Summary

Experimentele Endocarditis Model van Methicilline Resistente<em> Staphylococcus aureus</em> (MRSA) in Rat

Published: June 04, 2012
doi:

Summary

Experimentele rat endocarditis model veroorzaakt door meticilline-resistente<em> S. aureus</em>.

Abstract

Endovasculaire infecties, waaronder endocarditis, zijn levensbedreigende besmettelijke syndromen 1-3. Staphylococcus aureus is de meest voorkomende wereldwijde oorzaak van dergelijke syndromen met onaanvaardbaar hoge morbiditeit en mortaliteit zelfs met geschikt antibioticum behandelingen 4-6. De toename van infecties veroorzaakt door meticilline-resistente S. aureus (MRSA), de hoge tarieven van vancomycine klinische behandeling storingen en groeiende problemen van linezolid en daptomycine weerstand hebben alle verdere gecompliceerde de behandeling van patiënten met dergelijke infecties, en leidde tot hoge kosten van de gezondheidszorg 7, 8. Daarnaast moet worden benadrukt dat de meeste recente studies met een behandeling met antibiotica uitkomsten zijn gebaseerd op klinische settings, en dus misschien wel worden beïnvloed door gastheer factoren variërend van patiënt-to-patiënt. Daarom is een relevant diermodel endovasculaire infectie waarbij gastheerfactoren geven gelijke dieren per dier iscruciaal microbiële pathogenese, en de effectiviteit van nieuwe antimicrobiële agentia te onderzoeken. Endocarditis in de rat is een gevestigde experimenteel diermodel dat nauw benadert de menselijke inheemse klep endocarditis. Dit model is gebruikt om de rol van bepaalde staphylococcen virulentiefactoren en de werkzaamheid van antibiotica behandelingen op Staphylococcus endocarditis te onderzoeken. In dit rapport beschrijven we de experimentele endocarditis model als gevolg van MRSA die kunnen worden gebruikt om bacteriële pathogenese en de respons op behandeling met antibiotica te onderzoeken.

Protocol

1. Voorbereiden van de MRSA-stammen voor Infectie Inoculeer een entoog met bacterie MRSA cultuur van een voorraad buis bij -80 ° C tot een schaap bloed trypticasesoja-agar (TSA) plaat (zie tabel van specifieke reagentia en apparatuur), en incuberen bij 37 ° C voor de overnachting. Controleer de zuiverheid van de cultuur op het bloed agar plaat (vergelijkbaar kolonie fenotypes) om ervoor te zorgen is er geen besmetting. Kies een kolonie van de schapen bloed TSA plaat en inoculeren de kolo…

Discussion

De rat endocarditis een belangrijke en gekarakteriseerd diermodel voor in vivo studies bij de Pathogenese en antimicrobiële middelen bij de behandeling van bacteriële infecties 9-11. Daarnaast, rat endocarditis model is een samenstelling van acute en sub-acute infecties, en nauw bootst de menselijke tegenhanger en menselijke inheemse klep endocarditis. Bovendien, vergezeld van een in de woning katheter, het vertegenwoordigt een klassiek biofilm-geassocieerde infectie, een veel voorkomende en lastig…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Dit werk werd ondersteund door de US National Institutes of Health [subsidie ​​R01AI-39108 aan ASB] en de American Heart Association [subsidies SDG 0630219N en AID 09GRNT2180065 te YQX].

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments
Blood agar plate, 5% sheep blood in Trypticase Soy agar(TSA) Hardy Diagnostics A10BX  
Trypticase Soy broth (TSB) Becton Dickinson 211825  
Shaking incubator Labnet I5311-DS  
Polyethylene tubing Becton Dickinson 427401  
Catheter introducer Becton Dickinson 6999  
       
Isofluorance Western Medical Suppy, Inc 2147 Follow safety and handling information
Surgical Instruments Fine Science Tools and Biomedical Research Instruments, Inc.   Find the instruments from the two companies for your needs

Riferimenti

  1. Petti, C. A., Fowler, V. G. Staphylococcus aureus bacteremia and endocarditis. Cardiol. Clin. 21, 219-233 (2003).
  2. Bashore, T. M., Cabell, C., Fowler, V. Update on infective endocarditis. Curr. Probl. Cardiol. 31, 274-352 (2006).
  3. Fowler, V. G., Justice, A., Moore, C. Risk factors for hematogenous complications of intravascular catheter-associated Staphylococcus aureus bacteremia. Clin. Infect. Dis. 17, 313-320 (1993).
  4. Wisplinghoff, H., Bischoff, T., Tallent, S. M., Seifert, H., Wenzel, R. P., Edmond, M. B. Nosocomial bloodstream infections in US hospitals: analysis of 24,179 cases from a prospective nationwide surveillance study. Clin. Infect. Dis. 39, 309-317 (2004).
  5. Hoen, B. Special issues in the management of infective endocarditis caused by gram-positive cocci. Infect Dis. Clin. North Am. 16, 437-452 (2002).
  6. Moise, P. A., Hershberger, E., Amodio-Groton, M. I., Lamp, K. C. Safety and clinical outcomes when utilizing high-dose (> or =8 mg/kg) daptomycin therapy. Ann. Pharmacother. 43, 1211-1219 (2009).
  7. Sakoulas, G., Brown, J., Lamp, K. C., Friedrich, L. V., Lindfield, K. C. Clinical outcomes of patients receiving daptomycin for the treatment of Staphylococcus aureus infections and assessment of clinical factors for daptomycin failure: a retrospective cohort study utilizing the Cubicin Outcomes Registry and Experience. Clin. Ther. 31, 1936-1945 (2009).
  8. Xiong, Y. Q., Willard, J., Kadurugamuwa, J. L., Yu, J., Francis, K. P., Bayer, A. S. Real-time in vivo bioluminescent imaging for evaluating the efficacy of antibiotics in a rat Staphylococcus aureus endocarditis model. Antimicrob. Agents Chemother. 49, 380-387 (2005).
  9. Peerschke, E. I., Bayer, A. S., Ghebrehiwet, B., Xiong, Y. Q. gC1qR/p33 blockade reduces Staphylococcus aureus colonization of target tissues in an animal model of infective endocarditis. Infect. Immun. 74, 4418-4423 (2006).
  10. Ganesh, V. K., Rivera, J. J., Smeds, E. A structural model of the Staphylococcus aureus ClfA-fibrinogen interaction opens new avenues for the design of anti-staphylococcal therapeutics. PLoS Pathog. 4, e1000226 (2008).
  11. Boles, B. R., Horswill, A. R. Staphylococcal biofilm disassembly. Trends Microbiol. , (2011).
  12. Tseng, C. W., Sanchez-Martinez, M., Arruda, A., Liu, G. Y. Subcutaneous Infection of Methicillin Resistant Staphylococcus Aureus (MRSA). J. Vis. Exp. (48), e2528 (2011).

Play Video

Citazione di questo articolo
Hady, W. A., Bayer, A. S., Xiong, Y. Q. Experimental Endocarditis Model of Methicillin Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) in Rat. J. Vis. Exp. (64), e3863, doi:10.3791/3863 (2012).

View Video