אנו מציגים שיטה בלתי הרסנית לדגימת וריאציה המרחבית בכיוון של אור מפוזר מחומרים מורכבים מבחינה מבנית. על ידי שמירה על את החומר בשלמותה, אנו משמרים התנהגות פיזור גולמית בקנה מידה, בעת לכידה מקביל תרומות כיוונית משובחת בקנה מידה עם הדמיה ברזולוציה גבוהה. תוצאות הם דמיינו בתוכנה בעמדות וקשקשת ביולוגית רלוונטיים.
אור מקיים אינטראקציה עם integument של האורגניזם על מגוון רחב של קני מידה מרחביים. לדוגמה בציפור ססגונית: מבנים בקנה מידה ננו לייצר צבע; מבנה מילי בקנה המידה של עקיצות וbarbules קובע במידה רבה את הדפוס כיוונית של אור מוחזר, ובאמצעות המבנה המרחבי מאקרו בקנה המידה של חפיפה, נוצות מעוגלות, השפעות יווניות אלה יוצרים המרקם החזותי. תופעות בקנה מידה מילי ומאקרו בהיקף לקבוע היכן בגופו של האורגניזם, וממה שנקודתי מבט ובאילו תאורה, הצבעים הססגוניים נראים. לפיכך, הבזק כיוונית גבוהה של צבע מבריק מהגרון הססגוני של יונק דבש מוסבר כראוי על ידי המבנה בקנה מידה ננו לבד ונותרו שאלות. מנקודת תצפית נתון, בו אלמנטי מילי בקנה מידה של הנוצה מכוונים כדי לשקף בתוקף? האם מינים מסוימים לייצר "חלונות" רחבה יותר לתצפית של זוהר יותר מאחרים? מ 'שאלות אלה ודומותאיי להישאל על כל יצורים שהתפתחו משטח מראה מיוחד לאיתות, הסוואה, או סיבות אחרות.
על מנת ללמוד את הדפוסים כיוונית של פיזור אור מהנוצות, ומערכת היחסים שלהם למורפולוגיה מילי בקנה המידה של ציפור, פיתחנו פרוטוקול למדידת האור מפוזר מחומרים ביולוגיים באמצעות תמונות ברזולוציה גבוהה בהרבה שצולמו בתאורה שונה והצגת כיוונים. מכיוון שאנו מודדים את האור מפוזר כפונקציה של כיוון, אנחנו יכולים לבחון את התכונות האופייניות בהתפלגות כיוונית של האור מפוזר מנוצה מסוימת, ובגלל העקיצות וbarbules נפתרות בתמונות שלנו, אנו יכולים לייחס באופן ברור את התכונות שונות כיוונית לאלה מבני מילי בקנה מידה. שמירת הדגימה שלמה משמרת את התנהגות הפיזור גולמית בקנה המידה ראתה בטבע. השיטה המתוארת כאן מציגה פרוטוקול כללי לניתוח מרחבית וdirectionally-VArying פיזור אור מחומרים ביולוגיים מורכבים בקני מידה מבניים מרובים.
צבע הדפוס של integument של האורגניזם לשחק מבחינה אקולוגית ופונקציות חברתיות קריטיות ברוב מיני בעלי חיים. מאפיינים פנוטיפי אלו נקבעים על ידי האינטראקציה של אור עם המבנה של integument, שיכול להציג פיזור אופטי שמשתנה במרחב (על פני השטח של integument) וdirectionally (עם שינוי בתאורה וצפייה בכיוון). בחומרים ביולוגיים מורכבים, כגון נוצות, הכיוון של פיזור אור מושפע מנטייה לחזור על גיאומטריה מילי בקנה מידה. אלו מבנים בקנה מידת מילי עצמם עשויים להיות מוטבעים במבנים בקנה מידה ננו, כגון מערכי מלנין, אשר לעתים קרובות יורשים את כיוון מילי בקנה המידה. מננו למקרו קשקשים, מבנה integument התפתח תפקודי כדי להגדיל את יכולת האיתות של האורגניזם. על מנת להעריך את ההשפעה של המורפולוגיה של קני מידה שונות על המראה הכללי, כלים ללמדוד ולנתח את הצבע של מבנים ביולוגיים זקוקים לגמישות כדי לבודד פיזור אור כיוונית בקני מידה שונים של הגדלה.
