סמנים ביולוגיים הם אינדיקטורים ביולוגיים ישירות נמדדים של מחלה או בריאות. באוכלוסייה ובמדעי חברה, סמנים ביולוגיים צריכים להיות קל להשגה, תחבורה, ולנתח. אוסף ספוט דם יבש (DBS) עונה על צורך זה, יכול להיות שנאסף בתחום עם שיעורי תגובה גבוהים וניתח עבור מגוון רחב של סמנים ביולוגיים.
סמנים ביולוגיים הם אינדיקטורים ביולוגיים ישירות נמדדים של מחלה, בריאות, חשיפות, או מידע ביולוגי אחר. באוכלוסייה ובמדעי חברה, סמנים ביולוגיים צריכים להיות קל להשגה, תחבורה, ולנתח. כתמי דם יבשים לענות על צורך זה, ויכולים להיות שנאסף בתחום עם שיעורי תגובה גבוהים. אלמנטים אלה חשובים במיוחד בעיצובי מחקר אורך כוללים התערבויות בי ההתשה היא קריטית להימנע, ושיעורי תגובה גבוהים ישפרו את הפרשנות של תוצאות. איסוף דגימת ספוט הדם יבש הוא פשוט, מהיר, ללא כאבים יחסית, פחות פולשנית ואז venipuncture, ודורש דרישות אחסון שדה מינימליות (כלומר דגימות לא צריכה להיות מייד קפוא והוא יכול להיות מאוחסן במשך תקופה ארוכה של זמן בסביבת מקפיא יציבה לפני assay). דוגמאות ניתן לנתח עבור מגוון רחב של analytes שונה, כוללים כולסטרול, חלבון מגיב C, המוגלובין מסוכר, ציטוקינים רבים, וoanalytes יס, כמו גם לספק חומר גנטי. אוסף DBS מתואר כמועסק בכמה מחקרים שנעשה לאחרונה.
סמנים ביולוגיים יכולים לספק מידע רב ערך על תהליכים ביולוגיים הנעים בין נורמלי לפתוגניים שעשויות לתרום למחלה קלינית לזיהוי 1. בהגדרות מחקר, כתמי דם יבשים (DBS) הופכים להיות מועדפים יותר ויותר לvenipuncture כשיטה לאיסוף סמנים בדם כולו. אוסף DBS הוא פשוט, יחסית, ללא כאבים, פחות פולשניות אז venipuncture, ודורש דרישות אחסון מינימליות (כלומר דגימות לא צריכים להיות קפוא באופן מיידי והוא יכול להיות מאוחסן במשך תקופה ארוכה של זמן בסביבת מקפיא יציבה לפני assay). דגימות DBS ניתן לבדוק עבור מגוון רחב של analytes שונה, כוללים כולסטרול, חלבון מגיב C, המוגלובין מסוכר, נוגדני וירוס אפשטיין בר, וכמה ציטוקינים.
Venipuncture כבר זמן רב את תקן הזהב לאוסף של סמנים ביולוגיים בדם. עם זאת, קבלת, אחסון ומשלוח דגימות דם דורשת adherenCE למספר הפרוטוקולים וקודי בריאות, שלא יכול להיות אפשרית בפרוטוקולי מחקר מסוימים. מתרימי דם חייבים להיות מאושר באופן רשמי לvenipuncture, ואילו נהלי דגימת DBS הם פשוטים ואינו דורשים הסמכה רשמית. איסוף דם ורידים גם דורש יותר ציוד מאשר אוסף DBS (כלומר מחטים, צינורות, שערים מסתובבים), ומאמץ יותר פוסט אוסף. דגימות venipuncture חייבים להיות מעובד (כלומר בסרום או פלזמה המופק מדגימת הדם באמצעות צנטריפוגה או עומדים בטמפרטורת חדר למשך פרק זמן נתון) והקפוא בין -20 מעלות צלזיוס ו-70 ° C באופן מיידי על מנת למנוע ההידרדרות של analytes , ואילו דגימות DBS חייבת פשוט להיות מותרת לייבוש באוויר ולאחר מכן ניתן לאחסן בטמפרטורת חדר במשך שבוע או יותר, תלוי באנליטי, לפני ההעברה להקפאה 2. דגימות DBS הן פחות יקרות כדי לאסוף דגימות מ venipuncture לסיבות שתוארו לעיל. דגימות DBS גםתופס פחות מקום, הפחתת עלויות משלוח ואחסון לפני assay.
