וידאו זה מתאר אגר רך היווצרות מושבה assay כדי לבדוק את ההשפעות של מעכב אנזים PADI ו BB-Cl-amidine על גידולים סרטן השד במבחנה. בדיקה זו מאפשרת גם הערכה כמותית של פוטנציאל טרנספורמציה של תאים בהקשר של הפרעות גנטיות.
Protocol
1. הכנת 3% 2-הידרוקסיאתיל אגרוז לתוך בקבוק זכוכית נקי ויבש 100 מ”ל, להוסיף 0.9 גרם של 2-hydroxyethyl agarose (Agarose השביעי) ואחריו 30 מ”ל של מים מזוקקים. יש לחמם במיקרוגל את התערובת למשך 15 שניות ולהסתחרר בעדינות. חזור על שלב זה לפחות שלוש פעמים נוספות עד אבקת agarose מתמוסס לחלוטין. מובלעת אוטומטית …
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Materials
Zeiss Axiopot
Carl Zeiss Microscopy
1021859251
Inverted Microscope
Olympus
CKX41
DMEM/F-12
Lonza BioWhittaker
12-719F
HyClone Donor Equine Serum
Fisher Scientific
SH30074.03
Penicillin Streptomycin
Life Technologies
15140-122
2-Hydroxyethylagarose: Type VII, low gelling temperature
Soft Agar Colony Formation Assay: A Method to Test Effects of Novel Compounds on Cancer Cell Proliferation. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20226, doi: (2023).