שימוש<em> בvivo</em> הדמיה למעקב אחר ההתקדמות של זיהום ציטומגלווירוס עכבר ניסיוני בילודים

ציטומגלווירוס האנושי (HCMV/HHV-5) הוא חבר של משפחת β-ההרפס. HCMV היא הפתוגן שכיח ביותר, אופורטוניסטי שהוא בדרך כלל שנרכש במהלך חייו המוקדמים כזיהום ללא תסמינים ^1. כמו כל herpesviruses, HCMV נמשכת לאורך כל חייו של המארח שמערכת חיסון חזק שולטת שכפול נגיף. פרקים של הפעלה מחדש נגיפית בעיקר להתרחש אצל אנשים מדוכאי חיסון, כגון חולים להשתלה מקבלים תרופות למניעת דחיית שתל ^2. אצל מבוגרים, HCMV גם קשורה לglioblastomas ^3. בנוסף, HCMV היא הפתוגן בולט עבור תינוקות עם חסינות בשלה ^4-6. הדבקה ראשונית בעובר או ילוד הפיתוח יכולה להיות השלכות חמורות. HCMV זיהום הוא הסיבה זיהומית הנפוצה ביותר של מומים מולדים מולדים והפרעות ילדות במדינות מפותחות. ההערכה היא כי השכיחות של זיהום HCMV ילוד משפיעה על 0.5-1% oF כל הלידה חי בין 5-10% שיסבלו מתסמינים חמורים כגון microcephaly או hypoplasia המוח הקטן. בנוסף, 10% מהתינוקות שנדבקו בזיהום נגיפי תת קליני יהיו מאוחר יותר לפתח sequellae מוביל לפיגור שכלי, אובדן שמיעה, ליקויים חזותיים או התקף אפילפסיה ^ו7,8.

בניגוד לherpesviruses אדם אחר כגון הרפס סימפלקס 1 (HSV-1/HHV-1) אשר ניתן לעכברים מחוסן דרך נתיבים של הזרקה ⁹ שונים, שכפול ציטומגלווירוס הוא מינים ספציפיים. תכונה זו פגעה קשה בחקירות של פתוגנזה HCMV אשר בוצעו במודלים של בעלי חיים שונים (עכבר, חולדה, חזיר, קוף רזוס) וCMVs מארח הספציפי האמיתי שלהם. כל CMVs מפגין דמיון משמעותי בגודל הגנום וארגון, כמיהות רקמות ורגולציה של ביטוי גנים. הם גם לגרום למחלות דומות במארח שלהם, בהתאמה. למרות גיוון גנטי להיותTween HCMV וציטומגלווירוס העכבר (MCMV) (50% מORFs להציג בוירוס האנושי מזוהים בCMV העכברי), מודל העכבר הוכיח לאחרונה להיות יתרון, בעיקר משום שניתן לבדוק זנים מוטנטים ליכולת שלהם לשלוט ויראלי שכפול in vivo. זה הוביל למסך גנטי שאפשרו הערכה של מספר הגנים עכבר לידי ביטוי בשלב הבוגר המרכיבים את "resistome" לווירוס הזה ^10. בסך הכל, זה מצביע על כך MCMV עכברים נגועים מייצגים מודל אטרקטיבי לחקר אינטראקציות בין מאכסן לוירוס במבוגרים. החקירה של זיהום CMV מולד היא מורכבת יותר בגלל הבדלים בארגון שכבת שליה בין אדם ועכברים לפגוע בשידור אם לעובר של זיהום ויראלי בעכברים. לאחרונה, הזרקה ישירה של MCMV בשליה ביום 12.5 להריון אפשרה זיהום המוח של ילודים עכברים שהביאו לליקוי שמיעת ^11. עם זאת, רובnvestigations כעת להשתמש בזריקת intraperitoneal של 4-20 ילודים בני שעה כדי לספק הפצה נגיפית מערכתית שעלולים לגרום לדלקת מוח hematogenous, מודל שהוא יותר רלוונטי מזו של הזרקה תוך גולגולתי. פרוטוקול זה סיפק תובנה חשובות פתוגנזה CMV ועוד במיוחד, זה הודגם כי זיהום MCMV של תוצאות יילודים בשכפול נגיף בתאים עצביים וגליה נמצאים במוקדים דלקתיים אשר חדרו עם תאי mononuclear כמו מקרופאגים ^12. דו"ח זה גם תאר המורפוגנזה שינתה של המוח הקטן מלווה עם התפשטות פחת פרטנית נוירון והגירה והאינדוקציה של גני אינטרפרון מגורה מרובים. התפקיד החיוני של CD8 + תאי T לשליטת MCMV במערכת העצבים המרכזית שדיווח גם על ידי אותה הקבוצה ^13. היבט חשוב לשקול בעת ניתוח ההשפעה פתולוגית של חיידק הוא את הדינמיקה של להדביקיון. במקרה של MCMV, זה חיוני במיוחד כדי לחקור ולכמת את ההתקדמות של הפצת נגיף למוח המתפתח, כדי להבין ולחזות את סדר הגודל של פציעות הנוירוביולוגי בעתיד. באופן מסורתי, כימות של ההתקדמות של זיהום דורשת הקרבה הקבועה של בעלי חיים נגועים לכיילה את הפתוגן ברקמות, כגון מוח, שהם נגישים אחרים. זה סוג של פרוטוקול כעת לערער על ידי שיפור הכרחי של רווחת בעלי חיים ואת 3Rs (צמצום, מקד, החלף) ¹⁴ עקרונות. שימוש בטכנולוגיות ההדמיה vivo עשויה לאפשר הפחתה דרסטית של מספר בעלי החיים אשר נחוצות בזיהום בניסויי vivo. כאן אנו מדווחים ומתארים את ניתוח בזמן קורס של הפצה נגיפית אל תוך המוח על זריקת intraperitoneal MCMV לוק לילודי עכבר. שימוש באותם בעלי החיים, אנחנו במעקב והפיקוח in vivo האתרים של vi האינטנסיבישכפול RAL בתקופה 2 בשבוע.