פיתחנו כלי מדידה המבוסס על תמונה כדי ללמוד איך ביצועים של מורפולוגיה מילי בקנה המידה המורכבת ומגוון של נוצה (רמי עקיצה, barbules דיסטלי, וbarbules פרוקסימלי) מרחיב את מגוון ביטוי האפשר ממבנים בקנה מידה ננו בלבד. בתמונה אחת נרשמה על ידי המצלמה, שמנו לב שאור מוחזר באופן שונה במקומות שונים על פני השטח של הנוצה, כלומר, החזר האור היה מרחבית-משתנה. כשעברנו את האור ומצלמה כיוון ביחס לנוצה, צפו ההחזרה השתנתה, כלומר, החזר האור directionally-1 משתנה. בעקבות תצפיות אלה, עיצבנו פרוטוקול באופן שיטתי להעביר את האור והמצלמה סביב הנושא באמצעות 2,3 gantry כדורי, שבה אנו נתפסו 2 ממדים של suעמדת rface (X ו-Y), 2 ממדים של כיוון אור (קווי אורך ורוחב), וממדים של 2 כיוון מצלמה (קווי אורך ורוחב) (איור 2). בתוכנה אנחנו חזותי חקרנו את 6 ממדים של האור המפוזר כפונקציה של מיקום, כיוון תאורה וכיוון מבט.
מחקר קודם להחזרה מנעשתה עור יש מהוון לעתים קרובות מדי את התרומה של כיווניות – למשל השתקפות מפוזרת לעומת specular או איזוטרופית לעומת אניסוטרופי – לביטוי צבע. רוב מדידות צבע קבועות לאור האירוע, אובייקט, וגיאומטריה צפייה בזהירות כדי להימנע מהשפעות יווניות. לדוגמה, כדי לחסל את השתקפות השתקפות ממדידות צבע, מקובל למקם את האור הרגיל אל פני השטח ולהקליט את ההחזרה ב 45 מעלות מרגילות. מחקרים שעושים את מורפולוגיה קישור להחזרת directionally משתנה, בדרך כלל להתמקד בקנה מידת ננווהשלכותיה הססגוניות 4-8. מעטים רואים את התרומה של מיקרו, מילים, וגיאומטריות מאקרו בקנה מידה לחתימת 8-11 מרחיק תחום האופטי. לכן זה נפוץ להעסיק גלאי אור להחזרת מצטבר על פני שטח אחד של ריבית שעשויה לכלול רכיבי האלפית ו / או מאקרו בקנה מידה מרובים, כגון רמי עקיצה, barbules, ואפילו נוצות שלמות 6,8,11-17 . כאשר האזור של עניין הוא גם קטן יותר מגבול הרזולוציה של הגלאי או לא להתאים את הצורה של השדה של הגלאי של נוף, הפרוטוקול הנפוץ מציין נתיחת דגימה כדי לבודד את פיזור האור מאלמנט מילי בקנה המידה הספציפי 8,10 , 13,15.
