신경 가소성 유도 치료의 평가를위한 흰쥐의 피질 요로의 일방적 Pyramidotomy

생존율. 우리가 실시한 대표적인 연구에서 우리는 (16) (20) 중 여성 리스터 후드 쥐 (200~250g)의 생존율을했다. 가장 흔한 합병증은 피라미드 (핵 solitarii, 모호 parabrachilis)에 지느러미 때문에 뇌간의 호흡 센터 기관 변위 또는 손상의 어려움을 호흡한다. 유사한 결과가 문헌 16에보고되어있다. 행동의 결과. 행동 검사의 범위는 설치류 pyramidotomy 후 감각 결과를 평가하기 위해 사용되었다 : 수평 사다리 테스트, 테스트 도달 한 펠렛을, 실린더 사육 시험 및 몬토야 계단 시험은 가장 일반적으로 사용되는 행동 평가이다. 문헌에 기술 된 다른 시험은 시험 도달 펠릿, 등산 로프 시험, 보행 분석 및 접착 테이프 테스트 아르3,17-19. 이들의 대부분은 손상 후 기능 모터 적자 일주 보여줍니다. 현재 문헌에 기술 된 대부분의 연구는 사십이일 4,11,13,20,21, 또는 짧은 시간 3,18,22에 대한에 행동 테스트를 수행합니다. 우리는 오랜 시간 동안 행동 테스트를 수행하고 몬토야 계단 테스트 및 수평 사다리 테스트를 제외하고, 행동 검사 중 일부에 대한 운동 기능 팔주 포스트 pyramidotomy 본질적으로 전체 복구를 보았다. 이것은 여러 가지 이유로 아마도. 우선, 병변의 부상 CST 입쪽은 척수 운동 뉴런에 간접 릴레이 작용 뇌간 신경 세포에 시냅스를 형성 할 수있다. 둘째, 손상되지 않은 (반대측) CST 새싹 수 있으며, 형태는 운동 뉴런에 중계가 뇌간이나 척수의 신경 세포에 시냅스. 셋째, 등, reticulospinal vestibulospinal 또는 rubrospinal 책자와 같은 다른 겪었던 모터 책자는 일부 기능을 대신 할 수 있습니다. 따라서, 지속 treatment 효과 pyramidotomy 모델의 많은 행동 검사로 검출하는 것이 곤란하다. 이 모델의 일부 행동 테스트는 그러나 초기 치료와 관련이 부상 후 가속 복구를 나타낼 수 있습니다. 실린더 양육 테스트 3,4,23 실린더 양육 테스트를 기반으로 지배적 인 앞발에 해당하는 CST 부상했다. 래트 플렉시 글라스 실린더에 넣은 것으로 양육 동작은 3 분 동안 관찰된다. Preinjury 수직 탐사 (그림 3A) 중 하나 앞발, 지배적 앞발의 사용에 대한 약간의 설정이 있었다. 부상 지배적 측에 영향을 미치고 contralesional 앞발의 이용 1 주일 postinjury (반복 측정에서 28 %로 감소 분산 분석 p <0.05; 사후 분석 동물 주 1, 2, 3, p <0.05에서 유의 결핍을 계시 피셔의 LSD). 사주는 동물을 회복 postinjuryD는 배후의 45 %의 영향을받는 앞다리를 사용, 6 주 후에이 57 %가 (표준 오류가 표시됩니다 ± N = 16, 평균)이었다. 및 pyramidotomy 후 최대 42 일 동안 시험 실린더를 사용하여 유사하게, 스타키 등이. (4) 평가 한 마우스는 시험 기간 전체에 걸쳐 영향 앞발의 사용에서 유의 한 감소를보고 하였다. 몬토야 계단 테스트 (24) 쥐 부상 이전에 순응하기 위해이 테스트를 위해 pretraining이 필요합니다. 테스트 세션 동물 중에 의욕을 높이기 위해 음식은 전날 밤에 쥐 당 15g의 음식 제한됩니다. 음식 박탈 쥐 15 분 동안 몬토야 계단에 배치됩니다. 각각의 측면에서, 우물 7 단계, 각 포함 3 펠렛의 계단이있다. 