本协议描述了识别和解剖成年斑马鱼的器官的过程。
在过去的20年中,斑马鱼已成为一个强大的模式生物,为了解脊椎动物的发育和疾病。虽然是广泛的胚胎和幼虫的实验分析和形态一直都有详细记载,成年斑马鱼的解剖和发展成人的结构和器官的研究说明,连同与成人工作的技术,所缺乏的。幼虫机关接受在其整体结构,形态,解剖位置,并在向成年过渡的幼虫的重大变化。从外部看,透明的幼虫发展其特点成人条纹色素模式和配对腹鳍,而在内部,机关经过大量增长和重塑。此外,bipotential性腺原基发展成为无论是睾丸或卵巢。该协议确定成人的许多器官和演示脑,性腺,肠胃系统,心脏,和成年斑马鱼的肾脏解剖的方法。可用于原位杂交,分子生物学技术,组织学,免疫组织化学法提取RNA,蛋白质分析,和其他解剖器官。该协议将有助于在斑马鱼在扩大研究范围,包括幼虫器官的重塑,成人器官系统的成年和其他调查机关的具体形态发生。
The authors have nothing to disclose.
这项工作是由美国国立卫生研究院授予R01 HD050901 MCM和美国癌症协会博士后奖学金#PF – 05 – 041 – 01 – DDC到TG的支持。
Reagents:
0.2% Tricaine (ethyl 3-aminobenzoate) 200 mg tricaine powder 97.9 ml DD water ~1 ml 1 M Tris (pH 9) Adjust pH to 7.0
Phosphate buffered saline (PBS) 4.0 g NaCl 0.1 g KCl 100 ml 0.1 M PO4 Buffer, pH 7.3 150 ml dH2O
Ringer’s solution 6.7g NaCl 0.2g KCl 0.2g CaCl2 1.2g Hepes 1 L H2O Adjust pH to 7.2
Equipment:
Dissecting dish with mat Electron Microscopy Sciences catalog #70540
Vannas spring scissors Fine Science Tools catalog #91500-09