マウスにおける臭気差別と馴化のためのテスト
Summary
This manuscript describes a protocol to examine the olfactory system of rodents. The olfactory habituation/dishabituation test will allow investigators to determine whether a mouse habituates to a repeatedly presented odor and whether the mouse demonstrates dishabituation when presented a novel odor.
Abstract
This video demonstrates a technique to establish the presence of a normally functioning olfactory system in a mouse. The test helps determine whether the mouse can discriminate between non-social odors and social odors, whether the mouse habituates to a repeatedly presented odor, and whether the mouse demonstrates dishabituation when presented with a novel odor. Since many social behavior tests measure the experimental animal’s response to a familiar or novel mouse, false positives can be avoided by establishing that the animals can detect and discriminate between social odors. There are similar considerations in learning tests such as fear conditioning that use odor to create a novel environment or olfactory cues as an associative stimulus. Deficits in the olfactory system would impair the ability to distinguish between contexts and to form an association with an olfactory cue during fear conditioning.
In the odor habitation/dishabituation test, the mouse is repeatedly presented with several odors. Each odor is presented three times for two minutes. The investigator records the sniffing time directed towards the odor as the measurement of olfactory responsiveness. A typical mouse shows a decrease in response to the odor over repeated presentations (habituation). The experimenter then presents a novel odor that elicits increased sniffing towards the new odor (dishabituation). After repeated presentation of the novel odor the animal again shows habituation. This protocol involves the presentation of water, two or more non-social odors, and two social odors. In addition to reducing experimental confounds, this test can provide information on the function of the olfactory systems of new knockout, knock-in, and conditional knockout mouse lines.
Introduction
マウスは、他の個人を認識するため、食品を見つける、新しい環境をナビゲートするための嗅覚に依存していて、性行動1-3。これは、研究者は、実験動物が食物を伴う行動試験、社会的相互作用、またはマウスからの応答を誘発することを目的と任意の臭いを投与する前香りの機能感を持っているかどうかを確立することが不可欠です。行動試験の他のタイプが実行される前に、臭いを検出し、区別するマウスの能力を確立すべきであるので、臭覚障害または異なる臭気を区別できないことは、行動パラダイムの多種多様な偽陽性または陰性につながる可能性があります。
嗅覚馴化/脱馴化試験は、最初、1980年代4に記載しました。試験は博士によるマウスでの使用に適合されています。ムーヤンとジャクリーン·クローリー5。これは、研究者はESTAを可能にする、シンプルで安価な試験でありますマウスが検出され、悪臭を区別することができますblish。テストの嗅覚に加えて、この試験は、研究者がマウスの一般的な動作を観察することを可能にし、早期のテスト計画において行われる必要があります。マウスの移動に関する定性的観察は、不安、活動のレベル、および食品の臭いに対する社会的な匂いに対する反応の兆候は、テストを行うことが可能性がある新たな分野をシグナリングすることができます。
この試験では、様々な悪臭に浸した綿棒を3回行のマウスに提示されます。臭気の各繰り返し提示すると、マウスは、その後の各プレゼンテーションでそれを調査するより少ない時間を費やして、綿棒に慣らすます。新たな臭気が提示されると、脱馴化が発生し、典型的なマウスは、現在および以前の臭気5とを区別できることを示し、綿棒を調べる多 くの時間を過ごすことになります。この試験は、一度に1つのマウスに投与し、45分ACCを備えていますlimation期間は、試験の45分が続きます。
この試験は、実施するのが容易であるが、それは、マウスの嗅覚システムに関する高度な問題を調査するために使用することができます。このような埋設食品検査として嗅覚のその他の人気の試験は、単に臭覚障害の有無を確立します。しかし、嗅覚差別と慣れ試験は、研究者がマウスで臭気を検出する能力を持っているが、異なる匂いとを区別することができないだけで判断することができます。馴化と脱馴化のパターンは、新しい変異体が臭気6,7を区別することができることを確立するために使用されています。驚くべき研究では、FadoolとのKv1.3チャネルの遺伝子標的欠失を有するそのマウスを示すために臭いの複雑な混合物を使用した同僚は、マウス8、通常よりも良い非常によく似た匂いを識別することができる「スーパーsmellers」です。
新しいノックアウトマウスモデルを調べるときには、establisに便利です時間の基本的な感覚のタスクの正常な動作の存在。テスト計画の初期に行われた場合、臭気差別や慣れテストが調査員に異常な行動を観察する機会を与えてくれます。これらの観察結果は、変異体の特性を交絡に起因するその後の検査で偽陽性または陰性の結果を防ぐことができます。研究者は、社会的行動を調査し続けている基本的な嗅覚機能を確認する必要性は、ますます重要になります。変異株における嗅覚を調べることに加えて、この試験は、すべての匂い刺激に対する薬理学的治療は、特に社会的な匂い刺激に対する動物の応答を増加させるかどうかなど、またはそれらの応答が増加した場合、特定の問題に対処するために使用することができます。
Protocol
Representative Results
Discussion
本論文で得られた結果は、マウスに最適です。マウスはすぐに慣れ、その後、新規の臭いに強い反応を示しています。この方法における重要なステップの一つは、悪臭の製造です。研究者は、汚染を防止するために、互いから臭気を分離するために細心の注意を取る必要があります。もう一つの重要な側面は、綿棒の提示です。研究者はマウスが先端を調査することができるように綿の先端?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
This work is supported by a Baylor University Research Council grant and by a research grant from the Epilepsy Foundation.
Materials
| Mouse cage | Allentown | Standard mouse cage | |
| Wire lid | Allentown | BCU Mouse WBL 2500 | |
| Bedding | Harlan | 7090 Sani-Chips | |
| Cotton swabs | VWR | 89031-270 | 6” wooden handle |
| Banana extract | McCormick | ||
| Almond extract | McCormick | ||
| Laboratory tape | VWR | 89098-062 | |
| Stop watch | VWR | 62374-000 | |
| Nitrile gloves | VWR | 82026 | |
| Timing device | VWR | 61161-350 | |
| 15 mL conical tubes | VWR | 89003-294 | |
| 2 L beakers | Pyrex | 1003 | |
| Parafilm | Parafilm | PM-992 | 4” x 250’ |
| 1 L bottle with cap | VWR | 89000-240 |
Riferimenti
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