פיתחנו פרוטוקול מקיף יותר לרכישת מדידה והדמיה שמעודדת את החקירה של משתנים הרבים מתעלמים לעתים קרובות במחקרים ממוקדים יותר אחרים. אנו מודדים את פיזור אור על תחום והכיוונים acrosאזור sa של החלל באמצעות מערך מסיבי של טווח דינמי גבוה, תמונות ברזולוציה גבוהה שנלקחו ממערכת שיטתית של אור וכיווני צפייה. אנו מעסיקים חיישן הדמיה ברזולוציה גבוהה עם מערך 2D של גלאי פיקסל קנס בקנה מידה. צבירה בחומרה מתרחשת בפיקסל ברמה, בקנה מידה קטן יותר מאלמנטי מילי בקנה המידה שאנחנו המדידה. שנייה פיקסלים בודדות אגרגטים הבמה בתוכנה כמשתמש בוחרים את הצורה והגודל של האזור של עניין. בהתאם לכך, ערכת מדידה אחת ניתן לנתח שוב ושוב בתוכנה כדי לחקור היבטים של אינטראקציה אור שונים עם חומר בעמדות ביולוגית רלוונטיות מרובות וקשקשת. על ידי ביטול נתיחה ומדידה כל הנוצה, יש הפרוטוקול שלנו את היתרון של עוזב את המורפולוגיה של שבשבת הנוצה בשלמותה, שמירה על הקשר ותפקוד כלומר, האינטראקציות של האור בין אלמנטים המרכיבים את מילי בקנה המידה טבעיים.
פיזור אור משל האורגניזםtructure הוא רב ממדי וקשה לכמת. נמדד פיזור אור 6 ד 'לא יכול עדיין להיות מיוחס למורפולוגיה מסוימת בתוך היררכיה של קנה מידה עם כל מכשיר מיוחד במינו. אבל עשינו צעד חשוב במרדף הזה. פיתחנו כלי המקיף את שלוש שיטות משלימות – החזר דגימה באמצעות gantry, לחקור כמויות נתונים גדולות בתוכנה, באופן חזותי נתונים בצורה גרפית תת – להרחיב את יכולתנו למדוד את פיזור אור 6 ד 'בכל נקודה על חומר, עד מילי בקנה מידה. כפרוטוקולים כמו שלנו מועסקים, אנו צופים ביולוגים יהיו לזהות מספר עצום של תכונות directionally ומרחבית, משתנות והתאמות מבניות מתאימות בקני מידה שונים של פיתוח. שימוש בכלים שלנו שאנחנו עוסקים באפיון פוטנציאל האיתות של הביטוי כיוונית והמרחבית של מבני מילי בקנה מידה, ואני מקווים לשפוך אור על השלכות ההסתגלות שלהם. אנחנו עוסקים במגוון של שאלות, כגון: מy נתון נקודת תצפית, שאלמנטים משובחים בקנה מידה או באזורי ברוטו בקנה מידה של הנוצה משקפים בחום? איך את הכיוון של האלמנטים עדינים בקנה המידה להשפיע על הכיוון של אור מפוזר? מה תנאים מורפולוגיים לייצר הסטן מבריק לעומת נצנצים ניצוץ של הקישוט הססגוני? האם מינים מסוימים לייצר "חלונות" רחבה יותר לתצפית של זוהר יותר מאחרים? שאלות אלה עשויות להישאל על ציפורים והנוצות שלהם, אלא גם על כל יצורים אחרים שהתפתחו משטח מראה מיוחד לאיתות, הסוואה, או סיבות אחרות.
למרות הביצועים והתפקוד של colorations פיגמנטריים והמבני רבים מוכרים היטב, המורפולוגיה של נעשה עור רבים היא כל כך מורכבת, שהפירוט והתפקוד המבני שלהם הם הבינו היטב 20. נעשה עור פיתחו התמחויות המשתנות במרחב על פני השטח של האורגניזם כדי לשקף את האור כיוונית לכיוון הצופה באופן דיפרנציאלי. יווניות זכו לתשומת לב בעיקר במחקר של זוהר בשל שינוי הצבע שלה עם שינוי של אירוע ואת זווית צפייה, ומחקר לזוהר של integument הביולוגי צברה בעיקר 1D וכמה מדידות 2D 8,12,17. אבל מדידות 6D כלליות לא היו שגרתיות בלימוד נעשה עור 21-23, ססגוני או בדרך אחרת, והספרות על פנוטיפים צבע האורגניזם היא מוגבלת על ידי חוסר נתוני צבע כיוונית מסוג השיטה שלנו מספקת.
