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Studio pre-formato Fibril indotta accumulazione di z-sinucleina in primario embrionale Midbrain Dopamine Neuroni
Journal JoVE
Neurosciences
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Journal JoVE Neurosciences
Studying Pre-formed Fibril Induced α-Synuclein Accumulation in Primary Embryonic Mouse Midbrain Dopamine Neurons
DOI:

10:03 min

August 16, 2020

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Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 01:11Primary Embryonic Midbrain Culture Plate Preparation
  • 01:53Primary E13.5 Embryonic Midbrain Culture Setup
  • 04:32Seeding with Pre-Formed Fibrils (PFFs) and Semi-automated Immunofluorescence Imaging
  • 06:21High-Content Image Analysis
  • 07:42Results: Representative Midbrain Culture Characterization and Analysis
  • 09:13Conclusion

Summary

Traduction automatique

Qui, vi presentiamo un protocollo dettagliato per studiare l'accumulo neuronale di sinucleina nei neuroni primari della dopamina del topo. Gli aggregati di sibbonucleina fosfolati nei neuroni sono indotti con fibrille pre-formate e sinucleina. L'imaging automatizzato di cellule etichettate immunofluorescentmente e l'analisi imparziale dell'immagine rendono questo protocollo robusto adatto per lo screening della produttività medio-alta di farmaci che inibiscono l'accumulo di sinucleina.

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