Summary

自由に行動するマウスにおける有孔質路 - 歯状回シナプスの長期増強

Published: November 29, 2013
doi:

Summary

神経疾患のトランスジェニックおよびノックアウトマウスモデルは、正常および異常な神経生理学における遺伝子の役割を研究するために有用である。この記事では、長期増強、自由神経病理のマウスモデルを振る舞うトランスジェニックおよびノックアウトで学習と記憶を、根底にある細胞メカニズムを研究するために使用することができる方法を説明します。

Abstract

シナプス伝達効率の長期増強の研究は、潜在的な細胞メカニズム基本的な学習や情報記憶装置として、それが魅力的にする特性を有する活性依存性シナプス現象は、長い間、海馬、扁桃体の様々な神経回路の生理機能を解明するために使用されている、および他の辺縁系および皮質構造。これを念頭において、神経疾患のトランスジェニックマウスモデルは、学習、感情情報とに関与する神経回路網における正常および異常なシナプスの通信における遺伝子の役割をより深く理解を開発するために長期増強(LTP)の研究を行うために有用なプラットフォームを表す処理。この記事では、確実に自由に行動するマウスではLTPを誘導するための方法論を説明します。これらの方法論は、自由神経変性疾患のマウスモデルの挙動を、トランスジェニックおよびノックアウトの研究において使用され得る。

Introduction

遺伝子を操作する技術の開発がほぼすべての神経変性および神経疾患のトランスジェニックおよびノックアウトマウスモデルを生産している。これは、以前にマウス動物モデルに大きいげっ歯類種において使用される電気生理学的研究技術の翻訳を必要としている。一つのこのような神経生理学的な調査技術は、種々の神経病理学的疾患に関与する神経回路網内のシナプス結合の有効性を試験するために使用長期増強(LTP)である。このプロトコルは、自由にマウスを振る舞うにおけるLTPの信頼性のある電気生理学的調査のための手法について説明します。他のものよりもこのプロトコルの利点は、単純で実装が容易であることであり、それはそれは高価なコンピュータ制御のマイクロドライブシステムや電界効果トランジスタのヘッドステージの使用どちらも必要としないこともなく、低コストであり、我々の知る限りでは、慢性電気生理学的記録トンの最初のビデオプロトコルですO自由にマウスを振る舞うにLTPを研究。この目的のために、我々は、この記事内で自由に行動するマウスでは長期増強を研究するための簡単​​な方法を説明します。これらの方法論は容易に神経病理学的疾患のトランスジェニックおよびノックアウトマウスモデルに変換することができます。

Protocol

このプロトコルは、3と18歳30〜50 gでおよその体重ヶ月)のマウスに適しています。マウスは、ジャクソン·ラボラトリー(バーハーバー、ME)から得ることができる。すべての外科的および実験プロトコルは、トリニティカレッジ動物実験委員会によって承認され、実験動物の管理と使用に関するNI​​Hのガイドに合わせてあった。 1。動物の準備および外科的処置ケタミン(25 m…

Representative Results

このプロトコルで使用される表1は、DGとMPPの座標を示している。図1(a)は、頭蓋骨上の標的構 ​​造のためのマーキングを示し、。も示すグランドおよび基準電極の位置している。図1Bは、担当者が事前に両方の応答トレースを誘発示しています。と同じ動物におけるposttetanization。 posttetanization応答が。 図1Cは、応答振幅を定量するために…

Discussion

このプロトコルでは、自由に行動するマウスにおいてDG中でLTPを研究するための確実かつ簡単な方法を実証した。覚醒ラットにおけるLTPの多くの研究が3,4行われてきたが、非常に少数のは、主にマウスでは限られた頭蓋の不動産がもたらす技術的な複雑さとの平均重量を基準に、電極ヘッドステージの重みに目を覚ましたマウスで行われているマウス5。自由にマイクロドライ…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