הנוצה היא r במיוחדחומר הכסות ich הכולל הסדרים של מבנה בקנה מידה של מילי העקיצה: barbules הרמי, דיסטלי, וbarbules הפרוקסימלי. בקנה מידה הקטנה של האלמנטים וההסדרים המורכבים שלהם לעשות את זה קשה להבחין ביצועי פיזור האור של הרכיבים הבודדים. הפרוטוקול שלנו מבודד בהצלחה בקנה מידת מבנה האלפית מההשפעה של גיאומטריה מאקרו בקנה מידה. על ידי אפיון ההשלכות התפקודיות של הביטוי כיוונית של מבני מילי היקף לחתימה בשדה רחוק של הנוצה, שאפשרנו חקירת השלכות ההסתגלות שלהם.
אנו מתמודדים פשרות מעשיות בין רזולוציה ספקטרלית, במרחב ובזוויתי. אנחנו בחרנו הזוויתי מרחבית גבוהות, בינוניות ונמוכים רפאים ללימודים שלנו. שילובים אחרים יכולים לשמש, אבל (לדוגמה: כל גבוהה) להוביל לכמה פעמים מדידה ארוכות unworkably. תשומת לב צריך להיות ממוקד בו חשוב לתופעות מסוימות הנלמדים. בבחירה להעסיק CA RGBMera בפסיפס מסנן באייר, עיצבנו הפרוטוקול שלנו כדי להתאים את מערכת הראייה האנושית. המצלמה RGB יכולה להיות מוחלפת והפרוטוקול שלנו מותאם למדידת הגירוי הצבעוני היחסי של כל אורגניזם, יש צורך ברגישות לדוגמה בספקטרום UV למדוד עופות צבע טטרה כרומטית 24,25. מצלמה הדמיה רפאים תספק פתרון הכללי ביותר 25.
אנחנו הפגנו הפרוטוקול שלנו עם נוצות כנף tertial מאז הם צבעוניים ושטחו בקלות נגד צלחת הפניה. למרבה הצער, הצמצם של לוחית המתכת חשף רק חלק קטן משטח הנוצה. אם אנחנו יכולים למדוד בו זמנית צורת 3D של פני השטח הנוצה תוך מדידת החזרתה 25, היינו יכול למנוע מכאני משטח את הנוצה ובמקום למדוד את כל הנוצות במצב הטבעי, שיטוחה.
כלים אינטראקטיביים, מיוחדים, משולבים עבור נתונים חזותי לספק substantiאל להועיל למדענים לחקור ולפרש כמויות נתונים גדולות. יותר האינטגרציה והאינטראקטיביות, את החיבורים קלים יותר בנתונים הם נצפו. בתוכנה שלנו, משתמש אינטראקטיביים ניתן להתוות פיזור כיוונית ממוצע כפונקציה של פני השטח עמדה (איור 4). פיתוח נוסף של התוכנה שלנו יכול לשלב פונקציות התוויה אחרות (6 דמויות, 7) כדי להאריך את החוויה האינטראקטיבית.
The authors have nothing to disclose.
מחקר זה מומן על ידי הקרן הלאומית למדע (NSF אות קריירה CCF-0,347,303 וNSF מענק CCF-0,541,105). המחברים מבקשים להודות לירוסלב Křivánek, ג'ון מון, אדגר לאסקז-ארמנדריז, ונצל יעקב, ג'יימס הארווי, סוזן סוארז, אליס לייב, וג'ון Hermanson על תרומתם האינטלקטואלית. קורנל כדורי Gantry נבנה מעיצוב בשל דוויין פולק, מארק Levoy, ושמעון Rusinkiewicz.