الأداء ومعالجة FNA من الدهون الأمامية لوحة اميلويد
Summary
الدهون تطلع سادة هو المفضل ، نهج التكلفة مينيملي ، ومنخفضة بالمقارنة مع الطرق الأخرى للكشف عن اميلويد لتشخيص الداء النشواني النظامية. هذه المقالة الفيديو يوضح الخطوط العريضة لتنفيذ الإجرائية الدهون تطلع سادة مع معالجة مناسبة من العينة لنتائج التشخيص الأمثل.
Abstract
تاريخيا ، تم تنفيذها القلب ، الكبد ، والكلى لإثبات الخزعات الودائع اميلويد في الداء النشواني. منذ السريرية لهذا المرض هو متغير جدا وغير محددة ، والمخاطر المرتبطة بها من هذه الخزعات هي كبيرة جدا بالنسبة للمحصول التشخيص. المواقع الأخرى التي لديها مخاطر أقل خزعة ، مثل الجلد أو اللثة ، هي أيضا الغازية نسبيا وباهظة الثمن. بالإضافة إلى ذلك ، قد تكون هذه الخزعات لا نملك دائما الودائع اميلويد كافية لإثبات التشخيص. وقد أثبتت الدهون تطلع منصة علاقة سريرية جيدة مع انخفاض التكلفة والحد الأدنى من الاعتلال. ومع ذلك ، لا توجد بروتوكولات موحدة لتنفيذ هذا الإجراء أو يستنشق تجهيز العينة ، الأمر الذي يؤدي إلى نتائج وnonreproducible متغير. الطريقة الأكثر استخداما للكشف عن اميلويد في الأنسجة هو الانكسار التفاح الأخضر على أبواب الحمراء الكونغو الملون باستخدام المجهر الاستقطاب. هذا الأسلوب يتطلب إعداد الخلية كتلة من المواد يستنشق. للأسف ، المرضى الذين يلتمسون العلاج في مرحلة مبكرة من الداء النشواني وكميات ضئيلة من الأميلويد مما يقلل كثيرا من حساسية الكونغو الحمراء الملطخة المقاطع كتلة خلية aspirates منصة الدهون. لذا ، ينبغي استغلال التقييم التركيبية لوحة aspirates الدهون عن طريق المجهر الإلكتروني ، نظرا لحساسيتها للكشف عن زيادة اميلويد. هذه المقالة يوضح إجراءات بسيطة وقابلة للتكرار لأداء اللوحة الأمامية تطلع الدهون للكشف عن اميلويد باستخدام كلا تلوين أحمر الكونغو أبواب الزنزانات والمجهر الإلكتروني لتحديد التركيبية.
Protocol
Discussion
وعادة ما يتحقق تشخيص الداء النشواني مع خزعة من أنسجة الأعضاء المصابة مثل الكلى والكبد ، و / أو القلب. هذا النهج لم تسفر تشخيصية عالية ، ومع ذلك ، والغازية قد تترافق مع مضاعفات منها نزيف 2. ويفضل المستقيم ، لثوي ، والخزعات نخاع العظم لتشخيص المرض مع اقتراب نسبيا أقل الغازية في 1960s 6،7،8. وأفيد في البطن تطلع منصة الدهون في عام 1973 باعتبارها آمنة والداخلي ، مينيملي بسيطة ، وأقل تكلفة لتشخيص الداء النشواني أنسجة النظامية 1. ومع ذلك ، لا تفاصيل للإجراءات ونهج لمعالجة العينة استرجاع ذكرت متماسك. هذا الفيديو ، والمادة ووصف الإجراء خطوة بخطوة.
هذا النهج للكشف عن التطلع لوحة اميلويد في الدهون ، وعلى نحو مماثل ، هي أيضا ليست موحدة تماما مع عدد قليل من الدراسات المقارنة وتقييم المناهج المختلفة 1،5،6،7،8. تقييم الأمامي aspirates منصة الدهون مع تلوين أحمر الكونغو أقل حساسية مع انخفاض استنساخ بين الفاحصين وخاصة في الحالات المبكرة من الداء النشواني مع الودائع اميلويد شحيحة 5. المناعية على أداء الفورمالين أقسام البارافين جزءا لا يتجزأ من كتلة الخلايا الثابتة وتم الإبلاغ عن مضان أحمر الكونغو التي أجريت على الخلايا مسحات لتحسين حساسية التشخيص 9،10. المجهر الإلكتروني يحسن من الكشف والتعرف على الألياف اميلويد شحيحة في جدران الأوعية الدموية الصغيرة في أنسجة ليفي شحمي في aspirates منصة الدهون 4 ، 5. استنادا إلى هذه المعلومات ، توضح هذه المقالة تجهيز العينات لإعداد كتل الخلية (لتقييم الكونغو الحمراء الملطخة المقاطع زنزانة تحت المجهر لاستقطاب التشخيص التفاح الأخضر الانكسار ، وكذلك لالمناعية كما هو مبين) والمجهر الإلكتروني. ومع ذلك ، اعتمادا على النهج المحدد لتقييم العينة عن اميلويد ، قد تعرض لتشويه إعداد الخلايا ، الخلية كتلة التحضير والتجهيز للفحص المجهري الإلكترون. بعض المختبرات إجراء اختبارات على مسحات محضرة من نسيج ليفي شحمي شظايا يستنشق وملون بلون أحمر الكونغو لدراسة 10 مضان.
