Summary

Yetişkin erkek fare yordamda transüretral korumak

Published: November 02, 2017
doi:

Summary

Transüretral korumak zor bir işlemdir ve de literatürde açıklanmayan. Bu yazının amacı transüretral mesane ve/veya yetişkin erkek farelerde prostat içine aktif maddeler ile sıvı İntravezikal teslim etmek için bir kateter yerleştirilmesi için bir tekniği tarif etmektir.

Abstract

Transüretral korumak aktif maddeler (Örneğin, ilaçlar, kimyasallar, bakteri ve virüsler) ile farklı çözümler yerel olarak mesane mesane patolojiler hayvan modelleri teşvik veya değerlendirmek için sunmak için kullanılan İntravezikal tedavi etkinliğinin. En kemirgen modellerin alt idrar yolu (LUT) patolojiler dişi farelerde İntravezikal korumak kadın üretra yoluyla maddelerin kolaylığı için indüklenir. Ancak, anatomik farklılıklar arasında kadın ve erkek LUT nedeniyle erkek fare transüretral korumak çok zor bir prosedür olarak kabul ve daha önce tarif. Bu makale, biz nasıl bir erkek fare üretra içine sonraki ekleme için polietilen (PE) boru hazırlamak ayrıntılı bir açıklama sağlar. Buna ek olarak, biz aşı istediğiniz siteye bağlı olarak kullanılmak üzere PE boru ideal tür tartışıyorlar. Ayrıca, nokta nokta bir hayvan üretra yaralanmayı önlemek ve istenen konuma çözüm teslim sağlamak başarılı bir transüretral korumak için hazırlamak nasıl açıklar. Yordamı sünnet derisi ve üretral verin açılış duyurmak için glans geri çeker tarafından başlatılır. Ardından, glans penis ve PE boru stabilize etmek için kör olmayan kırma forseps tarafından kavradı. PE boru ilk hayvan vücudu paralel üretral verin eklenir, sonra açısı üretra doğal eğimi takip manevra kateter eğerek ayarlanır. Bu teknik mesane patolojiler indüklenen fare modelleri için kullanılabilir/veya erkek farelerde İntravezikal tedavilerin etkinliğini değerlendirmek.

Introduction

Transüretral korumak yaklaşım önceki çalışmalarda yöntemlerinden biri mesane patolojiler1,2,3,4 kemirgen modeller oluşturmak için kullanılmıştır ve değerlendirmek için kullanılan farelerde yerel olarak teslim edilen tedavilerin etkinliğini. Hayvan modelleri tamamen insan patolojiler özetlemek olamaz, hayvan çalışmalarında temel mekanizmaları tanımlaması interstisyel sistit/mesane ağrı sendromu, Nörojenik gibi insan LUT bozuklukları daha iyi anlaşılmasını sağlar sistit, otoimmün sistit ve Prostatik inflamasyon5.

Bir yetişkin erkek fare üzerinde gerçekleştirilen transüretral korumak yordam daha teknik bir yetişkin dişi fare6İntravezikal korumak daha zordur. Erkek üretra ile birlikte onun küçük çaplı doğal olarak kavisli anatomisi teknik olarak zor bir kateter transüretral ekleme yerine getirmek yapmak. Bu nedenle, ayrıntılı talimatlar transüretral indüksiyon için fare idrar yolu enfeksiyonu6 ve LUT iltihap7,8,9,10,11 , 12 , 13 , 14 , 15 mesane eklenen kateter yolu ile daha önce sadece dişi fareler için özetlenen. Bu el yazması, video klipler, görüntüler ve resimler de dahil olmak üzere erkek farelerde maddelerin transüretral korumak için teknik, adım adım açıklamasını sunmayı amaçlamaktadır. Yetişkin bir erkek fare yordamlarda değişkenle gerçekleştirilebilir transüretral korumak daha önce kadın fare7 ‘ açıklanan ve electromyogram kayıtları gibi ek teknikleri ile birleştirilmiş benzer inoculates visceromotor yanıt (VMR)16.

Protocol

hayvanlarla yöntemi ve süresi anestezi, ameliyat sonrası bakım, hem de dahil olmak üzere tüm yordamları bir veteriner ile tartışıldı ve kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi (IACUC), bağlı kurum. Bu makale, 8-15-hafta-yaşlı C57BL/6 erkek fare ile tüm yordamları gerçekleştirilen ve protokol IACUC Colorado Üniversitesi tarafından onaylanmış hayvan bakımı kuralları izler. 1. boru hazırlık Not: inoculum aşılamak için iğne ekli pol…

Representative Results

Transüretral korumak PE 50 boru ile mavi boya, boya içine idrar kesesi (şekil 4A) ve renklendirme SV ve AP (şekil 4B), PE 10 boru üzerinden korumak sırasıyla sonuçlandı. Gerçekleştirilen transüretral korumak inoculum böbrekler için anlık bir reflü neden ya da değil olup olmadığını değerlendirmek için böbrek ve üreter mavi boya ve floresan boya (şekil 4A-B) 1…

Discussion

Bu el yazması yetişkin erkek fare transüretral korumak bir yöntem ayrıntılı olarak anlatılmaktadır. Fark birincil tohumlama alanı farklı çaplarda PE boru kullanarak ulaşılabilir. PE-50 başarıyla PE-10 AP ve SV (şekil 3A-B) erişmek için kullanılan daha büyük çaplı iken idrar kesesi Lümen ulaşmak için önerilir. PE boru ve hedef organ aşılama için boyutu seçimi ek olarak, aşılanan inoculum, hacmi gibi diğer faktörler de çözüm dağıtımın…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Yazarlar herhangi bir teşekkür var mı.