השימוש ברוק כסמן ביולוגי הפך מרכזי במחקרי biobehavioral. רוק מציע שיטה פשוטה, לא פולשנית לאסוף סמנים ביולוגיים והפך לסטנדרט לעבודת שטח שנועדה למדידת קורטיזול או קוטינין 3-5. שתן הוא דגימה נוספת שניתן לאסוף noninvasively וניתן להשתמש בו במחקרים ברמת אוכלוסייה למבחנים של מלטונין או לטוקסיקולוגיה. בעוד שני שתן ורוק מציעים ישר קדימה הליכי גבייה שיכולים להתבצע על ידי משתתפים עצמם, ניתן למדוד לא כל analytes בתקשורת אלה.
DBS מציע פשוט, חסכונית, אלטרנטיבה לvenipuncture והופך להיות כלי מחקר מיושם יותר ויותר בתחום ולימודי אוכלוסייה 6.
סמנים ביולוגיים הם כלים מאוד שימושיים על פני תחומים רבים, ובם רפואה, ביולוגיה של תא, גנטיקה, פסיכולוגיה, סוציולוגיה, דמוגרפיה, ואפידמיולוגיה חברתית. בתוך כל דיסציפלינה, מחקר סמן ביולוגי תוקף השלב המוקדם ואמינות היה בשימוש כדי לחשוף גם את סיכון למחלות נסתרות ומספק תחזית ארוכת טווח של תוצאות בריאותיות. במקרים אלה, סמנים כי הם מדויקים, עמידים (כלומר הם יכולים לשרוד את הפער בין איסוף דגימה ויישום של assay המעבדה כדי לחלץ את הסמן הביולוגי), ותכליתי (כלומר שימושי במגוון רחב של דגמים) נדרשים.
בעוד אוסף DBS הוא הליך פשוט יחסית, כמה טכניקות יכולות לעזור למקסם את עוצמת הקול של נקודות שנאספו. לפני האוסף מתחיל, על מנת להבטיח את היד של משתתף הוא חם, ולכן שכלי דם מורחבים, יסייע בזרימת דם ברגע שהאצבע הוא ניקב. שימוש במחממי יד או שישמשתתף להפעיל את ידיהם במים חמים יכול לעזור בתהליך זה. חליבת האצבע לפני האוסף תמשוך דם לקצה האצבע ולחמם את היד כדי לעזור את זרימת דם. חליבה היא תהליך שמשתפר עם תרגול. אספן צריך להשתמש בכל טכניקה הם מוצאים נוחים ויעילים ביותר, אך הגישה הנפוצה ביותר כרוך בחליבת היד של המשתתף עם היד הנגדית של האספן. שיטה זו תאפשר לאגודל של האספן לעבודה עמוקה לתוך כף ידו של המשתתף ואילו היד הנגדית יכולה לייצב פרק כף היד של המשתתף. כדוגמא, אם אחד היה איסוף דם מאצבע ביד השמאל של המשתתף, האספן יתייצב פרק כף היד של המשתתף עם יד השמאל שלהם וחלב עם יד הימין שלהם. טעויות נפוצות שנעשו על החליבה ואילו לא כוללת שימוש אחיזה איתנה, מושכת את העור מעל היד ולא עובדת בשרירים כדי למשוך את הדם לכיוון קצה האצבע. כמו כן, חשוב להימנע מסיכהצ'ינג האצבע בחליבה ביד או בחוזקה אוחז בשורש כף ידו של המשתתף עם nonmilking היד, אשר שניהם לעכב את זרימת דם.
