Drosophila Mannelijke accessoire klier dissectie: een methode om secundaire cellen te isoleren
Published: April 30, 2023
Abstract
Bron: Immarigeon, C., et al. A FACS-based Protocol to Isolate RNA from the Secondary Cells of Drosophila Male Accessory Glands. J.Vis. Exp. (2019).
Deze video beschrijft de dissectie van de accessoire klieren van mannelijke vliegen en toont een voorbeeld waarin de geïsoleerde klier zal worden gescheiden in een eencellige suspensie.
Protocol
Dit protocol is een fragment uit Immarigeon et al., A FACS-based Protocol to Isolate RNA from the Secondary Cells of Drosophila Male Accessory Glands, J. Vis. Exp. (2019). 1. Oplossingen en materiaalvoorbereiding Bereid de volgende oplossingen voor. Prepare Serum Supplemented Medium (SSM): Schneider’s Drosophila medium aangevuld met 10% warmte-inactief foetale runderserum en 1% Penicilline-Streptomycine. Berei…
Materials
| Binocular microscope for dissection | |||
| Binocular with light source for GFP | |||
| Bunsen | |||
| Plastic microtubes 1.5 mL | Eppendorf | ||
| Fine dissection forceps | |||
| Foetal bovine serum | Gibco | 10270-106 | heat inactivated prior to use |
| Glass dishes for dissection | |||
| Ice bucket | |||
| P1000 | Gilson | ||
| P20 | Gilson | ||
| P200 | Gilson | ||
| Papain | 50U/mL stock | ||
| PBS | home made | ||
| Penicillin-Streptomycin | Gibco | 15070-063 | |
| Schneider’s Drosophila medium | Gibco | 21720-001 | |
| Tipone 1250 μL graduated tip | Starlab | S1161-1820 | |
| Tipone 200 μL bevelled tip | Starlab | S1161-1800 | |
| TrypLE Express Enzyme | Gibco | 12604013 |
Citazione di questo articolo
Drosophila Male Accessory Gland Dissection: A Method to Isolate Secondary Cells. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20100, doi: (2023).