Materials

BD INTRAMEDIC Polyethylene Tubing/ PE 10 BD Medical 63019-004
BD INTRAMEDIC Polyethylene Tubing/ PE 50 BD Medical 63019-048
BD Insyte-N Autoguard/ Angiocath BD Medical 311411
Ethanol (EtOH) Fisher Scientific BP2818500
BD Needle Only 22 Gauge (G) 1 inch Becton Dickson 205155
BD Needle Only 27 Gauge (G) 1/2 inch Becton Dickson 305129
Luer stub, 22 G X 0.5 in / Blunt Needle Instech LS22
Luer stub, 27 G X 0.5 in / Blunt Needle Instech LS27
6" Long x 2" Wide x 1" Thick, Aluminum Oxide Sharpening Stone / Oil Stone Norton 40204034
Surgical Lubricant Sterile Bacteriostatic Folilpac Surgilube 281020543
Isoflurane Fluriso 13985-528-60
SomnoSuite Low-Flow Anesthesia System Kent Scientific SS-01
Dissecting Forceps, Curved vwr 82027-392
BD 1 ml Syringe BD Medical 309626
India Ink Solution., 0.2% in PBS buffer Alfa Aesar J61007
8~12 weeks old male C57B/6 Mice Jackson Lab #000664

Riferimenti

  1. Lee, S., Yang, G., Bushman, W. Prostatic inflammation induces urinary frequency in adult mice. PLoS One. 10 (2), e0116827 (2015).
  2. Wong, L., Hutson, P. R., Bushman, W. Prostatic inflammation induces fibrosis in a mouse model of chronic bacterial infection. PLoS One. 9 (6), e100770 (2014).
  3. Elkahwaji, J. E., Zhong, W., Hopkins, W. J., Bushman, W. Chronic bacterial infection and inflammation incite reactive hyperplasia in a mouse model of chronic prostatitis. Prostate. 67 (1), 14-21 (2007).
  4. Boehm, B. J., Colopy, S. A., Jerde, T. J., Loftus, C. J., Bushman, W. Acute bacterial inflammation of the mouse prostate. Prostate. 72 (3), 307-317 (2012).
  5. Bjorling, D. E., Wang, Z. Y., Bushman, W. Models of inflammation of the lower urinary tract. Neurourol Urodyn. 30 (5), 673-682 (2011).
  6. Thai, K. H., Thathireddy, A., Hsieh, M. H. Transurethral induction of mouse urinary tract infection. J Vis Exp. (42), (2010).
  7. Bjorling, D. E., Wang, Z. Y., Boldon, K., Bushman, W. Bacterial cystitis is accompanied by increased peripheral thermal sensitivity in mice. J Urol. 179 (2), 759-763 (2008).
  8. Hopkins, W. J., Gendron-Fitzpatrick, A., Balish, E., Uehling, D. T. Time course and host responses to Escherichia coli urinary tract infection in genetically distinct mouse strains. Infect Immun. 66 (6), 2798-2802 (1998).
  9. Dinis, P., Charrua, A., Avelino, A., Cruz, F. Intravesical resiniferatoxin decreases spinal c-fos expression and increases bladder volume to reflex micturition in rats with chronic inflamed urinary bladders. BJU Int. 94 (1), 153-157 (2004).
  10. Cayan, S., et al. Botulinum toxin type A may improve bladder function in a rat chemical cystitis model. Urol Res. 30 (6), 399-404 (2003).
  11. Jerde, T. J., Bjorling, D. E., Steinberg, H., Warner, T., Saban, R. Determination of mouse bladder inflammatory response to E. coli lipopolysaccharide. Urol Res. 28 (4), 269-273 (2000).
  12. Saban, M. R., et al. LPS-sensory peptide communication in experimental cystitis. Am J Physiol Renal Physiol. 282 (2), F202-F210 (2002).
  13. Schilling, J. D., Mulvey, M. A., Vincent, C. D., Lorenz, R. G., Hultgren, S. J. Bacterial invasion augments epithelial cytokine responses to Escherichia coli through a lipopolysaccharide-dependent mechanism. J Immunol. 166 (2), 1148-1155 (2001).
  14. Saban, M. R., et al. Discriminators of mouse bladder response to intravesical Bacillus Calmette-Guerin (BCG). BMC Immunol. 8, 6 (2007).
  15. Bjorling, D. E., et al. Acute acrolein-induced cystitis in mice. BJU Int. 99 (6), 1523-1529 (2007).
  16. Sadler, K. E., Stratton, J. M., Kolber, B. J. Urinary bladder distention evoked visceromotor responses as a model for bladder pain in mice. J Vis Exp. (86), (2014).

Play Video

Citazione di questo articolo
Lee, S., Carrasco Jr., A., Meacham, R. B., Malykhina, A. P. Transurethral Instillation Procedure in Adult Male Mouse. J. Vis. Exp. (129), e56663, doi:10.3791/56663 (2017).

View Video