Induzione diretta di cellule staminali neurali umane da cellule periferiche del sangue emopoietiche progenitrici

In vitro colture neuronali sono state utilizzate come strumento fondamentale per lo studio di malattie neurologiche. Animale primario (principalmente roditori) colture neuronali ^{1, 2} e linee cellulari neuronali umane derivate da gliomi o altri tumori sono i più comunemente utilizzati in tali studi. Tuttavia, è stato riconosciuto che non vi sono differenze significative tra roditori e cellule umane. Molte scoperte basate su roditori non possono essere tradotti per gli esseri umani. Inoltre, con i rapidi sviluppi l'analisi delle informazioni di massa genomica e la relativamente facile editing gene e sequenziamento dell'intero genoma, la tendenza è sempre più orientata alla scoperta di malattia geni inclini e delineare le loro funzioni e ruoli a malattie specifiche, il che rende i pochi neuronale umana linee cellulari solo hanno limitato l'utilizzo. Teoricamente, colture neuronali primarie umane derivate da campioni di sistema nervoso paziente sono la scelta migliore ma sono impossibili da ottenere; meth quindi alternativaODS sono necessari. Negli ultimi anni, alcuni approcci sono stati perseguiti, con due è il più distinguibili. Dopo lo sviluppo della tecnica di generare cellule staminali pluripotenti indotte (IPSC) utilizzando il mouse e cellule somatiche umane ^{3, 4,} cellule neurali potrebbe essere ulteriormente differenziate da loro ^5-7. Tuttavia, la generazione e la caratterizzazione iPSC richiede intensità di lavoro, le tecniche, e l'ingresso di tempo, a volte anche eccessivamente. Poco dopo, un altro approccio è stato sviluppato per trasformare direttamente le cellule neuronali dalle cellule somatiche ^{8, 9.} Poiché i neuroni risultanti sono non-proliferativa, limita la sua applicazione in studi intensivi e screening di farmaci, che richiede una grande quantità di cellule. Per prendere i vantaggi di entrambe le tecniche, diretta derivazione di cellule staminali neurali / cellule progenitrici a partire da cellule somatiche è stata esplorata da diversi gruppi ^{di 10-12,} che bypassa il tedioso processo di generazione iPSC e caratterizzazione, ma comunque provides un numero decente di cellule staminali neurali per dopo differenziamento neurale. Abbiamo precedentemente dimostrato che in seguito all'introduzione dei fattori di trascrizione Yamanaka in cellule progenitrici ematopoietiche, cellule staminali neurali possono essere generati direttamente utilizzando una cellula progenitrice neurale selezionando media ^13. Qui riportiamo il metodo in dettaglio.