В естественных изображений из Dauer конкретным нейронов ремоделирования в C. Элеганс

Фенотипический пластичность, в том числе развития и состояния психического пластичности, имеет важное значение для адаптации к неблагоприятным условиям окружающей среды и считается движущей силой в эволюции ^1. C. Элеганс является модельным организмом часто используются для исследований в области развития и нейробиологии. В идеальных условиях, C. Элеганс развивается через четыре личиночной стадии перед входом в репродуктивной стадии взрослого. Тем не менее, в условиях низкой доступности пищи и высокой плотностью населения, C. Элеганс могут пройти переключатель с развитием и войти в долгоживущих и стресс-устойчивых этапе DauER ^2. Dauers отображать несколько морфологических и поведенческих отличий от не-dauers что, вероятно, опосредующие этот стрессоустойчивость. Экологические сигналы и генетические пути, регулирующие въезд DauER широко описаны ^{3, 4, 5, 6, 7.} Однако молекулярные механизмы, контролирующие отдельные изменения фенотипических которые происходят Dформирование рительными Dauer менее понятны.

Изучение DauER конкретных фенотипов требует производства DauER животных. Это может быть достигнуто тремя способами: 1) Выбор из голодали культуры C. Элеганс, 2) Использование образования DauER конститутивный (DAF-с) мутантов, 3) индукции формирования DauER через очищенной феромона. Это довольно просто подобрать dauers от стандартного NGM пластины с C. население Элеганс, которая исчерпала свой ​​бактериальный продовольственную. В наших руках, стандартный NGM пластины первоначально высевают с 50 мкл OP50 кишечной палочки, могут расти в течение 3 дней, а затем, привитых 3 – 4 взрослых гермафродитов выдерживали при 25 ° С исчерпает поставку продовольствия в течение одной недели и производить несколько тысяч dauers пределах дополнительных 3 дней (в дополнение к многочисленным голода не-dauers). Тем не менее, этот способ является неудовлетворительным для анализа процессов, происходящих во время линьки в DАуэр. Трудно определить, какой из нескольких тысяч животных на типичного голодали пластины вступаем в Dauer. Кроме того, использование голодали пластины не дает возможность синхронизации. Использование DAF-с-мутантов позволяет синхронизации и надежной генерации dauers. Тем не менее, нет никакой гарантии, что конкретный DAF-C мутации не влияют на другие DauER конкретного фенотипа отдельно или в сочетании с дополнительными мутаций.

Наличие DauER феромона впервые подразумевается Cassada и Рассела и позже показали Золотой и Риддл. Dauer феромона с тех пор были химически охарактеризован ^{2, 8, 9, 10.} Очищенный феромона состоит из сложной смеси ascarosides, которые в различных формах регулировать как поведенческие и развития процессов ^{9, 11.} Использование сырой экстракт DauER феромонов позволяет надежно контролируется индукция синхронизированных dauers в фоновом режиме дикого типа. </р>

Нервная система и связанные глиальные клетки подвергаются ремоделирования во DauER личинки образования ^{12, 13, 14.} Некоторые из этих изменений являются необратимыми, таких как ремоделирования глиальные клетки во время Dauer ^{13, 14.} Тем не менее другие ремоделирования события обратимы после возвращения к благоприятным экологические условия. Например, набор из четырех IL2Q нейронов подвергаются быстрому и обратимое нейронов ремоделирования при формировании DauER включая: дендритов разветвление, перехода от одного дендритных к multidendritic нейроны и аксоны реконструкции ^12. Здесь методы позволяют для надежной визуализации в естественных условиях стресс-индуцированной нейропластичностью в качестве модельного организма. Методы, представленные для производства и тестирования сырой DauER феромона предварительно описано и составлена ​​из нескольких источников ^{4, 8, 15, 16, 17, 18.}