Organ Şartlandırılmış Ortam: Metastatik Kanser Çalışmaları İçin Hasat Edilen Organ Hücrelerinden Ortam Üretmek
Published: April 30, 2023
Abstract
Kaynak: Piaseczny, M.M., vd. Organ Şartlı Medya üretimi ve Meme Kanseri Metastatik Davranışı Üzerindeki Organa Özgü Etkilerin İncelenişi için Uygulamalar. J. Vis. Exp.(2016).
Bu videoda, fare karaciğerinden türetilen organ şartlandırılmış bir ortam oluşturma yöntemi açıklanmaktadır. Bu model sistem, organdan türetilmiş çözünür faktörleri ve bunların kanser hücrelerinin organ tropikliği ve metastatik davranışları üzerindeki etkilerini tanımlamak ve incelemek için kullanılabilir.
Protocol
1. Akciğer ve Beyin Şartlı Medyanın Üretimi Steril bir doku kültürü kaputunda, organlardaki artık kanı çıkarmak ve kan içeren PBS’yi aspire etmek için akciğer veya beyin içeren PBS tüplerini üç kez ters çevirin. Kan kanıtı olmadan çözelti net görünene kadar taze soğuk PBS ile tekrarlayın. Akciğerleri ve beyinleri ayrı 60 mm2 cam petri kabına yerleştirin. İki steril neşter bıçağı, kıyma akciğerleri veya beyin kullanarak, doku parçaları yaklaş?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Materials
| 1x Phosphate-buffered saline | ThermoFisher Scientific | 10010-023 | Keep sterile |
| 60 mm2 glass petri dishes | Sigma-Aldrich | CLS7016560 | Keep sterile |
| DMEM:F12 | Life Technologies | 21331-020 | Warm in 37 °C water bath before use, keep sterile |
| Penicillin-Streptomycin (10,000 U/ ml) | Life Technologies | 15140-122 | Keep sterile |
| 50 ml conical tubes | Thermo Scientific (Nunc) | 339652 | Keep sterile |
| 0.22 μm syringe filters | Sigma-Aldrich | Z359904 | Keep sterile |
| 6-well tissue culture plates | Thermo Scientific (Nunc) | 140675 | Keep sterile |
| Scalpel blades | Fisher Scientific | S95937A | Keep sterile |
Citazione di questo articolo
Organ Conditioned Medium: Generating Medium from Harvested Organ Cells for Metastatic Cancer Studies. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20218, doi: (2023).