に神経変性を定量化するために、マス組織学<em>ショウジョウバエ</em

平均余命の増加に伴い、アルツハイマー病やパーキンソンなどの神経変性疾患は、一般人口の増大する健康への脅威となっています。国立衛生研究所によると、115万人が世界中で、基礎となる重要な進歩は、それらの多くは、これらの疾患のうちの少なくともいくつかに関与する遺伝子および危険因子を同定することにしたが2050年に認知症により影響を受けると予測されます分子メカニズムはまだ不明かよく理解しています。

線虫（Caenorhabditis elegans）およびキイロショウジョウバエのような単純な無脊椎動物のモデル生物は、短いライフサイクル、子孫の数が多いと、十分に確立し、時にはユニークな遺伝的および分子的方法^1の可用性を含む神経変性疾患のメカニズムを研究するための実験種々の利点を提供しています^-12。さらに、これらの生物は、公平に適しています神経変性の表現型に対するそれらの悪化または改善効果によって、これらの疾患の要因を特定することができる相互作用の画面。

そのような遺伝的相互作用を分析し、高齢化の影響を評価することは神経変性を検出するために、その重症度を測定するための定量的なプロトコルが必要です。数値性能値^{13から21を}提供するような嗅覚学習、負の走地性、または高速走光性ショウジョウバエにおける行動の側面を、測定するときにこの評価は、比較的容易に行うことができます。ニューロンを計数することによりニューロンの生存に対する効果を決定することも可能です。 PDに影響されるドーパミン作動性ニューロンのように、明確に識別可能である特定の集団に着目した場合ただし、これは可能であり、その後も、結果は^22-24議論されています。

ここで説明するプロトコルは、パラフィン連続切片を実行するために、カラー方式を使用して、方法それは、もともとショウジョウバエ ²⁵に解剖学的脳の突然変異体を単離するためにそれを使用しハイゼンベルクとBöhl、によって開発されました。カラー方法の使用は、その後凍結切片、ビブラトーム切片及びプラスチックセクション^26-28に含むように適合されています。ここでは、この方法は、次に、神経変性表現型^16,21,29-32とハエに開発空胞を測定することができる全体フライヘッドの連続切片を得るために使用されます。これらの測定は、特定の脳領域で行うことができ、または脳全体を覆うことができます。後者のアプローチは、老化中に観察されたように、1つは、弱い変性表現型を識別することができます。最後に、20ハエまで、カラーを使用している場合だけでなく、より少ない時間がかかるだけでなく、原因のわずかな変化にアーティファクトを最小化する、同じ製剤中に対照および実験ハエの分析を可能にする1つの製剤として処理することができます準備。