Summary

Reversible Kühlung-induzierte Deaktivierungen kortikalen Beiträge zum Hindernis Speicher in der zu Fuß Katze zu studieren

Published: December 11, 2017
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Summary

Komplexe Fortbewegung in naturalistischen Umgebungen erfordern sorgfältige Koordination der Gliedmaßen beinhaltet Regionen des parietalen Kortex. Das folgende Protokoll beschreibt den Einsatz der reversiblen Kühlung-induzierte Deaktivierung die Rolle des parietalen Bereich 5 in Speicher-geführte Hindernis-Vermeidung in der zu Fuß Katze zu demonstrieren.

Abstract

Sensorischer Informationen über ökologische Hindernis ist auf komplexe, naturalistische Terrain lässt sich rasch lokomotorische Bewegungen zur Vermeidung anpassen. Beispielsweise kann bei der Katze, visueller Informationen über bevorstehende Hindernis modulieren stepping für Vermeidung. Bewegungsapparates Anpassung kann auch unabhängig von der Vision, auftreten, wie plötzliche taktile Eingaben an das Bein von einem erwarteten Hindernis zur Vertiefung aller vier Beine für Vermeidung ändern können. Solche komplexen Bewegungsapparat umfasst supraspinalen Strukturen, z. B. der parietalen Kortex. Dieses Protokoll beschreibt den Einsatz der reversibel, Kühlung-induzierte kortikalen Deaktivierung parietalen Kortex Beiträge zur Speicher-geführte Hindernis Fortbewegung bei der Katze zu beurteilen. Kleine Abkühlung Schleifen, bekannt als Cryoloops, sind speziell geformt, um diskrete Regionen von Interesse für ihre Beiträge zu einem offenkundigen Verhalten beurteilen zu deaktivieren. Solche Methoden wurden verwendet, um die Rolle der parietalen Bereich 5 in Speicher-geführte Hindernis Vermeidung bei der Katze zu erhellen.

Introduction

Auf naturalistische, unebenen Gelände kann sensorischer Informationen über ein Hindernis, die Vision per Touch erworben werden können, schnell Fortbewegung zur Vermeidung ändern. Diese sorgfältige Abstimmung der Schrittmotor Bewegungen beinhaltet mehrere kortikalen Regionen1,2. Zum Beispiel haben Bereiche des motorischen Kortex3,4 und parietalen Kortex5,6,7 bei komplexen motorischen Aufgaben wie Hindernis Vermeidung verwickelt. Bei vierbeinigen Tieren müssen Schritt Modulationen erforderlich zur Vermeidung von Hindernis auf den Vorderbeinen und Hinterbeinen erstrecken. Wenn vorwärts Fortbewegung zwischen den Vorderlauf und Hinterläufen Hindernisfreiheit verzögert wird (die auftreten können, wie ein Tier sorgfältig durch eine komplexe, naturalistische Umwelt stalking Beute tritt), dient Informationen über das Hindernis im Speicher beibehalten führen das Hinterbein verstärkt über das Hindernis einmal zu Fuß fortgesetzt wird.

Experimentelle Techniken zur diskreten kortikalen Bereiche deaktivieren können verwendet werden, kortikale Beiträge zur Speicher-geführte Hindernis Fortbewegung zu studieren. Kühlung-induzierte kortikalen Deaktivierung bietet eine Reversible, zuverlässige und reproduzierbare Methode zur Bewertung von kortikalen Beiträge zu einer offenkundigen Verhalten8. Cryoloops aus Edelstahlrohren gefertigt sind spezifisch für die kortikalen Bereich von Interesse, geformt sehr selektiv und diskrete Deaktivierung der Loci zu gewährleisten. Einmal implantiert, gekühlte Methanol durch das Lumen der ein Cryoloop gepumpt, kühlt die Region der Hirnrinde direkt unterhalb der Schleife zu < 20 ° C. Unterhalb dieser kritischen Temperatur ist in der Region der Hirnrinde direkt unterhalb der Schleife synaptische Übertragung gehemmt. Diese Deaktivierung kann umgekehrt werden, indem Sie einfach aufhören den Fluss von Methanol. Diese Methode wurde zur kortikalen Beiträge zur sensorischen Verarbeitung und Verhaltensweisen9,10,11,12,13,14,15 studieren , 16 , 17, sowie die Motorsteuerung saccadischen Auge Bewegungen18 und Speicher-geführte Hindernis Fortbewegung19.