כאשר ניקוב האצבע, להפיק את לנקב עמוק ככל האפשר על ידי הלחיצה בחוזקה Lancet לאצבע לפני השחרור. לנקב רדוד תוצאות בפחות זרימת דם וקרישה מהירה יותר. לאחר ניקוב האצבע, עובד במהירות הוא מפתח. דם דק מוביל לאוסף וכתמים גדולים יותר קלים יותר. לאחר ניקור, הדם הופך להיות יותר וצמיג יותר עד קרישה. פחות הזמן הדרוש כדי לאסוף כתמי דם על הכרטיס גדול יותר את נפחן.
באופן אידיאלי הדם של המשתתף יהיה דק מספיק כדי שהטיפין ייפלו מהמשקל שלהם, אבל זה לא יהיה המקרה עבור כל המשתתפים, כמו הדם של אנשים מסוימים הוא עבה יותר או קרישים מהר יותר מאחרים. אם הדם הוא עבה מדי כדי ליפול מהאצבע, כרטיס המסנן יש להביא את הדם לאוסף. מה עלי לעשותen להביא את הכרטיס לדם חשוב להחזיק את הכרטיס במגע עם הטיפה בזמן שהוא תלוי מהאצבע כל עוד אפשרי, ולא רק מספיג את הדם לכרטיס. זה יעזור לי דם למשוך מהאצבע כדי למקסם את הגודל של המקום. טכניקה זו דורשת ידיים יציבים כדי לשמור על קשר בין הדם ואת הכרטיס. שימוש בשתי הידיים, אחת כדי לייצב את משתתפי יד ואחד להחזיק בכרטיס, ושמירה על שני הידיים במגע אחד עם השני עוזרת לייצב את הכרטיס והדם ביחד.
תחומי מחקר מתקדמים, כגון הערכת סיכון הקרדיו, יש לסמוך ארוך על סמנים ביולוגיים כגון C-reactive protein (CRP), אינסולין, וההמוגלובין מסוכר (HbA1c) לגילוי מוקדם סיכון ואת מאמצים למניעה, כמו גם סמנים ביולוגיים של "נקודות קצה קשות" למחלת לב וכלי דם סיכון (CVD) ותמותה הקשורים CVD 12. אפידמיולוגיה קלינית לעתים קרובות מעריכה סמנים ביולוגיים לprospectively לחזות תוצאות סיכון הקרדיו כגון מחלות לב וסוכרת מסוג II. אולי בשימוש נרחב ביותר של כל הסמנים הביולוגיים הוא ציון סיכון פרמינגהם, מרוכבים הכוללים לחץ דם, רמות כולסטרול HDL ורמות כולסטרול כוללת שהוכיח תועלת בניבוי CVD 13. עם זאת, ציון פרמינגהם חווה כמה מחלוקות טכניות, ויש לו מגבלות במחקרים התמקדו בקישור בין גורמים חברתיים וסביבתיים לבריאות, דבר המצביע על הצורך בסמנים יותר מדויקים וספציפיים הקשורים למחקר לב וכלי דם.
ישנן מספר ערכות זמינות מסחרי באמצעות ELISA או בטכניקות דומות זמינות עבור assay של דגימות די. הכרחי עבור assay של דגימות DBS הם השימוש בצעדי elution ספציפיים ומותאמים להביא דגימות מיובשות לפתרון 2. מדובר בשטח הרחבת של מחקר כמבחנים ליותר analytes כרגע בשלבי הפיתוח 1. בין המבחני דואר כבר תוקף ונמצא בשימוש נרחב הם כולסטרול 2, CRP 10,14,15, IgE16, EBV 9,15, לפטין 17, וcyotkines 18. ישנן מספר המעבדות המתמחות בassay של DBS, כולל מחלקת אוניברסיטת וושינגטון של מעבדה לרפואה (באוניברסיטת וושינגטון מעבדת Med) המעבדה סמנים ביולוגית (במאי: מארק Wener).
