling | Ref 374901 | |
| Hi Di 541 M, Diamond tipped dental burrs | Ash Instruments | ||
| Becton Dickinson PE 50 tubing | Fisher Scientific | 427411 | |
| Becton Dickinson PE 90 tubing | Fisher Scientific | 427421 | |
| Silastic tubing, 0.062” ID, 0.095” OD | Fisher Scientific | 508-007 | |
| Micropore Surgical Tape Paper (25 mm x 9.1 m) | 3M | 1530-1 | |
| Marquat double lumen catheter Length: 80 cm; Outer diameter: 2.5 mm; Internal diameter of the channels: 0.8 mm; Distance of the side-holes to the tip: 2 mm. EU label Agreement for NPD: I0202US | Marquat | I0202US | |
| 1" X 10 yards silk tape | 3M Durapore | 1538-1 | |
| IV extension tubing (30", 50/box) | International Limited | IMN30 | |
| Three-way stopcock (50/box) | Medex | MX5311L | |
| Sterile syringe filters (ANOTOP 25 sterile 50pk; 0.22-micron or smaller filters; or equivalent) | Fisher Scientific | 09-926-7 | |
| Becton Dickinson Intramedic Luer stub adapter (20G, for connection to PE90 if using nasal catheter produced at study site) | Fisher Scientific | 427564 | |
| Becton Dickinson 23G, 0.75” Vacutainer (“butterfly”) needles (0.6 x 19 mm; 50U/box) (for connection to PE50) if using nasal catheter produced at study site) | Fisher Scientific | 367283 | |
| Becton Dickinson Syringe 60 ml without needle Luer-Lok tip (40/Box) | Fisher Scientific | 309653 | |
| Becton Dickinson Syringe 10 ml without needle Luer-Lok tip (100/Box | Fisher Scientific | 309604 | |
| Single use sterile wipes (per institutional availability) | Hospital standard | ||
| 70% EtOH (1 pint), Aaper Alcohol and Chemical Co. catalog number NC9274019 (or equivalent) | Fisher Scientific | ||
| Corning single use sterile bottle-top filters, 0.22 μm pore size (0.15 – 1.0 litre volumes acceptable) | Fisher Scientific | 430624 | |
| Buffer Cert Ph 10.00 (1L Sn04332) – for pH meter calibration | Fisher Scientific | ||
| Buffer Cert Ph 4.00 (1L Sn04327) – for pH meter calibration | Fisher Scientific | ||
| Buffer Cert Ph 7.00 (500 ml Sn04328) – for pH meter calibration | Fisher Scientific | ||
| Disposable underpads (Blue Pads; 23"X36" 150/Box; or equivalent per hospital standard) | SureCare | ||
| 23G, 0.75” Vacutainer “butterfly” needles (0.6×19 mm; 50U/box) | Becton Dickinson | 367283 | |
| Difco Laboratories Agar (Noble 100g 0142-15-2; or equivalent) | Fisher Scientific | ||
| Welch Allyn Rhinoscope 71000-C (or equivalent) | Fisher Scientific | ||
| Welch Allyn Convertible Handle Battery 72300 (or equivalent) OR Otoscope with battery | Fisher Scientific | ||
| Head and chin rest (or equivalent; optional) | Richmond Products, Inc | 629R | |
| Static Dissipative Anti-Fatigue Matting (or equivalent) | Fisher Scientific | No. 791 | |
| REAGENTS FOR SOLUTIONS MIXED ON SITE | |||
| Sodium Chloride, Granular – USP NaCl | Spectrum | Formula Weight: 58; Size: 500 gm | |
| Calcium Chloride CaCl2•2H2O – USP | Spectrum | Formula Weight: 147; Size: 500 gm | |
| Magnesium Chloride Hexahydrate Crystal, MgCl2•6H2O – USP | Spectrum | Formula Weight: 203; Size: 500 gm | |
| Potassium Phosphate Dibasic, Anhydrous, Granular, K2HPO4 – USP | Spectrum | Formula Weight: 174; Size: 500 gm | |
| Potassium Phosphate Monobasic Crystals – NF (KH2PO4) | Spectrum | Formula Weight: 136; Size: 500 gm | |
| Sodium Gluconate- USP (monosodium salt) | Spectrum | Formula Weight: 218; Size: 500 gm | |
| Calcium Gluconate – USP (Anhydrous Powder) | Spectrum | Formula Weight: 430; Size: 500 gm | |
| Potassium Gluconate- USP (Anhydrous) | Spectrum | Formula Weight: 234; Size: 500 gm | |
| Magnesium Sulfate Heptahydrate – USP MgSO4•7H2O | Spectrum | Formula Weight: 246; Size: 500 gm | |
| Amiloride HCl – USP | Spectrum | Formula Weight: 302; Size: 5gm | |
| Adenosine 5’-Triphosphate (ATP) (Disodium salt) | Spectrum | Formula Weight: 551; Size: 5gm | |
| Magnesium Chloride, Hexahydrate, Crystal – USP MgCl2•6H2O | Spectrum | Formula Weight: 203; Size: 500 gm | |
| Double-distilled water (ddH2O) | Hospital Pharmacy | Formula Weight: NA; Size: 1 L | |
| Isoproterenol HCL Injection – USP 1 mg/5 ml ampule | Hospital Pharmacy | Formula Weight: 248; Size: single use | |
| Ringers Injection, USP or Ringers Irrigation | Hospital Pharmacy | Formula Weight: NA; Size: 5 L |
Riferimenti
- Rosenstein, B. What is a Cystic Fibrosis Diagnosis?. Clinics in Chest Medicine. 19, 423-441 (1998).
