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研究原发性胚胎小鼠中脑多巴胺神经元中预制纤维诱导β-合成素积累

Journal JoVE
Neurosciences

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Studying Pre-formed Fibril Induced α-Synuclein Accumulation in Primary Embryonic Mouse Midbrain Dopamine Neurons

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研究原发性胚胎小鼠中脑多巴胺神经元中预制纤维诱导β-合成素积累

DOI:

10.3791/61118-v

•

10:03 min

•

August 16, 2020

•

Safak Er, Irena Hlushchuk, Mikko Airavaara, Piotr Chmielarz³, Andrii Domanskyi

¹Institute of Biotechnology, HiLIFE,University of Helsinki, ²Neuroscience Center, HiLIFE,University of Helsinki, ³Department of Brain Biochemistry, Maj Institute of Pharmacology,Polish Academy of Sciences

Chapitres

00:04Introduction
01:11Primary Embryonic Midbrain Culture Plate Preparation
01:53Primary E13.5 Embryonic Midbrain Culture Setup
04:32Seeding with Pre-Formed Fibrils (PFFs) and Semi-automated Immunofluorescence Imaging
06:21High-Content Image Analysis
07:42Results: Representative Midbrain Culture Characterization and Analysis
09:13Conclusion

Summary

Traduction automatique

在这里，我们提出了一个详细的协议，研究神经元+-合成素积累在原发性小鼠多巴胺神经元。神经元中的磷酸化β-合成素聚合体通过预制的β-合成素纤维诱导。免疫荧光标记细胞的自动成像和无偏图像分析使这个强大的协议适用于抑制β-合成素积累的药物的中高通量筛选。

Tags

Keywords: Alpha-synuclein Preformed Fibrils Primary Dopamine Neurons Parkinson’s Disease Neurodegenerative Disease Protein Accumulation Cell Culture High-throughput Screening Image Analysis Neuron Function Molecular Mechanisms

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