בהתחשב בכך שפנל של סמנים ביולוגיים, ולא סמן ביולוגי בודד, הוא שימושי ביותר בתחומי מחקר לב וכלי דם וסוכרת, סמנים ביולוגיים צריכים להילקח בחשבון יחד עם מגוון רחב של גורמים קונטקסטואליים על מנת למקסם את התועלת שלהם. מחקר סמן ביולוגי יכול להיות יקר עם זאת, הן מבחינה כלכלית והן בזמן לאיסוף נתונים. וכך, בעוד היא חיונית כדי לבחור סמנים כי הם מדויקים, עמידים, תכליתי, מחקר סמן עבודה והמשפחה חייב להיות מושרש במעשיות על ידי בחירת סמנים כי הם לא יקרים, מתאימים, ויכול להיות שנאסף במהירות wiקלות ה. יתר על כן, שיקולים מעשיים לעתים קרובות לגרום לאי יכולת למקסם את בו זמנית מחיר, איכות והמהירות בהליך אחד. במסמך זה לשקר את הצעדים הבאים במחקר סמן ביולוגי בריאות במחקרי שדה ואוכלוסייה. תחום מחקר סמן נמצא כעת בתקופה של צמיחה דרמטית, עם זאת, את רוב העבודה הוא עדיין לבוא.
The authors have nothing to disclose.
עבודה זו נתמכה על ידי העבודה, המשפחה ובריאות ברשת (www.WorkFamilyHealthNetwork.org), אשר ממומנת על ידי הסכם שיתוף פעולה דרך מכוני בריאות הלאומיים ואת המרכזים לבקרת מחלות ומניעתן: מכון יוניס קנדי שרייבר הלאומי לבריאות הילד ופיתוח אנושי (גרנט # U01HD051217, U01HD051218, U01HD051256, U01HD051276), מכון לאומי להזדקנות (גרנט # U01AG027669), משרד של התנהגות ומחקר מדעי מדע, הלאומי ללב, ריאות ודם מכון (R01HL107240), ומכון הלאומי לעיסוק בטיחות והבריאות (גרנט # U01OH008788, U01HD059773). מענקים מקרן ויליאם ט 'גרנט, אלפרד סלואן קרן P, והמנהל לילדים ומשפחות סיפקו מימון נוסף. את תוכנו של פרסום זה הוא באחריות בלעדית של הכותבים ואינו בהכרח מייצג את הדעות הרשמיות של מוסדות ומשרדים אלה.
Asepti II Microbial Wipes | EcoLab | D12330345 | 3rd party shipping |
Bio-hazard waste bags | VWR | 14220-092 | High Strength Autoclavable Polypropylene Biohazard Bags, 2 mil |
Bio-hazard waste barrel | Tyco | 58578-092 | 8g. Slide lid |
Sharps Container | BD Medical | BD305487 | 1.4 qt. |
Chux | VWR | 82020-845 | Absorbent bench underpads |
Gloves | VWR | XSmall: 89038-267 | Powder-free, latex-free nitrile gloves |
Small: 89038-268 | |||
Medium: 89038-270 | |||
Large: 89038-272 | |||
XLarge: 89038-274 | |||
Hand sanitizer (e.g., Purell) | Johnson & Johnson | 89040-210 | 3rd party shipping |
Alcohol wipes | WEBCOL and CURITY | 82003-856 | Prep pads |
Gauze | VERSALON | 82004-826 | Non-woven sponges |
Band-Aids | Nutramax Stat Strips | 15431-475 | |
Lancets | Owen Mumford | 82028-060 | 3.0 mm, 21 ga. |
Protein paper collection cards | Whatman | Custom-build | 903 Protein Saver Collection paper |
Desiccant | VWR | 61161-319 | Humidity sponges |
Specimen bags | Lab Guard Reclosable Biohazard Bags, ITW Minigrip | 56766-370 | 6” x 9” |
Specimen storage cooler | Igloo | Playmate Mini | 4 qt.; direct from manufacturer |