각 측면에 검색된 펠릿의 총 수는 기록된다. contralesional / 영향 앞발과 검색 펠릿의 수는 61 %의 preinjury에서 유의하게 감소3 % 삼일의 postinjury (그림 3B). 알약을 검색 할 수있는 기능은 여전히​​ 크게 검색 펠릿의 20 %로 4 주 postinjury에 손상되었다. 쥐 사후 분석이 동물은 모든 주에 contralesional 측면에서 상당한 적자를 밝혀 (그 시점에서 먹을 펠릿의 단지 29 %와 8 주까지 반복 측정의 분산 분석 p <0.05, 상당한 적자를 보여, P <0.05, 피셔의 LSD). ipsilesional 앞발 1 주 postinjury까지 영향; 그러나이 두 번째 주에 의해 복구 (ANOVA의 P <0.05, 사후 분석은 동물 ipsilesional 앞발에 3 일 및 1 주에서 상당한 적자를 밝혀 반복 측정, P <0.05, 피셔의 LSD). ipsilesional 앞발의 초기 적자 이후의 발아 및 복구와 절단 된 피라미드를 통해 실행 피질 기관의 동측 부분의 병소에 의해 설명 될 수 있습니다. 수평래더 테스트 (25) 쥐이 테스트 pretraining이 필요합니다. 쥐 불규칙한 단 간격으로 1 m 길이의 사다리를 통해 세 번 걸어. 영화는 나중에 슬로우 모션과 발 슬립 각 발에 대한 미스의 총 수의 분석 계량입니다. 도 3c에서의 그래프는 미스의 스텝 총 수에 대한 비율로 영향을 덜 영향을받는 쪽 (앞발 뒷발 +)의 슬립의 총 수를 나타낸다. 쥐 10 % 영향을받는 측면에 11 % 미만 영향을받는 측면 1 주 postinjury 각각의 오류 크게 증가 수 있습니다. 이 적자는하지만, 만든 10 %의 오류가 주일에 8 contralesional / 영향 측면에서 지속적 이주하여 ipsilesional / 덜 영향을받는 측면에 해결 (반복 측정 분산 분석, 사후 분석은 동물의 모든 주에서 상당한 적자를 밝혀 ipsilesional에 주 1과 3의 contralesional 측과 상당한 적자면, P <0.05, 피셔의 LSD). 전기 생리 검사 터미널 전기 생리 셋업 동물에서 우레탄 복강 마취되었다. 과정 전반에 걸쳐이를 37 ℃ ± 1 ℃로 유지 하였다. 그것의 복부 목 지역, 그것의 앞다리와 가슴 지역은 면도 요오드 스크럽을 이용하여 살균 하였다. 이전에 피부와 pectoralis 전공을 절개 복부 접근 방식에 의해 상완에 설명 반경 신경이 노출되면서 피라미드 노출시켰다. 요골 신경의 말단부 절단하고 신경 미네랄 오일 욕에서 두 실버 와이어 후크 전극 위에 놓았다. 어느 피라미드는 5 내지 300 Hz에서 펄스 ​​및 증가 자극 진폭 깊이가 다른 동심의 바이폴라 자극 전극 하였다. 녹음은 항상 장애인 암 (그림 4)의 반경 신경에서 만들어졌다. 손상되지 않은 ANIM반대측 피라미드는 (그림 4B) 자극 할 때 루게릭 병은 반경 신경에 12-20 밀리 초 사이의 대기 시간에 강한 반응을했다. 동측 자극은 가끔 활성화 (그림 4C)을 초래한다. 병변 기관이 병변 (그림 4B ') 이상으로 자극 할 때 이전에 기록 팔에 반대편에, pyramidotomies을받은 동물, 반경 신경의 응답을 표시하지 않습니다. 그러나, 피라미드의 CST 섬유의 자극 전극 12 주 postinjury (그림 4C ')에서 손상되지 않은 동물에 비해 반경 신경에 강한 활성화의 결과 기록 동측. 해부 결과. 동물은 동물의 일정 1 (과학적 절차) 법 1986 년 이전에 2 주에 따라 십주의 postsurgery를 안락사시켰다, 손상되지 않은 CST는 바이오틴으로 추적했다장애인 팔 운동 피질 (26) 동측에 덱스 트란 아민 (BDA) 주사 (그림 1). 