عموما في وقت متأخر من الداء النشواني ، قد المجهر الضوئي المجهري مع أحمر الكونغو الاستقطاب يكون كافيا ، ولكن في المراحل المبكرة من المرض تلوين أحمر الكونغو مع استقطاب المجهري على أبواب الزنزانات أقل حساسية وموثوقة لوحة aspirates الدهون 4،5،11 . ويمكن استخدام بقع الخاصة الأخرى بما في ذلك T Thioflavin مع قيود مماثلة. مناهج أخرى للكشف عن اميلويد تشمل تقييم مسحات نضح لاميلويد مع المجهري أحمر الكونغو الاستقطاب ومضان 10. تجربتنا في هذا الأسلوب هو أقل دقة. تقييم الأوعية الدموية في الدهون لوحة اميلويد بواسطة المجهر الإلكتروني يتغلب على هذه القيود 4،11. وقد أبلغ توصيف مزيد من اميلويد بواسطة المجهر immunoelectron 12 ، ولكن هذه الطرق قد لا تكون متاحة على نطاق واسع في وضع الرعاية غير العالي.
ويمكن تصنيف الإبر المستخدمة لتنفيذ الإجراءات وفقا لتطلع على قياس الأحجام في الدقيقة (21 – 25G) ، والمتوسطة (18 20G) ، وكبيرة (على سبيل المثال – 14G) 11. وقد تم الإبلاغ عن تطلعات الأمامي وسادة من الدهون التي سيتم تنفيذها باستخدام مقاييس متفاوتة تراوحت بين المتوسطة (من 18 إلى 20G) إلى 2،10 (21 إلى 22G) غرامة. ويستنشق معظم الآفات الشامل مع الإبر قياس أدق (مثل 25G) للحصول على الخلايا مسحات جيدة مع يمر إضافية مع الإبرة أوسع مقياس (مثل 18G) لاسترداد عينة إضافية للكتل الخلية.
خلال اللوحة الأمامية تطلع الدهون والأنسجة ليفي شحمي متماسكة لا نضح جيدا مع الإبر الدقيقة. كتلة الخلية إعداد والمجهر الإلكتروني هامة لتقييم جدران الأوعية الدموية الصغيرة في أنسجة شظايا ليفي شحمي في aspirates الدهون. ينصح الإبر أوسع مقياس (مثل 18G) لانتاج مواد كافية التشخيص 2،10. وهذا الإجراء هو الذي يضاهي FNAB التقليدية ، ويشار إلى منصة الدهون الطموح كما FNAB حتى ولو يمكن استخدام الإبر أوسع مقياس لأداء ذلك 5.
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
نشكر السيدة بوني Phetteplace ، RN للمساعدة خلال الرسوم البيانية الفيديو المظاهرة FNAB الداخلي.
Materials
Alcohol swabs, gauze pads, marking pen, 10 mL syringes x2, 1% lidocaine (local anesthetic- If lidocaine is used alone, it causes an initial burning sensation after instillation. This can be prevented by using a 1:1 mixture of 1% lidocaine and 1% sodium-bi-carbonate), 18 gauge(G) 1 ½ inch needles x2 (for performing FNAB), 25G 1 ½ inch needle (for injecting local anesthetic), FNA syringe holder (“gun”), bandage, vial of glutaraldehyde (for electron microscopy), and biopsy container of 10% formalin.
Riferimenti
- Westermark, P., Stenkvist, B. A new method for the diagnosis of systemic amyloidosis. Arch Intern Med. 132, 522-523 (1973).
- Devata, S., Hari, P., Markelova, N., Li, R., Shidham, V. B. Detecting AL Amyloid in Abdominal fat pad aspirates: Is Congo red sufficient?. Amyloid. , .
- Merlini, G., Bellotti, V. Molecular Mechanisms of Amyloidosis. New Engl J Med. 349 (6), 583-596 (2003).
- Shidham, V. B., Kumar, N., Cihlar, K., Varsegi, G., Markelova, N., Li, R., Hari, P. Fine needle aspiration of abdominal fat pad for diagnosis of early amyloidosis: How can the clinical role of the test be improved?. Mod Pathol. 20, 1A-380A (2007).
- Halloush, R., Lavrovskaya, E., Mody, D., Lager, D., Truong, L. D. Diagnosis and typing of systemic amyloidosis: The role of abdominal fat pad fine needle aspiration. Cytojournal. 6, 24-24 (2010).
- Hazenberg, I. I., Rijswijk, C. V. a. n., H, M. Diagnostic Accuracy of Subcutaneous Abdominal Fat Tissue Aspiration for Detecting Systemic Amyloidosis and Its Utility in Clinical Practice. Arthritis Rheum. , 54-546 (2006).
- Guy, C. D., Jones, C. K. Abdominal fat pad aspiration biopsy for tissue confirmation of systemic amyloidosis: specificity, positive predictive value, and diagnostic pitfalls. Diagn Cytopathol. 24, 181-185 (2001).
- Westermark, P. Diagnosing Amyloidosis. Scand J Rheumatol Suppl. 24, 327-329 (1995).
- Linke, R. P. Highly Sensitive Diagnosis of Amyloid and Various Amyloid Syndromes Using Congo Red Fluorescence. Virchow Arch. 436, 439-448 (2000).
- Giorgadze, T. A., Shiina, N., Baloch, Z. W., Tomaszewski, J. E., Gupta, P. K. Improved detection of amyloid in fat pad aspiration: an evaluation of Congo red stain by fluorescent microscopy. Diagn Cytopathol. 31, 300-306 (2004).
- DeMay, R. M. Fine Needle Aspiration Biopsy. The Art & Science of Cytopathology. , 465-46 (1996).
- Arbustini, E., Vrga, L., Concardi, M., Pallandini, G., Obici, L., Merlini, G. Electron and Immuno-electron Microscopy of Abdominal Fat Identifies and Characterizes Amyloid Fibrils in Suspected Cardiac Amyloidosis. Amyloid. 9, 108-114 (2002).
