Durchführung und Abwicklung der FNA Anterior Fat Pad für Amyloid

Einführung Systemische Amyloidose ist eine sehr variable Krankheit, die extrazelluläre Ablagerung von verschiedenen Proteinen, die gemeinsam als Amyloid bezeichnet bezieht. Deposition dieser Amyloid-Fibrillen mit Beta gefalteten Konfiguration führt zu verschiedenen klinischen Präsentationen in Abhängigkeit von der betroffenen Organe. Die meisten klinisch relevanten Manifestationen der systemischen Amyloidose werden zur Kenntnis genommen, wenn ein Eingreifen von kritischen Organen wie Herz, Leber und / oder Niere. Historisch gesehen, wären diese beteiligt Organe biopsiert, um das Vorhandensein von Amyloid zu demonstrieren. Diese mäßig invasive Verfahren durchgeführt ein erhebliches Risiko, einschließlich Blutungen. Fettpolster Aspiration seither gezeigt, dass eine zuverlässige und nichtinvasive Methode zum Nachweis von Amyloid in der systemischen Amyloidose 1 bereitzustellen. Dieses Verfahren ist im Wesentlichen vergleichbar mit der Fettabsaugung des subkutanen Fettgewebes in der vorderen Bauchwand unter örtlicher Betäubung zu fibroadipose Gewebe für die Bewertung kaum Amyloid-Ablagerungen in den kleinen Blutgefäßen Wände 2 abzurufen. Die am häufigsten verwendeten Methode zur Identifizierung Amyloid im Gewebe bleibt die charakteristische apfelgrüne Doppelbrechung Muster gesehen, wenn Kongorot gefärbten Schnitten unter einem Polarisationsmikroskop 3 sind visualisiert. Wenn Fettpolster Aspiration durchgeführt wird, kann Kongo rote Flecken auf beiden direkten verschmiert Dias oder Zellenblock Vorbereitungen der angesaugten Fettgewebe erfolgen. Allerdings haben Patienten in frühen Stadien der Amyloidose spärliche Amyloid-Ablagerungen, die stark reduziert die Empfindlichkeit des Kongorot gefärbte Zelle blockieren Abschnitten 4,5. Ultrastrukturelle Auswertung der Fettpolster saugt mittels Elektronenmikroskopie hat eine bessere Reproduzierbarkeit und verbesserte Empfindlichkeit 4. Daher ist es empfehlenswert, alle Fettpolster saugt sowohl für Vorbereitung einer Zelle blockieren und für die Durchführung der Elektronenmikroskopie 2 Einreichen. Fettpolster Anspruch ist relativ kostengünstig und nicht-invasive Methode zur Gewinnung von Gewebe systemische Amyloidose zu diagnostizieren. Dieser Artikel beschreibt, Fettpolster Aspiration Verfahren zusammen mit Einzelheiten über Probenaufbereitung bis Probe für beide Kongorotfärbung und ultrastrukturelle Auswertung mittels Elektronenmikroskopie einzureichen. In diesem Video zeigen wir, diese reproduzierbar und einfaches Verfahren, um eine optimale Diagnose-Material abrufen. 1. Durchführen der FNA der Anterior Fat Pad A. Betäubung der lokalen Bereich (Abb. 1 & 2) Mit Alkoholtupfer oder die Haut Reinigungsmittel von einer bestimmten Institution bevorzugt, reinigen Sie die Haut an den unteren Quadranten Bereich des Bauches lateral der Mittellinie und unterhalb des Nabels (Abbildung 1). Markieren Sie eine rautenförmige Fläche ca. 2 x 2 Zoll, wie in Abbildung 1 mit einem Markierstift gezeigt. Saugen Sie ca. 10 ml 1% Lidocain mit einer 18G Nadel. Bringen Sie einen 25G 1 ½-Zoll-Nadel auf die Spritze. Entfernen Sie eventuell eingeschlossene Luft durch Antippen des aufrechten Spritze beim Drücken Sie den Kolben, bis die Flüssigkeit abgegeben wird und keine Luftblasen vorhanden sind. Anesthetize entlang der Grenzen der rautenförmigen Fläche bereits markiert, wie in Abbildung 2 dargestellt. Starten Sie, indem Sie die 25G-Nadel unter die Haut am Punkt A und vorsichtig die Nadel subkutan Punkt X. Ziehen wieder auf den Spritzenkolben, um sicherzustellen, dass Sie sich nicht innerhalb eines Gefäßes. Dann langsam den Kolben zu infiltrieren bis zu 2,5 ml Lidocain (ca. ¼ der Lidocain in 10 ml-Spritze), während die Nadel auf A, ohne dass die Nadel aus der Haut am Punkt A (Abbildung 2a3) come point. Mit der Nadel noch unter der Haut verändern Richtung Punkt Y (Abbildung 2a4) und drücken Sie die Nadel subkutan zu Punkt Y (Abb. 2b1). Nach wie vor bestätigen, dass die Nadel nicht in ein Gefäß und verzichten etwa 2,5 ml Lidocain, während langsam die Nadel durch den Punkt A (Abb. 2b3 durch 2b4). Wiederholen Sie ähnliche Schritte ab Punkt B und Abgabe Lidocain subkutan von den Punkten B, X und B auf Y (Abbildung 2C1 durch 2D4). Verhindern Blutungen aus den Stachel A und B von der Firma Anwendung von sterilen gauge Stück. Sie können nun überprüfen, dass das Gebiet betäubt wird