이 정중선을 건너 contralesional 척수 (그림 5C, D)를 공급 손상되지 않은 섬유, 정량화 할 수 있습니다. 이 부상에 대한 응답으로 증가하는 반면 손상되지 않은 동물은, 중간 선을 넘어 몇 섬유를 가지고있다. 횡 경추 척수 절편 병변 CST (도 5E) 16 탈 신경의 비율을 평가하기 위해 단백질 키나제 C (PKC) 감마으로 염색 하였다. 대안 적으로, 병변의 완전성이 손상 pyramidotomy ipsilesional 측 운동 피질 내로 BDA 트레이서를 주입함으로써 평가 될 수있다. 반대측 dorsomedial CST에서 라벨의 부재와 CST 특히 ventromedial 동측 완료 일방적 절개의 증거를 제공한다. <img alt="그림 1" fo:conte nt-폭 = "4 인치"src = "/ 파일 / ftp_upload / 51843 / 51843fig1highres.jpg"폭 = "400"/> 그림 1 : 회로도 쥐, 피라미드의 CST의 일방적 axotomy의 피질 책자를 보여주는 상단 이미지 :. 피질 신경 세포가 대뇌 피질의 층 (5) 피라미드 세포에서 유래. (녹색에 도시) 덱스 트란 오티 닐화 아민 실험의 마지막 2 주 전에 contralesional 피질 내로 주입된다. 중간 이미지 : 책자는 수질의 복부 표면과 축삭의 대부분이 decussate spinomedullary 접합에서 피라미드를 형성한다. 일방적 pyramidotomy은 (적색 도시) 꼬리 수질 행한다. 낮은 이미지 : 척수의 dorsomedial과 배 외측 부분에서 아래로 실행 피질 책자의 대부분. 소수 동측 유지하고 ventromedially 실행됩니다. 1843fig2highres.jpg "폭 ="500 "/> 그림 2 : 쥐의 뇌의 복부보기. 그들은, 병렬 볼록 (노란색 상자)를 제기하고 있기 때문에 피라미드는 독특한입니다. 피라미드의 경계는 기저 동맥 (C)에서와 같이 중간 선 이상과 측면의 중간 기저 동맥과 paraolivary 동맥 (POL) 사이의 볼록의 기지에서 (BAS)에 의해 내측으로 정의된다. 개두술은 기저 동맥을 통해 수행되고 paraolivary 동맥 (C에서 빨간색 상자)까지 연장 측면. 하나의 피라미드는 기저 동맥에 수직으로 절단 (C에서 레드 라인, 컷 A와 B의 표본에 표시됩니다). CST는 척추 동맥이 중간 선을 설정되어 있기 때문에 decussate하고 시작하기 때문에 척추 동맥 (VERT)에 너무 가까이 꼬리 쪽 배치 병변은 완전하지 않습니다. 조지 Paxinos (27)에 의해 "쥐 신경 시스템"에서 적응 (C) 이미지. 주 :이 도면은 화상의 좌측 병변을 나타낸다 : 이는 동물의 장비 인HT 피라미드 기관은 반듯이 누워되기 때문이다. 비디오가 동물의 왼쪽 피라미드 기관에 병변이 표시되는지 그러나 유의하시기 바랍니다. 그림 3 :. 실린더 양육 테스트를위한 대표 결과, 테스트 및 수평 사다리 테스트에 도달 몬토야 계단 펠릿은 손상 후 모든 테스트에 의해 검출 된 모터 적자가 있습니다. 지속적인 적자가 몬토야 계단 테스트 및 수평 사다리 테스트 최대 8 주 postinjury (N = 그룹, 수단 및 표준 오류 당 (16)가 검출 할 수있는 반면 그러나, 적자는 4 주 postinjury에서 실린더 양육 검사로 검출 할 수 없습니다 그림 참조). 별표는 P <preinjury 수있다.