Die plus-maze Maßnahmen Angst-ähnliches Verhalten bei Nagern. Es gibt zwei gegenüberliegenden geschlossenen und zwei gegenüberliegenden offenen Armen, ängstlich Nagetieren vermeiden offenen Armen. Der zentrale Bereich ist weder offen noch vollständig geschlossen, so hier verbrachte Zeit ist mehrdeutig und schwer zu interpretieren. Hier eine Modifikation der plus-maze-Protokoll eliminiert dieses Gebiet beschrieben.
Das Plus-Labyrinth wurde von den frühen Arbeiten von Montgomery abgeleitet. Er beobachtete, dass Ratten, die offenen Arme eines Labyrinths zu vermeiden neigten, lieber die beiliegenden diejenigen. Handley, Mithani und Datei<em> Et al.</em> Führte die ersten Untersuchungen auf das Plus-Labyrinth Design wir heute benutzen, und im Jahr 1987 veröffentlichte eine Lister Design für den Einsatz mit Mäusen. Verweilzeit auf und Einträge in die offenen Arme sind ein Index der Angst, die untere dieser Indizes ist die mehr Angst die Maus. Alternativ ist eine Maus, die den größten Teil seiner Zeit damit verbringt, in den geschlossenen Armen, als ängstlich eingestuft. Eines der Probleme des Plus-Labyrinth besteht darin, dass, während die Zeit auf, und Einträge in die offenen Arme ein ziemlich eindeutiges Maß der Angst ist, die Zeit in dem zentralen Bereich schwieriger zu interpretieren, obwohl hier verbrachte Zeit wurde klassifiziert als "Entscheidungsfindung". In vielen Tests zentralen Bereich Zeit ein erheblicher Teil der gesamten Testzeit. Schäfer<em> Et al.</em> Erzeugt eine geniale Konstruktion, um den zentralen Bereich, die sie als die "Null-Labyrinth" zu beseitigen. Doch obwohl von mehreren Gruppen verwendet wird, hat es noch nie so weit wie das Plus-Labyrinth angenommen. Im vorliegenden Artikel werde ich beschreiben eine Modifikation der Irrgarten Design, das beseitigt nicht nur den zentralen Bereich, aber auch Elemente aus anderen Angst Tests, wie der Hell-Dunkel-Box und Entstehung Tests. Es ist eine lineare Reihe von vier Gassen, die jeweils steigenden anxiogenen Eigenschaften. Es wurden ähnliche Ergebnisse mit dem Plus-Labyrinth im allgemeinen gegeben. Obwohl es vielleicht nicht empfindlicher als der Plus-Labyrinth (mehr Daten benötigt, bevor eine definitive Aussage zu diesem Punkt erreicht werden kann), bietet es eine nützliche Bestätigung plus-maze Ergebnisse, die nützlich wäre, wenn zum Beispiel nur eine einziges Beispiel eines mutierten Maus zur Verfügung, wie zum Beispiel in DEU-basierten Mutagenese-Programme.
Die erhöhten Plus-Labyrinth wurde von den frühen Arbeiten von Montgomery abgeleitet. 27. Er beobachtet, dass Ratten, die offenen Arme von einem Labyrinth zu vermeiden neigten, lieber die beiliegenden diejenigen. Handley und Mithani und Datei et al. 22,29 führte die ersten Untersuchungen auf das Plus-Labyrinth Design wir heute benutzen, und im Jahr 1987 veröffentlichte eine Lister Design für den Einsatz mit Mäusen 25. Es ist jetzt ein Standard-Assay für anxiolytische Behandlungen 23 und mehrere Protokolle wurden 36,24 veröffentlicht http://www.jove.com/video/1088 ; http://currentprotocols.com/protocol/ph0538 .
Die erhöhten Irrgarten besteht aus zwei gegenüberliegende offene und zwei gegenüberliegenden geschlossenen Arme sich an einer zentralen Bereich in Form eines + in der Draufsicht. Prozentual Zeit auf, und der Prozentsatz Eingaben in die offenen Arme ein Indexvon Angst-ähnliches Verhalten, die untere dieser Indizes, desto ängstlicher die Maus ist. Alternativ ist eine Maus, die den größten Teil seiner Zeit damit verbringt, in den geschlossenen Armen, als ängstlich eingestuft.