- Rosenstein, B., Cutting, G. R. The Diagnosis of Cystic Fibrosis: A Consensus Statement: Cystic Fibrosis Foundation Consensus Panel. The Journal of Pediatrics. 132, 589-595 (1998).
- Farrell, P. M., et al. Diagnosis of Cystic Fibrosis: Consensus Guidelines from the Cystic Fibrosis Foundation. The Journal of Pediatrics. 181, S4-S15 (2017).
- Mesbahi, M., et al. Changes of CFTR functional measurements and clinical improvements in cystic fibrosis patients with non-p.Gly551Asp gating mutations treated with ivacaftor. Journal of Cystic Fibrosis. 16, 45-48 (2017).
- Accurso, F., et al. Sweat chloride as a biomarker of CFTR activity: proof of concept and ivacaftor clinical trial data. Journal of Cystic Fibrosis. 13 (2), 139-147 (2014).
- Accurso, F., et al. Effect of VX-770 in Persons with Cystic Fibrosis and the G551D-CFTR Mutation. New England Journal of Medicine. 363, 1991-2003 (2010).
- Sermet, I., et al. Measurement of nasal potential difference in young children with an equivocal sweat test following newborn screening for cystic fibrosis. Thorax. 65 (6), 539-544 (2010).
- Wilschanski, M., et al. Mutations in the Cystic Fibrosis Transmembrane Regulator Gene and In vivo Transepithelial Potentials. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 174 (7), 787794 (2006).
- Sermet-Gaudelus, I., et al. Clinical Phenotype and Genotype of Children with Borderline Sweat Test and Abnormal Nasal Epithelial Chloride Transport. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 182 (7), 929-936 (2010).
- De Boeck, K., et al. CFTR biomarkers: time for promotion to surrogate endpoint?. European Respiratory Journal. 14, 38 (2013).
- US CFF-TDN (Cystic Fibrosis Foundation-Therapeutics Development Network) and the ECFS-CTN (European Cystic Fibrosis Society- Clinical Trials Network). Standard Operating Procedure 528.01. Standardized Measurement of Nasal Membrane Transepithelial Potential Difference (NPD). , (2014).
- Knowles, M., et al. Increased bioelectric potential difference across respiratory epithelia in CF. New England Journal of Medicine. 305 (25), 1489-1493 (1981).
- Solomon, G. M., et al. An international Randomised Multicentre Comparison of NPD Techniques. Chest. 138, 919-928 (2010).
- Sermet, I., et al. Chloride Transport in Nasal Ciliated Cells of Cystic Fibrosis Heterozygotes. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 171, 1026-1031 (2005).
- Naehrlich, L., et al. Nasal potential difference measurements in diagnosis of cystic fibrosis: an international survey. Journal of Cystic Fibrosis. 13 (1), 24-28 (2014).
- Vermeulen, F., et al. Nasal potential measurements on the nasal floor and under the inferior turbinate: Does it matter?. Pediatric Pulmonology. 46 (2), 145-152 (2011).
- Bronsveld, I., et al. Influence of perfusate temperature on nasal potential difference. European Respiratory Journal. 42, 389-393 (2013).
- Boyle, M., et al. A multi-center study on the effect of solution temperature on nasal potential difference measurements. Chest. 124 (2), 482-489 (2003).
- Solomon, G. M., et al. A Multiple Reader Scoring System for Nasal Potential Difference Parameters. Journal of Cystic Fibrosis. 16 (5), 573-578 (2017).
- Beekman, J. M., et al. CFTR functional measurements in human models for diagnosis, prognosis and personalized therapy: Report on the pre-conference meeting to the 11th ECFS Basic Science Conference, Malta, 26-29 March 2014. Journal of Cystic Fibrosis. 13, 363-372 (2014).
- Accurso, F., et al. Effect of VX-770 in persons with cystic fibrosis and the G551D-CFTR mutation. New England Journal of Medicine. 363, 1991-2003 (2010).
- Wilschanski, M., et al. Chronic ataluren (PTC124) treatment of nonsense mutation cystic fibrosis. European Respiratory Journal. 38, 59-69 (2011).
- Accurso, F., et al. Sweat Chloride as a biomarker of CFTR activity: proof of concept and Ivacaftor clinical trial data. Journal of Cystic Fibrosis. 13 (2), 139-147 (2014).
- Rowe, S., et al. Clinical Mechanism of the Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator Potentiator Ivacaftor in G551D-mediated Cystic Fibrosis. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 190 (2), 175-184 (2014).
- Boyle, M., et al. A CFTR corrector lumacaftor and a CFTR potentiator (ivacaftor) for treatment of patients with cystic fibrosis who have a phe508del CFTR mutation: a phase 2 randomised controlled trial. The Lancet Respiratory Medicine. 2 (7), 527-538 (2014).
- Schulz, A., Tummler, B. Non-allergic asthma as a CFTR-related disorder. Journal of Cystic Fibrosis. 15 (5), 641-644 (2016).
- Sloane, P. A., et al. A pharmacologic approach to acquired cystic fibrosis transmembrane conductance regulator dysfunction in smoking related lung disease. PLoS One. 7 (6), e39809 (2012).
- Bienvenu, T., et al. Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator Channel Dysfunction in Non-Cystic Fibrosis Bronchiectasis. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 181 (10), 1078-1083 (2010).
- Werlin, S., et al. Genetic and electrophysiological characteristics of recurrent acute pancreatitis. Journal of Pediatric Gastroenterology and Nutrition. 60 (5), 675-679 (2015).
- Dransfield, M. T., et al. Acquired Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator Dysfunction in the Lower Airways in COPD. Chest. 144 (2), 498-506 (2013).
