Summary

Schnelle Bestimmung der Wärmeleistung und nozizeptiven Grenzwerts bei diabetischen Ratten

Published: May 17, 2012
doi:

Summary

Hier beschreiben wir eine schnelle zuverlässige und einfache Verfahren, um die niedrigste Temperatur, bei der Ratten oder Mäusen zeigen nozifensiven Verhalten bestimmen,<em> Dh</em> Die<em> Thermische nozizeptive Schwelle</em> (TNT). Diese Methode gilt eine langsam zunehmende thermische Reiz ermöglicht präzise und reproduzierbare Bestimmung von TNTs mit einem Minimum, wenn überhaupt, den Stress der Tiere.

Abstract

Schmerzhafter diabetischer Neuropathie (PDN) wird von Hyperalgesie, dh, erhöhte Empfindlichkeit gegenüber schädlichen Reiz, und Allodynie dh Überempfindlichkeit gegen normalerweise harmlose Reize 1 gekennzeichnet. Hyperalgesie und Allodynie wurden in vielen verschiedenen Tiermodellen des Diabetes mellitus 2 untersucht worden. Jedoch wird, wie durch Bölcskei et al, Bestimmung der "Schmerz" in Tiermodellen festgestellt Herausforderung aufgrund seiner subjektiven Natur 3. Darüber hinaus sind die traditionellen Methoden verwendet werden, um Verhaltensreaktionen auf schädliche thermische Reize bestimmen in der Regel fehlt die Reproduzierbarkeit und Empfindlichkeit pharmakologische 3. Zum Beispiel, indem Sie die Hot-Plate-Verfahren von Ankier 4, zusammenzucken, ist Rückzug und / oder Lecken der beiden Hinterbeine und / oder Vorderpfoten als Reflex Latenzen bei einer konstanten hohen thermischen Reizen (52-55 ° C) quantifiziert. Jedoch keine Tiere, die Hyperalgesie auf thermische Reize sind nicht reproduzierbar zeigen Unterschiede in der Reflex Latenzen bei der Nutzung dieser supra-Schwelle Temperaturen 3,5. Wie der kürzlich beschriebenen Methode der Bölcskei et al. 6, können die hier beschriebenen Verfahren für die schnelle, empfindliche und reproduzierbare Bestimmung der thermischen nozizeptiven Grenzwerte (TNTs) bei Mäusen und Ratten. Das Verfahren verwendet langsam ansteigenden thermischen Stimulus meist auf die Haut der Maus / Ratte plantare Oberfläche aufgebracht. Das Verfahren ist besonders empfindlich gegen Anti-Nozizeption während hyperalgetische Staaten wie PDN zu studieren. Die beschriebenen Verfahren sind unten auf die, die im Detail von Almási et al 5 und Bölcskei et al 3 veröffentlicht wurde. Die hier beschriebenen Verfahren genehmigt worden sind die Versuchstierkunde Care und Use Committee (LACUC), Wright State University.

Protocol

TNTs von Mäusen und Ratten werden durch Verwendung bestimmt das inkrementelle Hot-Plate-Analgesie Meter [iHPAM, IITC Life Science Inc. (Woodland Hills, CA)]. Die Ausrüstung besteht aus mehreren Komponenten: eine Aluminium-Platte (10 x 20 cm) mit der Heizung und unter einer Plexiglas-Kammer über Beobachtung, ein Wärme-Steuereinheit, Software zur Datenerfassung (IITC Part # Soft-Series 8), ein PC (Personal Computer) und einem Fußschalter für Remote Start, Stop oder Reset-Steuerung des Gerätes. Die Heizung ermöglic…

Discussion

Ähnlich wie bei der klassischen Kochplatte Test auf thermische Hyperalgesie 4,13 quantifizieren, beschrieb der Test der Nozizeption hier erlaubt einen schnellen und zuverlässigen Weg, um nozifensiven Verhalten bei Ratten und Mäusen zu quantifizieren. Im Gegensatz zu klassischen Test, ist das inkrementelle Hot-Plate-Verfahren nicht-invasiv und praktisch stressfrei. Obwohl einige zurückhalten ist notwendig, um den Test durchzuführen (dh das Tier muss in der Beobachtung Kammer sein), werden Ratten …

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Diese Arbeit wurde von der American Diabetes Association (ADA), Grant JF1-10-14 (MDiF) gefördert. Wir möchten das Personal des Labors für Tier-Ressourcen an der WSU danken. Autoren danken für die Unterstützung bei der statistischen Analyse der Daten von Neil Paton, Ph.D.

Materials

Name Company Catalogue number
Incremental Hot-Plate Analgesia Meter IITC Inc. Life Science Part #PE34
Soft Series 8 IITC Inc. Life Science Part # Series8
Streptozotocin Calbiochem 572201

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Citazione di questo articolo
Alshahrani, S., Fernandez-Conti, F., Araujo, A., DiFulvio, M. Rapid Determination of the Thermal Nociceptive Threshold in Diabetic Rats. J. Vis. Exp. (63), e3785, doi:10.3791/3785 (2012).

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