Factor Analyse hat gezeigt, dass, während Indizes der offenen Arm Aktivität Last stark auf einen Faktor wie Angst-ähnliches Verhalten bezeichnet und geschlossenen Arm Einträge spiegeln weitgehend die motorische Aktivität, die Grenzen zwischen den Faktoren, die nicht endgültig sind, auch andere Faktoren wie Exploration, Risikobewertung und Entscheidungsfindung umfassen das Profil des Verhaltens auf das Plus-Labyrinth, 12,32. Zeit im zentralen Bereich ist problematischer zu interpretieren, obwohl hier verbrachte Zeit wurde als "Entscheidungsfindung" 32 eingestuft worden. Obwohl Mäuse Großteil ihrer Zeit damit verbringen, in den geschlossenen Armen, und relativ wenig Zeit auf den offenen Armen, in vielen Studien viel Zeit im zentralen Bereich, wo die Arme kommen verbrachte. Obwohl diese Entscheidungsfindung 32 darstellen kann, ist es in te mehrdeutigrms von Angst-ähnliches Verhalten, wenn auch sehr ängstlich Mäusen zu erwarten, um den zentralen Bereich sowie die offenen Arme zu vermeiden. Ein früher Versuch, diese zweideutige zentralen Bereich zu beseitigen war, um ein kreisförmiges Labyrinth mit zwei geschlossenen Quadranten abwechselnd mit zwei offenen diejenigen 33 zu konstruieren. In diesem "Null-Labyrinth" ein Tier ist eindeutig in eine offene (anxiogenen) oder eine geschlossene (nonanxiogenic) Zone. Doch obwohl von mehreren Gruppen verwendet wird, hat es noch nie so weit wie das Plus-Labyrinth angenommen. In unserem Labor haben wir festgestellt, dass während der Plus-Labyrinth (und aufeinander Gassen) zeigte anxiolytische Effekte in Hippocampus-lädierten Ratten, wurden diese nicht auf einer Null-Labyrinth genau wie die von Schäfer et al konstruiert gesehen. 13
Die sukzessive Gassen Apparatur wurde daher mit dem primären Ziel der Beseitigung der zentrale Bereich des Plus-Labyrinth entwickelt. Zweitens wurden die Elemente von anderen Tests von Angst-ähnliches Verhalten eingebaut. Mit dem Start derTier in der geschlossenen Gasse 1 wurde eine Entstehung Komponente eingeführt, ähnlich wie in Stones "Ofenrohr"-Test 34. Die Farbe der Gassen von schwarz (Gasse 1) bis grau (Gasse 2) weiß (Gassen 3 und 4). Dieser stammt aus Beobachtungen, dass Mäuse bevorzugen dunkleren Bereichen, wie in der Hell-Dunkel-Box-Test 11 veranschaulicht. Die Wände der aufeinanderfolgenden Gassen auch langsam in der Höhe abnehmen, anders als in der plus-maze wo es einen abrupten Übergang zwischen hohen Wänden und ohne Wände. Die Breite der Gassen progressiv abnimmt, schrittweise Erhöhung der Exposition der Maus auf die erhöhte Lage des Labyrinths, in Abstimmung mit der allmählichen Abnahme der Wandhöhe. All diese Faktoren wurden in einem Versuch, die Empfindlichkeit des Tests zu erhöhen und umfassen ein breiteres Spektrum von Angst-ähnliches Verhalten als das Plus-Labyrinth macht eingearbeitet. Die sukzessive Gassen Apparat war ein Versuch, Halterung ein breiteres Spektrum von Angst-ähnliches Verhalten Grundlinien in der gleichen way, dass die vier Grundbedingungen der sozialen Interaktion Test als ursprünglich von Datei 17 Genehmigung Erkennung von subtilen Veränderungen der Angst-ähnliches Verhalten durchgeführt. Datei, in einer Studie über die Auswirkungen von Nikotin, sah nur Unterschiede in den beiden mittleren Angst-ähnliches Verhalten Bedingungen, nicht die höchsten oder niedrigsten 20.
Sowie das Plus-Labyrinth, ein weiteres weit verbreitetes Test von Angst-ähnliches Verhalten ist die Hell-Dunkel-Box 11. Ergebnisse aus der Hell-Dunkel-Box und der Plus-Labyrinth nicht immer miteinander korrelieren 35. Es wird nun angenommen, dass Angst-ähnliches Verhalten ist kein einheitliches Phänomen 19. Die sukzessive Gassen Test kann daher auch zu Ergebnissen anders als unter Verwendung der Hell-Dunkel-Box und möglicherweise auch von der Plus-Labyrinth, da es leicht unterschiedliche von diesen ist, jedoch ergibt sich zwischen der ersteren und letzteren zu erwarten im Großen und Ganzen ähnlich.
<p class="Jove_content"> Es hat sich gezeigt, dass wiederholtes Testen auf das Plus-Labyrinth die Art von Angst beobachtet verändert. 8,21 Es kann sein, dass die Exposition eines Tieres mit dem Plus-Labyrinth durch die aufeinanderfolgenden Gassen gefolgt beseitigt die Änderung der Art der Angst-ähnliches Verhalten gemessen werden, wenn die Plus-Labyrinth-Test wird wiederholt. Ein Beispiel dafür gesehen wurde, wenn die Plus-Labyrinth und aufeinander Gassen wurden verwendet, um medialen präfrontalen Kortex-lädierten und Kontroll-Mäusen in einem zeitlich ausgeglichen Weise testen. Die verletzten Mäuse zeigten deutlich niedrigere Angst-ähnliches Verhalten in beiden Arten von Geräten, unabhängig davon, ob Tests mit den aufeinanderfolgenden Gassen oder plus-maze ersten 15 aufgetreten. Es ist auch möglich, dass aufeinanderfolgende Verwendung der Plus-Labyrinth und aufeinander Gassen könnte die Empfindlichkeit auf Anxiolytika sehen, wenn die plus-maze-Test wird wiederholt erhalten. 18Ratten können auch auf eine größere Version der aufeinanderfolgenden Gassen getestet werden. Das Verfahren ist genau ter wie bei Mäusen.
