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Estudio de la acumulación preformada de la dopamina fibril-sinucleina en las neuronas de dopamina de cerebro medio del ratón embrionario primario
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Chapitres
- 00:04Introduction
- 01:11Primary Embryonic Midbrain Culture Plate Preparation
- 01:53Primary E13.5 Embryonic Midbrain Culture Setup
- 04:32Seeding with Pre-Formed Fibrils (PFFs) and Semi-automated Immunofluorescence Imaging
- 06:21High-Content Image Analysis
- 07:42Results: Representative Midbrain Culture Characterization and Analysis
- 09:13Conclusion
Aquí, presentamos un protocolo detallado para estudiar la acumulación de sinucleína neuronal en las neuronas primarias de dopamina de ratón. Los agregados de sinucleína fosforilada en las neuronas se inducen con fibrillas preformadas de sinucleína. Las imágenes automatizadas de células etiquetadas inmunofluorescentemente y análisis de imágenes imparciales hacen que este protocolo robusto sea adecuado para el cribado de rendimiento medio-alto de fármacos que inhiben la acumulación de sinucleína.
