Les neurones inhibiteurs sont cruciaux pour la fonction corticale. Ils représentent environ 20% de toute la population neuronale corticale et peut être subdivisée en sous-types différents en fonction de leurs propriétés immunochimiques, morphologiques, physiologiques et ^1-4. Bien que des recherches antérieures ont révélé beaucoup sur les propriétés intrinsèques des différents types de neurones inhibiteurs, les connaissances sur leurs connexions circuit local est encore relativement limitée ^3,5,6. Étant donné que la fonction de chaque neurone individuel est façonné par son entrée synaptique excitateurs et inhibiteurs dans les circuits corticaux, nous avons eu recours à balayage laser photostimulation (LSP) pour les connexions locales au plan du circuit des types spécifiques de cellules inhibitrices. Comparé à une stimulation électrique conventionnel ou la stimulation de glutamate feuilletée, LSPS a des avantages uniques permettant la cartographie étendue et l'analyse quantitative des locaux fonctionnels pour les entrées enregistrés individuellement neurones ^3,7-9. Photostimulation laser via uncaging glutamate active sélectivement les neurones perisomatically, sans activer les axones de passage ou de dendrites distales, ce qui assure une résolution de cartographie sous-laminaire. La sensibilité et l'efficacité de LSP pour les entrées de cartographie à partir de nombreux sites de stimulation sur une vaste région sont bien adaptées pour l'analyse des circuits corticaux.

Ici, nous introduisons la technique de LSP combinée avec la cellule entière patch clamp pour la cartographie des circuits locaux inhibiteurs. Enregistrements spécifiques ciblées sur des types de cellules inhibitrices sont facilitées par l'utilisation de souris transgéniques exprimant des protéines vertes fluorescentes (GFP) dans des populations limitées neurone inhibiteur du cortex ^3,10, ce qui permet l'échantillonnage uniforme des types de cellules ciblées et d'identifier sans ambiguïté les types de cellules enregistrées . Comme pour la cartographie des LSP, nous décrivons l'instrumentation du système, décrire la procédure expérimentale et acquisition de données, et présente des exemples de cartographie circuit principal de la souris cortex somatosensoriel. Comme illustré dans nos expériences, le glutamate est activé en cage dans une région géographiquement limitée de la tranche de cerveau par photolyse laser UV; simultanée voltage-clamp enregistrements permettent la détection de photostimulation évoqués réponses synaptiques. Cartes d'entrée soit excitateurs ou inhibiteurs synaptiques du neurone cible sont générés par la numérisation du faisceau laser pour stimuler des centaines de sites potentiels présynaptiques. Ainsi, les LSP permet la construction de cartes détaillées des entrées synaptiques empiéter sur des types spécifiques de neurones inhibiteurs par des expériences répétées. Pris ensemble, la technique basée sur la photostimulation offre neuroscientifiques un outil puissant pour déterminer l'organisation fonctionnelle des locaux circuits corticaux.