durch leichtes Berühren der Haut innerhalb der narkotisierten rautenförmigen von Spitze / Ecke Baumwollgaze Stück, durch den Vergleich mit benachbarten nicht narkotisierten Haut. B. Performing Fettpolster Aspiration (Abbildung 3) (Anwendung von örtlicher Betäubung vor der Leistung der Fettpolster Aspiration kann umgangen werden, abhängig von der regionalen und individuellen Vorlieben. Ordnungsgemäß durchgeführt FNAB Verfahren für die vordere Fettpolster Aspiration in einem Prick abgeschlossen werden kann. Je nach der Schmerzgrenze des einzelnen Patienten , Manövrieren von 18G Nadel hin und her in das subkutane Fettgewebe ist relativ distreszu singen. Die Betäubung hier beschriebene Methode wird erreicht, in nur zwei Stiche mit 25G Nadel und vermeidet die Schmerzen mit einer verbesserten Toleranz gegenüber dem Verfahren.) Montieren 18G 1 ½-Zoll-Nadel auf eine 10 ml Spritze. Montieren Sie die Spritze-Nadeleinheit in die Spritze greifen ("FNAB Griff / gun") für die ordnungsgemäße Anwendung und Freisetzung von Vakuum. Führen Sie die Spitze der Nadel in das subkutane Fettgewebe innerhalb der gereinigt und betäubt rautenförmigen Fläche (Abbildung 3a). Komplett zurückziehen den Kolben der Spritze mit der Nadel in das subkutane Gewebe eingefügt werden, um Vakuum (Abbildung 3b) zu generieren. Pflegen Sie die Vakuum-und Handlungsspielraum der Nadel hin und her in verschiedene Richtungen in das subkutane Fettgewebe (Abbildung 3c durch 3i). Jeder Strich muss so lange wie möglich mit der Länge der Nadel, ohne dass die Nadel aus der Haut kommen ausgewählt. Maximale Abtastrate wird durch die Richtung ändern mit jedem Schlag (Abb. 3i) erreicht. Es ist wichtig, um die Richtung der Nadel tangential zur Serosa und parallel zur Hautoberfläche zu vermeiden Punktion der Bauchhöhle zu halten. Die fibroadipose Gewebe sammelt sich in der Spritze. Sobald genügend fibroadipose Gewebestücke (bis zu 1 mL der Fragmente reiche Blut vermischt Probe) abgerufen werden, das Vakuum vollständig und entfernen Sie die Nadel (Abb. 3k). Lassen Sie den Patienten oder die Assistentin festen Druck auf den Bereich der Verfahrens mit einem Pad aus Gaze zu Blutaustritt zu verhindern. 2. Verarbeitung von Proben Legen Sie mindestens 5-6 Fragmente fibroadipose Gewebe in Glutaraldehyd-Lösung für die Elektronenmikroskopie (Abbildung 4B). Abhängig von der institutionellen Protokoll, kann ein paar Abstrichen der fibroadipose Gewebestücke durch Verteilung zwischen zwei Folien (Abbildung 4A) hergestellt werden. Das verbleibende Material wird zur Gerinnung in der Spritze (dies kann 5-7 Minuten dauern, je nach der Gerinnungszeit) (Abbildung 4C) erlaubt. Saugen Sie 10% Formalin in die Spritze so, dass die geronnene fibroadipose Gewebematerial aus der Wand der Spritze und frei schwebende (Abb. 4C2) wird verdrängt. Entfernen Sie den Kolben aus der Spritze (Abb. 4C3) und übertragen Sie die geronnene fibroadipose Gewebe in der 10%-Formalin-Container aus dem offenen Ende der Spritze gegenüber der Düse Ende (Abb. 4C4). Beschriften Sie die Behälter entsprechend und senden Sie das Glutaraldehyd für Elektronenmikroskopie und der Formalin für H & E Bereich und Kongorot-Färbung für die Auswertung unter Polarisationsmikroskopie. Wenn Abstrichen bereit sind, können sie nach dem Protokoll der einzelnen Labor verarbeitet werden. Abbildung 1. Bereich zu sein für FNAB der vorderen Fettpolster betäubt. Abbildung 2. Betäubung der Umgebung. Abbildung 3. Performing FNAB der vorderen Fettpolster. Abbildung 4. Die Verarbeitung des vorderen Fettpolster absaugen zu Labor zum Nachweis von Amyloid-Ablagerungen eingereicht werden. 3. Repräsentative Ergebnisse Abbildung 5. Amyloid in der Wand der kleinen Blutgefäße in fibroadipose Gewebefragmente. Fibroadipose Gewebe wurde in Formalin verarbeitet, Paraffin eingebettet, gefärbt mit Kongorot, und untersucht durch polarisierende Lichtmikroskopie. Amyloid in der Wand der kleinen Blutgefäße zeigt, Apfelgrün Doppelbrechung (weißer Pfeil). Abbildung 6. Tissue fehlt Amyloidose. Die Apfelgrün Doppelbrechung ist in Geweben von einem anderen Patienten fehlen, ohne Amyloidose. Blau Doppelbrechung (weißer Pfeil) von Kollagenfasern, sind in der Regel in fast allen Proben anwesend. Abbildung 7. Fibrillen im Einklang mit Amyloid in der Gefäßwand. Elektronenmikroskopische Aufnahme von geraden, nicht verzweigt, 8-10 nm Durchmesser Fibrillen durch Amyloid in der Gefäßwand gebildet zufällig verstreut.