Wie im Fall der Prüfung auf hyponeophagia der bisherigen allgemeinen Erfahrung der Tiere, abgesehen von erhöhten Irrgarten angstähnliches Verhalten Prüfung per se, kann das Ergebnis beeinflussen. 1,16
Im Ergebnis erzeugt der aufeinanderfolgenden Gassen Test im Allgemeinen ähnliche Ergebnisse wie die plus-maze bei Läsionen des Hippocampus-Komplex oder präfrontalen Kortex gemacht werden, aber weitere Arbeit erforderlich ist, um die Auswirkungen von Veränderungen in anderen Bereichen des Gehirns zu beurteilen gedacht, um Angst zusammenhängen -ähnliches Verhalten. Gelegentlich unterscheiden sich die Ergebnisse auf das Plus-Labyrinth deutlich von denen in den aufeinanderfolgenden Gassen, ein Beispiel dafür ist unsere Arbeit auf Kir6.2 KO-Mäusen 14. Wenn sie auf beiden Geräten getestet wurden, erlaubt es uns zu zeigen, dass KO-Mäusen nicht zeigen eine allgemeine Veränderung in Richtung Angst-ähnliches Verhalten, da sie mehr Zeit als Wildtyp-Mäusen auf den offenen plus-maze Arme (Es werden weniger Angst verbracht -Verhalten), aber mehr Zeit in der Gasse 1 der aufeinanderfolgenden Gassen (Es werden größere Angst-ähnliches Verhalten). Somit kann die kombinierte Verwendung der Plus-Labyrinth und aufeinander Gassen beseitigen falsch-positive oder falsch-negative Ergebnisse, da die beiden Tests, obwohlähnlich, sind nicht funktional identisch.
Wie in der plus-maze geht Hyperaktivität nicht auf nicht-selektiven Erhöhung der Anzahl der Gassen eingegeben führen. Studien haben gezeigt, dass die Organisation des Verhaltens bei Mäusen unabhängig von Aktivität 28 variiert. Medial septal lädierten Ratten, die gezeigt werden, deutlich hyperaktiv in einem separaten Test in photobeam Activity Monitoring Käfige wurden nur signifikant größer Einträge in Gassen 2 und 3;. Einträge in Gassen 1 und 4 waren nicht anders zu Kontrollen 5 So die weniger ängstlich septal lädierten Ratten wurden hin und her pendelt zwischen den beiden mäßig anxiogenen Bereichen der aufeinanderfolgenden Gassen, die zeigen, was das Gerät wurde entwickelt, um zu erkennen, dh ihre Position auf einem Spektrum von Angst. Hätten sie noch weniger ängstlich, wäre ein Anstieg in Kreuzungen zwischen Gassen 3 und 4 gesehen worden sein.
Andere Beweise, dass Hyperaktivität führt nicht zu einen Fehlalarm in der sukzessiven Gassen Test ist, dass Ratten, die mit dorsalen Hippocampus Läsionen hyperaktiv sind, aber nicht zeigen anxiolytische Effekte in den aufeinanderfolgenden Gassen 7. In einem ähnlichen Test mit linearen Vorrichtung, die schwarz-weiß-Gasse Test zeigen GluRA KO weiblichen Mäusen eher Angst-ähnliches Verhalten als die Kontrollen während die Männchen der Kontrollgruppe vergleichbar sind, aber beide Geschlechter deutlich hyperaktiv 3. Kir6.2 KO-Mäusen waren aktiver in ihre Käfige als Wildtyp-Mäusen zeigten aber les Angst in den aufeinanderfolgenden Gassen 14. Bemerkenswert ist, sprang 8 KO Mäusen oder fiel das Plus-Labyrinth, aber keiner von den aufeinanderfolgenden Gassen.
Eine Einschränkung der aufeinanderfolgenden Gassen Test, wie er hierin verwendet wird, ist, dass aufgrund der unterschiedlichen Farbe des Bodens, Video-Tracking-Systeme wäre schwierig zu bedienen. Allerdings könnte der Boden wohl eine einheitliche Farbe lackiert werden als Farbe ist nur einer der Faktoren, die in der Vorrichtung, die Angst erzeugt.
nt "> Die sukzessive Gassen Test ist jedoch unwahrscheinlich, um nicht von den Schwankungen Probleme mit ähnlichen ethologisch basierten Tests wie der plus-maze 10,23 assoziiert leiden, aber Testen einer Charge von Tieren auf beiden Aufgaben könnte helfen, einen schlüssig klären plus-maze-Test 30,31,37; ein Multiple-Test Ansatz kann Vorteile haben, wenn die Prüfung Angst-ähnliches Verhalten.The authors have nothing to disclose.
Der Wellcome Trust für die Bereitstellung von Open-Access-Finanzierung der Universität Oxford. Robert Deacon ist ein Mitglied der Oxford OXION Gruppe, die von Wellcome Trust Zuschuss WT084655MA finanziert.