Questo articolo descrive una tecnica per rimuovere il puparium di un insetto mantenendo intatta la pupa interna e quindi adatta per ulteriori indagini. Il protocollo di esempio mostra la procedura con Drosophila guttifera; tuttavia, questa tecnica è applicabile ad altre specie di Drosophila.
Protocol
Questo protocollo è un estratto da Fukutomi et al., Methods for Staging Pupal Periods and Measurement of Wing Pigmentation of Drosophila guttifera, J. Vis. Exp. (2018). 1. Rimozione del puparium NOTA Le pupe di Drosophila sono coperte da una struttura chiamata puparium. Un insetto di Muscomorpha (mosche) non perde la sua cuticola larvale alla pupa; invece, indurisce la cuticola dopo …
Representative Results
Figura 1. Illustrazione della rimozione del puparium. (A) Posizionare un lato ventrale della pupa su un pezzo di nastro a doppia aspetto. Rimuovere la parte anteriore del puparium. (B) Rompere il puparium con le flesse dal lato ventrale. (C) Dopo aver rotto il puparium, eserti la pupa usando un pennello.
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Materials
Drosophila guttifera
The Drosophila Species Stock Center at the U.C. San Diego
15130-1971.10
Drosophila guttifera, a fruit fly species used in this article
NICETACK double sided tape
Nichiban
NW-15SF
Double sided tape, for removing puparium
Dumont #5 forceps
Fine Science Tools
11252-20
Forceps, for removing puparium
Van Gogh VISUAL Paint brush
Talens Japan
GWVR-#5/0
Paint brush, for removing puparium
Stereomicroscope
Olympus
SZX16
Stereomicroscope, for morphological observation
Digital camera
Olympus
DSE-330-A
Digital camera, for imaging
Falcon standard tissue culture dish
Corning
353002
Plastic Petri dish (diameter 60 mm x height 15 mm)