Cette vidéo décrit une méthode de microinjection pour l’administration de cellules cancéreuses du sein dans l’espace périvitelline des embryons transgéniques de poisson zèbre. Après incubation, nous visualisons l’embryon sous un microscope fluorescent pour observer l’invasion, la diffusion et la métastase des cellules cancéreuses.
Protocol
1. Image et analyse du processus métastatique Recueillir plusieurs embryons anesthésiés à l’aide d’une pipette Pasteur à bout large et les transférer au fond de verre d’un plat en polystyrène. Retirer l’excès d’eau et garder une quantité limitée d’eau d’œuf. Manipulez l’embryon en position avec un outil de boucle de cheveux et placez un couvercle sur le dessus du verre. Utilisez un microscope confocal inversé en combinaison avec des objectifs d’…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Materials
Wide-tip Pasteur pipette (0.5-20 µL)
Eppendorf
F276456I
Confocal microscope
Leica
SP5 STED
Stereo microscope
Leica
MZ16FA
Tg (fli:EGFP) zebrafish strain
Kindly provided by Dr. Ewa SnaarJagalska (Institute of Biology, Leiden University, Leiden, The Netherlands)
zPDX-Analysis of Invasiveness: Investigating Invasive Behavior of Metastatic Cancer Cells in Zebrafish Embryo Xenografts. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20219, doi: (2023).