드로소필라 인 비보 칼슘 이미징: 신경 활동의 기능적 이미징 방법
Published: April 30, 2023
Abstract
출처: 핸콕, C. E., 외. 드로소필라 멜라노가스터에서학습 유도 시냅스 가소성의 생체 내 광학 칼슘 이미징. J. 비스 익스펙. (2019).
이 비디오는 GCaMP를 사용하여 Drosophila 뉴런에서 생체 내 칼슘 이미징에서 설명합니다. 추천 프로토콜 클립 후각 컨디셔닝 실험 중 버섯 신체 뉴런에서 GCaMP 형광의 변화를 기록하는 방법을 보여줍니다.
Protocol
이 프로토콜은 핸콕 외에서 발췌, 드로소필라 멜라노가스터에서 학습 유도 시냅스 가소성의생체 내 광학 칼슘 이미징, J. Vis. Exp. (2019). 1. 생체 내 칼슘 이미징 적외선 레이저와 진동 격리 테이블에 설치된 물 침지 목표(재료 표참조)가 장착된 다광 현미경을 사용합니다. GFP 기반 칼슘 지표의 시각화를 위해 레이저를 920 nm의 난분 파장?…
Materials
| 1-Octen-3-ol | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA | O5284 | Chemical used as odorant |
| 3-Octanol | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA | 218405 | Chemical used as odorant |
| 4-Methylcyclohexanol | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA | 153095 | Chemical used as odorant |
| Bandpass filter for EGFP (525/50 nm) | Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany | ||
| Mineral oil | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA | M8410 | Used as diluent for odorants |
| Mode-locked Ti-Sapphire laser Chameleon Vision 2 | Coherent Inc., Santa Clara, CA, USA | Tunable infrared femtosecond laser | |
| Multiphoton Microscope LSM 7MP equipped with BiG detectors | Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany | Multiphoton microscope, multiple companies provide similar devices. | |
| Plan-Apochromat 20x (NA = 1.0) water immersion objective | Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany | 421452-9900-000 | Objective W "Plan-Apochromat" 20x/1.0 DIC M27 70mm |
| Visual Basics of Applicatons (VBA) software to receive a trigger from the odor-delivery device and the electric shock application device (power supply) to interact with the ZEN software from Zeiss that controls the microscope | Custom-written and available upon request | n.a. | n.a. |
Citazione di questo articolo
Drosophila In Vivo Calcium Imaging: A Method for Functional Imaging of Neuronal Activity. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20129, doi: (2023).