Summary

La potenciación a largo plazo de la Vía Perforante-giro dentado sinapsis en comportarse libremente Ratones

Published: November 29, 2013
doi:

Summary

Transgénicos y knockout modelos de ratón de enfermedades neurológicas son útiles para estudiar el papel de los genes en la neurofisiología normal y anormal. Este artículo describe metodologías que pueden utilizarse para estudiar la potenciación a largo plazo, un mecanismo celular que puede ser la base de aprendizaje y la memoria, en transgénicos y knockout libremente comportarse modelos de ratón de la neuropatología.

Abstract

Estudios de la potenciación a largo plazo de la eficacia sináptica, un fenómeno sináptica dependiente de la actividad que tiene propiedades que lo hacen atractivo como un potencial mecanismo celular de almacenamiento de aprendizaje y la información subyacente, han sido durante mucho tiempo utilizado para elucidar la fisiología de varios circuitos neuronales en el hipocampo, la amígdala , y otras estructuras límbicas y corticales. Con esto en mente, los modelos de ratones transgénicos de enfermedades neurológicas representan plataformas útiles para llevar a cabo la potenciación a largo plazo (LTP) estudios para desarrollar una mayor comprensión de la función de los genes en la comunicación sináptica normal y anormal en las redes neuronales implicadas en el aprendizaje, la emoción y la información procesamiento. En este artículo se describen las metodologías para la inducción de LTP en forma confiable el ratón libremente comportarse. Estas metodologías se pueden utilizar en estudios de transgénicos y Knockout comportarse libremente modelos de ratón de enfermedades neurodegenerativas.

Introduction

El desarrollo de la tecnología para manipular genes ha producido transgénicos y knock-out modelos de ratón de casi todas las enfermedades neurodegenerativas y neurológicas. Esto ha requerido traducción de técnicas de investigación electrofisiológicos utilizados previamente en especies de roedores más grandes en el modelo animal de ratón. Una de tales técnicas de investigación neurofisiológica es el uso de la potenciación a largo plazo (LTP) para probar la eficacia de las conexiones sinápticas dentro de las redes neuronales implicados en diversos trastornos neuropatológicos. Este protocolo describe las técnicas para la investigación electrofisiológica fiable de LTP en comportarse libremente ratones. La ventaja de este protocolo sobre otros es que es simple y fácil de implementar, sino que también es bastante menos costoso, ya que no requiere ni el uso de costosos sistemas de microdrive controlados por el ordenador ni Headstages transistor de efecto de campo, y, a nuestro conocimiento, es el primer protocolo de video de grabaciones electrofisiológicas crónicas to estudiar la LTP en comportarse libremente ratones. Con este fin, se describe en este artículo metodologías sencillas para estudiar la potenciación a largo plazo en ratones comportarse libremente. Estas metodologías pueden ser fácilmente traducidos a modelos transgénicos y knockout de ratón de trastornos neuropatológicos.

Protocol

Este protocolo es adecuado para ratones de 3 y 18 meses de edad y el peso corporal aproximado de 30-50 g). Los ratones se pueden obtener de El Laboratorio Jackson (Bar Harbor, ME). Todos los protocolos quirúrgicos y experimentales fueron aprobados por el Comité de Cuidado de Animales y el empleo Trinity College y estaban de acuerdo con la Guía del NIH para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio. 1. Preparación de los animales y Procedimientos Quirúrgicos Preparar cóctel que contiene la anes…

Representative Results

La Tabla 1 muestra las coordenadas de la DG y mPP empleado en el presente protocolo Figura 1A muestra las marcas de las estructuras diana en el cráneo;.. También se muestran la ubicación de los electrodos de tierra y de referencia Figura 1B ilustra representante respuesta evocada traza tanto pre- y posttetanization en el mismo animal. Tenga en cuenta que la posttetanization respuesta evocada es mayor que la respuesta pretetanization que es indicativo de la inducción…

Discussion

En este protocolo, hemos demostrado un método fiable y sencillo para el estudio de LTP en la Dirección General en ratones comportarse libremente. Mientras que muchos estudios de LTP en ratas despiertas se han realizado 3,4, muy pocos se han realizado en ratones despiertos todo debido a la complejidad técnica que supone la inmobiliaria craneal limitada en ratones y el peso de Headstages electrodos en relación con el peso medio de 5 ratones. Los pocos estudios que han demostrado la PLP en la Dire…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Los autores desean agradecer a las siguientes: Dr. Joseph Bronzino, Dr. Khamis Abu-Hassaballah, Sr. RJ Austin-LaFrance, y la Sra. Jessica Koranda.

Materials

Ketamine (100 mg/ml) Henry Schein 10177
Xylazine (20 mg/ml) Henry Schein 33197
Acepromazine (10 mg/ml) Henry Schein 2177
Dental acrylic powder Lang Dental Manufacturing Co. 1330CLR
Dental acrylic liquid Lang Dental Manufacturing Co. 1306CLR
Tungsten wire (0.127 mm) World Precision Instruments TGW0515
Stainless Steel Hypodermic Tubing (0.286 mm) World Precision Instruments 832400
Flunixin (50 mg/ml) Henry Schein 14165
Epoxilyte Superior Essex EP 6001-M
Stainless steel wire insert (0.2 mm) World Precision Instruments 792900
Stereotaxic frame apparatus Kopf Instruments Model 902
Ear cuffs (ear cups) Kopf Instruments Model 921 
Electrophysiological stimulator Astro-Med, Inc. S88
Digital oscilloscope B & K Precision Corp. 2542
Current isolation unit Astro-Med, Inc. PSIU-6
Differential amplifier World Precision Instruments, Inc. DAM-50
Commutator Plastics One SLC6
Dental drill Stoelting 58650

Riferimenti

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Citazione di questo articolo
Blaise, J. H. Long-term Potentiation of Perforant Pathway-dentate Gyrus Synapse in Freely Behaving Mice. J. Vis. Exp. (81), e50642, doi:10.3791/50642 (2013).

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