Drosophila In Vivo Imagerie calcique : une méthode d’imagerie fonctionnelle de l’activité neuronale
Published: April 30, 2023
Abstract
Source : Hancock, C. E., et coll. In Vivo Optical Calcium Imaging of Learning-Induced Synaptic Plasticity in Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2019).
Cette vidéo décrit l’imagerie in vivo de calcium dans les neurones de Drosophila utilisant GCaMP. Le clip de protocole en vedette montre comment enregistrer les changements dans la fluorescence GCaMP des neurones du corps champignon au cours d’une expérience de conditionnement olfactif.
Protocol
Ce protocole est un extrait de Hancock et coll., In Vivo Optical Calcium Imaging of Learning-Induced Synaptic Plasticity in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2019). 1. Imagerie in vivo calcium Utilisez un microscope multiphoton équipé d’un laser infrarouge et d’un objectif d’immersion dans l’eau (voir tableau des matériaux),installé sur une table isolée par vibration. Pour la visualisation des indicateurs de calcium à ba…
Materials
| 1-Octen-3-ol | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA | O5284 | Chemical used as odorant |
| 3-Octanol | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA | 218405 | Chemical used as odorant |
| 4-Methylcyclohexanol | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA | 153095 | Chemical used as odorant |
| Bandpass filter for EGFP (525/50 nm) | Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany | ||
| Mineral oil | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA | M8410 | Used as diluent for odorants |
| Mode-locked Ti-Sapphire laser Chameleon Vision 2 | Coherent Inc., Santa Clara, CA, USA | Tunable infrared femtosecond laser | |
| Multiphoton Microscope LSM 7MP equipped with BiG detectors | Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany | Multiphoton microscope, multiple companies provide similar devices. | |
| Plan-Apochromat 20x (NA = 1.0) water immersion objective | Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany | 421452-9900-000 | Objective W "Plan-Apochromat" 20x/1.0 DIC M27 70mm |
| Visual Basics of Applicatons (VBA) software to receive a trigger from the odor-delivery device and the electric shock application device (power supply) to interact with the ZEN software from Zeiss that controls the microscope | Custom-written and available upon request | n.a. | n.a. |
Citazione di questo articolo
Drosophila In Vivo Calcium Imaging: A Method for Functional Imaging of Neuronal Activity. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20129, doi: (2023).