博士ジョセフブロンズィーノ、博士ハミーアブ·Hassaballah氏RJオースティン – ラフランス、そして氏ジェシカKoranda:著者は、次のことを認めることを願っています。

Materials

Ketamine (100 mg/ml) Henry Schein 10177
Xylazine (20 mg/ml) Henry Schein 33197
Acepromazine (10 mg/ml) Henry Schein 2177
Dental acrylic powder Lang Dental Manufacturing Co. 1330CLR
Dental acrylic liquid Lang Dental Manufacturing Co. 1306CLR
Tungsten wire (0.127 mm) World Precision Instruments TGW0515
Stainless Steel Hypodermic Tubing (0.286 mm) World Precision Instruments 832400
Flunixin (50 mg/ml) Henry Schein 14165
Epoxilyte Superior Essex EP 6001-M
Stainless steel wire insert (0.2 mm) World Precision Instruments 792900
Stereotaxic frame apparatus Kopf Instruments Model 902
Ear cuffs (ear cups) Kopf Instruments Model 921 
Electrophysiological stimulator Astro-Med, Inc. S88
Digital oscilloscope B & K Precision Corp. 2542
Current isolation unit Astro-Med, Inc. PSIU-6
Differential amplifier World Precision Instruments, Inc. DAM-50
Commutator Plastics One SLC6
Dental drill Stoelting 58650

Riferimenti

  1. Paxinos, G., Franklin, K. B. J. . The mouse brain in stereotaxic coordinates. , (2004).
  2. Bliss, T. V. P., Lomo, T. Long-lasting potentiation of synaptic transmission in the dentate area of the anesthetized rabbit following stimulation of the perforant path. J. Physiol. 232, 331-356 (1973).
  3. Blaise, J. H., Bronzino, J. D. Effects of stimulus frequency and age on bidirectional synaptic plasticity in the dentate gyrus of freely moving rats. Exp. Neurol. 182, 497-506 (2003).
  4. Blaise, J. H., Koranda, J. L., Chow, U., Haines, K. E., Dorward, E. C. Neonatal isolation stress alters bidirectional long-term synaptic plasticity in amygdalo-hippocampal synapses in freely behaving adult rats. Brain Res. 1193, 25-33 (2008).
  5. Koranda, J. L., Masino, S. A., Blaise, J. H. Bidirectional synaptic plasticity in the dentate gyrus of the awake freely behaving mouse. J. Neurosci. Methods. 167, 160-166 (2008).
  6. Cooke, S. F., et al. Autophosphorylation of alphaCaMKII is not a general requirement for NMDA receptor-dependent LTP in the adult mouse. J. Physiol. 574, 805-818 (2006).
  7. Davis, S., Bliss, T. V., Dutrieux, G., Laroche, S., Errington, M. L. Induction and duration of long-term potentiation in the hippocampus of the freely moving mouse. J. Neurosci. Methods. 75, 75-80 (1997).
  8. Jones, M. W., Peckham, H. M., Errington, M. L., Bliss, T. V., Routtenberg, A. Synaptic plasticity in the hippocampus of awake C57BL/6 and DBA/2 mice: interstrain differences and parallels with behavior. Hippocampus. 11, 391-396 (2001).
  9. Zhang, T. A., Tang, J., Pidoplichko, V. I., Dani, J. A. Addictive nicotine alters local circuit inhibition during the induction of in vivo hippocampal synaptic potentiation. J. Neurosci. 30, 6443-6453 (2010).
  10. Tang, J., Dani, J. A. Dopamine enables in vivo synaptic plasticity associated with the addictive drug nicotine. Neuron. 63, 673-682 (2009).

Play Video

Citazione di questo articolo
Blaise, J. H. Long-term Potentiation of Perforant Pathway-dentate Gyrus Synapse in Freely Behaving Mice. J. Vis. Exp. (81), e50642, doi:10.3791/50642 (2013).

View Video