Summary

إعداد مستمنع ماوس النخامية للتحريض التهاب النخامية الذاتية التجريبي

Published: December 17, 2010
doi:

Summary

يمكن استنساخها الذاتية التهاب النخامية في الفئران عن طريق حقن مستخرج من البروتينات النخامية الماوس.

Abstract

التهاب النخامية الذاتية هو التهاب مزمن في الغدة النخامية أو بسبب المناعة الذاتية مصحوبة 1. وقد جرت العادة على اعتبار أنه مرض نادر ولكن التقارير قد ازداد بشكل ملحوظ في السنوات الأخيرة. التهاب النخامية ، في الواقع ، لم يتطور بدرجة غير عادية باعتبارها "الآثار الجانبية" في علاج مرضى السرطان مع الأجسام المضادة التي تعمل على منع المستقبلات المثبطة وأعرب عن الخلايا اللمفية تي ، مثل CTLA – 4 2 ومستقبلات PD – 1. يمكن أن يتسبب التهاب النخامية الذاتية تجريبيا عن طريق حقن الفئران مع البروتينات النخامية مختلطة مع مساعد 3. في هذه المقالة الفيديو نظهر كيفية استخراج البروتينات من الغدد النخامية الماوس وكيفية التحضير لها في شكل مناسب لإحداث التهاب النخامية في الفئران SJL الذاتية.

Protocol

البروتوكول التجريبي الخطوة الأولى في هذا البروتوكول التجريبي هو جمع عدد كبير من الغدد النخامية الماوس. الخطوة الثانية هي التجانس الغدد إعداد استخراج البروتين. الخطوة الثالثة هي لاستحلب هذه البروتينات مع المزيج الزيتي. <p class="jove…

Discussion

على الرغم من حقيقة ان تم الابلاغ عن اول مريض مع التهاب النخامية الذاتية في عام 1962 4 ، والمسببة للأمراض الغدة النخامية autoantigens لا يزال يتعين تحديدها 5. نماذج حيوانية يمكن أن تكون مفيدة جدا لتحديد هذه autoantigens ، والمساعدة في اكتشاف المؤشرات الحيوية التي هي ترجم?…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

وأيد هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة منح DK080351 إلى الكمبيوتر.

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
15-ml Falcon tubes        
homogenization buffer        
phosphate buffered saline        
protease inhibitor cocktail        
Polytron homogenizer        
BCA assay   Pierce 23225  
Complete Freund’s Adjuvant (CFA)   Sigma F-5881  
Mycobacterium tuberculosis   Becton Dickinson 231141  
2.5 mL Hamilton gastight syringe        
22-gauge micro-emulsifying needle        

Riferimenti

  1. Caturegli, P., Newschaffer, C., Olivi, A., Pomper, M. G., Burger, P. C., Rose, N. R. . Autoimmune Hypophysitis Endocr Rev. 26, 599-614 (2005).
  2. Blansfield, J. A., Beck, K. E., Tran, K., Yang, J. C., Hughes, M. S., Kammula, U. S., Royal, R. E., Topalian, S. L., Haworth, L. R., Levy, C., Rosenberg, S. A., Sherry, R. M. Cytotoxic T-lymphocyte-associated antigen-4 blockage can induce autoimmune hypophysitis in patients with metastatic melanoma and renal cancer. J Immunother. 28, 593-598 (2005).
  3. Tzou, S. C., Lupi, I., Landek, M., Gutenberg, A., Tzou, Y. M., Kimura, H., Pinna, G., Rose, N. R., Caturegli, P. Autoimmune Hypophysitis of SJL mice: Clinical Insights from a New Animal Model. Endocrinology. 149, 3461-3469 (2008).
  4. Goudie, R. B., Pinkerton, P. H. Anterior hypophysitis and Hashimoto’s disease in a woman. J Pathol Bacteriol. 83, 584-585 (1962).
  5. Caturegli, P. Autoimmune hypophysitis: an underestimated disease in search of its autoantigen(s). J Clin Endocrinol Metab. 92, 2038-2040 (2007).

Play Video

Citazione di questo articolo
Tzou, S., Landek-Salgado, M. A., Kimura, H., Caturegli, P. Preparation of Mouse Pituitary Immunogen for the Induction of Experimental Autoimmune Hypophysitis. J. Vis. Exp. (46), e2181, doi:10.3791/2181 (2010).

View Video