Dieses Protokoll soll reversible Kühlung-induzierte Deaktivierungen verwenden, um die Beteiligung der parietalen kortikalen Bereiche der motorischen Koordination bei der Katze zu beurteilen. Speicher-geführte Hindernis Fortbewegung war speziell, mit oder ohne aktive parietalen Kortex untersucht. Mit diesen Methoden haben erfolgreich die Rolle des parietalen Bereich 5 in Speicher-geführte Hindernis Vermeidung zu Fuß Katze19nachzuweisen.

Protocol

Alle Verfahren wurden durchgeführt in Einklang mit den nationalen Forschungsrat Leitfaden für die Pflege und Verwendung von Labortieren (achte Auflage, 2011) und des Canadian Council on Animal Care Leitfaden für die Pflege und Verwendung von Versuchstieren (1993), und waren von der University of Western Ontario tierischen Einsatz Unterausschuss des Universitätsrats auf Animal Care genehmigt. Das folgende Verfahren kann auf Experimente studieren kortikalen Beiträge zur lokomotorischen Kont…

Representative Results

Dieses Protokoll wurde erfolgreich zur parietalen Kortex Beiträge zum Hindernis Speicher zu Fuß Katze19zu untersuchen. In dieser Studie wurden Cryoloops über parietal Bereichen 5 und 7 in drei Erwachsenen bilateral implantiert (> 6 Monate alt) Katzen (Abb. 5A). Tiere wurden bewertet, im taktilen Hindernis Speicher Paradigma bei fehlender Kühlung (Warm, Kontrollbedingung) oder als Bereich 5 oder 7 bilateral deaktiviert war. <p c…

Discussion

Das beschriebene Paradigma beschäftigt Kühlung-induzierte Deaktivierungen von diskreten kortikalen Bereiche, die mit der Cryoloop um Speicher-geführte Hindernis Fortbewegung bei der Katze zu studieren. Die visuelle und taktile Hindernis Speicher Paradigmen sind ziemlich einfach für Tiere ausführen, da sie naturalistische Bewegungsorgane Verhaltensweisen, die mit minimalem Aufwand auftreten beuten, wenn ein Tier motiviert ist, eine beweglichen Nahrungsquelle zu folgen. Somit ist der Großteil der Ausbildungszeit akkl…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Wir erkennen dankbar an die Unterstützung der Canadian Institutes of Health Research, Naturwissenschaft und Engineering Research Council of Canada (NSERC) und Canada Foundation for Innovation. C.w. wurde durch ein Alexander Graham Bell Canada Graduate Stipendium (NSERC) unterstützt.

Materials

Camera IDS Imaging Development Systems GmbH Model: UI-5240CP-C-HQ
Intake tubing Restek 25306 Unflanged end is submerged in the methanol reservoir while the flanged end is connected to the pump
Pump Fluid Metering, Inc. Model: QG 150
Nalgene Dewar vacuum flask Sigma-Aldrich F9401
Teflon tubing Ezkem A051754
Microprobe thermometer Physitemp Model: BAT-12
Flanged tube end fittings Valco Instruments Co. Inc. CF-1BK Assorted colours available for colour coding. Packages include the same number of washers as fittings
Washers Valco Instruments Co. Inc. CF-W1 Extra washers
Flanging kit Pro Liquid GmbH 201553
Tubing connector Restek 25323
Tubing cutter Restek 25069
Male thermocouple connector Omega SMPW-T-M Used to make cable connection to thermometer
Thermocouple wire Omega PP-T-24S Used to make cable connection to thermometer
MATLAB MathWorks n/a

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Citazione di questo articolo
Wong, C., Lomber, S. G. Reversible Cooling-induced Deactivations to Study Cortical Contributions to Obstacle Memory in the Walking Cat. J. Vis. Exp. (130), e56196, doi:10.3791/56196 (2017).

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